温颖婉 陈钰婷 钟柳芳

中药材黑枣质量标准研究

温颖婉 陈钰婷 钟柳芳

目的建立黑枣质量标准。方法参考2015年版《中国药典》，制订中药材黑枣质量控制方法，包括性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱鉴别和总灰分检查。结果薄层色谱斑点清晰，专属性强，适应性好；总灰分测定平均值为1.6%，初步拟定为不超过2.0%。结论该研究制定的方法操作简便，结果准确可靠，重现性好，可有效控制黑枣的质量。

黑枣；中药材；质量标准

黑枣又称熏枣、紫晶枣、马牙枣、狗头枣[1]，来源于鼠李科植物枣。大枣又名红枣、干枣、枣子，起源于中国，在中国已有八千多年的种植历史，自古以来就被列为“五果”（桃、李、梅、杏、枣）之一。大枣富含多种有机成分、无机成分及微量元素，微量元素中维生素C含量在“五果”中位居第一，素有维生素王之美称[2]。而黑枣，为选用熟鲜大枣，经水煮、窑熏、阴凉等工艺加工而成，含氨基酸、蛋白质、膳食纤维、总糖、黄酮、胡萝卜素等人体所需元素，具有补中益气、养血安神作用，用于脾虛食少，具有健脾养胃、滋补肝肾、润燥生津的功效。经现代研究发现，多样成分的大枣具有多种药理活性，主要集中于延缓衰老、抗氧化、抗肿瘤、保肝护肝、降血脂等方面，其主要活性物质是大枣多糖。国内学者认为大枣补气生血的基础是大枣多糖，多糖不仅是能量基础同时能激活体内免疫细胞[3]。除多糖外，从大枣中分离得到的三萜酸类物质具有抑制癌细胞增长活性，且具有一定选择性，尤其对乳腺癌细胞选择性更高，大枣三萜酸类物质已成为抗肿瘤治疗的研究热点。另外，大枣中的环磷酸腺苷（Cyclic Adenosine monophosphate,cAMP）含量比其他果类均高，而cAMP作为人体内第2信使具有放大激素传导和直接控制遗传信息作用，主要功能为舒张平滑肌、激活蛋白质、扩张毛细血管等，对多种疾病具有显著疗效，如心脏相关疾病休克、冠状动脉粥样硬化性心脏病、心肌梗死等，此外对顽固性牛皮癣也有一定疗效。

黑枣作为广东地区常用中药材，又称为“乌枣”或“熏枣”；大枣广东习称“红枣”，一般不作配方用，只作果品或煲汤料”；第3种广东称为“南枣”，为经干燥烘培炮制而成的枣，民间多当作茶叶使用或作为药酒浸泡药材。同一大枣经 3种不同炮制方法，形态和作用均有改变，有别于蒙药中广枣（来源漆树科）[4]。近年来，北方市场出现一种“黑枣”食品，其来源是落叶乔木柿属柿科的君迁子，《本草纲目》称之为软枣[5]，与广东地区常用中药材黑枣有显著差别。黑枣作为地方民间用药研究甚少，尤其对于其质量标准，缺少相关科学文献，与《药典》收载的品种同名异物，引起混名混用。为了规范临床用药名称和确保质量，本研究制定黑枣质量标准，为其临床应用及开发提供理论依据，以保证临床用药的安全有效。

1 材料与仪器

1.1 材料普通硅胶G预制板（烟台化学工业研究所，批号：100422；青岛海洋化工厂分厂，批号：20080515；德国 Merck默克公司，批号：HX42524826）；所用化学试剂均为分析纯；齐墩果酸和白桦脂酸对照品均购自中国食品药品检定研究院，批号分别为110709-201206、111802-201001；黑枣对照药材由康美药业股份有限公司提供，经广东省食品药品检验所鉴定；黑枣供试品 5批自行收集（经鉴定），自编号为1-5。

1.2 仪器十万分之一电子天平（岛津AUW120D）；生物显微镜（奥林巴斯 BX43）；高频数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司，型号：KQ-500TDB）；研磨机（IKA A11 BS25）；四用紫外分析仪（上海嘉鹏科技有限公司，型号：ZF-8）。

2 方法与结果

2.1 鉴别

2.1.1 性状鉴别 本品长1.5～3.0 cm，直径0.5～2.0 cm，呈类椭圆干瘪状，整颗果实表面有皱褶呈紫黑色，表面光泽，果皮轻薄，肉质呈黑褐色，油润而柔软，气香而味甜，糖分丰富；果核呈类纺捶形状，呈褐色，质地硬。实物见图1。

图1 黑枣性状图

2.1.2 显微鉴别 黑枣研磨成粉末后呈黑褐色，显微下观察外果皮有多种形状，主要以方形居多，具有厚实角质层，细胞内充满棕红色物质；内皮细胞呈长方形、多边形，细胞壁层较厚呈黄棕色或黄色，充斥草酸钙簇晶和方晶；果核细胞多边形居多，细胞内充满浅黄色或棕黄色物质，细胞各层之间明显，致密排列。见图2。

图2 黑枣粉末显微特征1. 表皮细胞 2. 表皮下细胞 3. 草酸钙簇晶4. 果核石细胞 5. 草酸钙砂晶 6. 草酸钙方晶

2.1.3 薄层色谱鉴别 本品为大枣加工炮制品，含齐墩果酸、白桦脂酸、氨基酸、蛋白质、膳食纤维、总糖、黄胴、胡萝卜素等化学成分[6]，故参照《中国药典》2015年版中大枣检验标准[7]，选定齐墩果酸与白桦脂酸建立相应薄层色谱鉴别方法。称取本品2.0 g置于25 ml锥形瓶中，量取高沸点石油醚10 ml浸泡，时间10 min之后超声处理10 min，抽滤瓶过滤，滤饼晾干后置于25 ml锥形瓶中，量取乙醚20 ml浸泡60 min之后超声处理15 min，抽滤瓶过滤，收集滤液浓缩至 1 ml，浓缩液放置冰箱作为供试品保存备用。另取一份黑枣对照药材粉末2.0 g，处理方法同供试品，得到对照品溶液。分别称取齐墩果酸对照品和白桦脂酸对照品5.0 mg，分别用5 ml乙醇溶解，制备成浓度为1 mg/ml对照品溶液备用。依照2015年版《中华人民共和国药典》中薄层色谱法通则，采用甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（14:4:0.5）为展开剂，采用点样针吸取10 μl供试品溶液、10 μl对照药材溶液、3 μ1对照品溶液点样于预制硅胶G板上，放入展开缸中进行饱和并展开，之后取出晾干，喷洒 10%硫酸乙醇溶液进行显色，加热处理薄层板，在365 nm紫外灯下进行检视。结果显示，与对照药材、对照品比较，供试品药材具有相同颜色斑点。薄层图谱见图3。

2.1.3.1 不同薄层板比较 选取不同品牌硅胶预制薄层板，分别按拟定试验方法试验。结果表明，3种薄层板均能达到鉴别要求，其中默克硅胶预制薄层板斑点相对清晰，分离度较好，色谱效果更佳，见图4-6。

2.1.3.2 不同温度比较 取点样后的薄层板，分别在低温9 ℃和常温24 ℃环境下进行展开。结果表明，该方法对不同温度的适应性均较好，见图7、8。

图4 烟台硅胶C预制板1. 齐墩果酸对照品 2. 白桦脂酸对照品 3.黑枣对照药材4-8. 供试品（编号1-5）

图5 青岛硅胶C预制板1. 齐墩果酸对照品 2. 白桦脂酸对照品 3.黑枣对照药材4-8. 供试品（编号1-5）

图6 默克硅胶C预制板1. 齐墩果酸对照品 2. 白桦脂酸对照品 3.黑枣对照药材4-8. 供试品（编号1-5）

图7 低温（9 ℃）的展开效果1. 齐墩果酸对照品 2. 白桦脂酸对照品 3.黑枣对照药材4-8. 供试品（编号1-5）

图8 常温（24 ℃）的展开效果1. 齐墩果酸对照品 2. 白桦脂酸对照品 3.黑枣对照药材4-8. 供试品（编号1-5）

2.1.3.3 不同湿度比较 取点样后的薄层板，分别在32%和88%湿度中展开。结果表明该方法对不同湿度环境适应性均较好，见图9、10。

图10 高湿（88%） 展开结果

图9 低湿（32%）展开结果

2.2 检查 按照灰分测定法（《中国药典》2015年版通则2302）测定。实测样品5批，结果为1.5%～1.6%，平均值 1.6%。以平均值的 120%为限，规定本品总灰分不得超过2.0%。测定结果见表1。

表1 总灰分测定结果

3 讨论

根据方法学考察结果，薄层色谱鉴别方法适应性强，色谱斑点清晰，专属性强。该研究中还对黑枣的水分和浸出物进行限度测定，由于黑枣为肉质，糖分较高具黏性，粉碎困难，颗粒大小（粉末粗细）对干燥时长、水分结果具有明显影响，难以恒重，操作不便，而浸出物检查则需要以扣除水分后的干燥品为计算基准。参考《中国药典》2015年版1部大枣的检验标准，没有收载水分和浸出物检查项。综上，只把总灰分检查纳入黑枣的质量标准检查项目中。

本实验参照药典制定的黑枣质量控制方法，包括性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱鉴别和总灰分检查，总灰分测定平均值为1.6%，初步拟定为不超过2.0%。该研究制订的方法操作简便，结果准确可靠，重现性好，可有效控制黑枣质量，为临床安全有效使用提供依据。

[1] 中国科学院《中国植物志》编委会.中国植物志[M].北京:科学出版社,1979,13(2):107.

[2] 陈熹,李玉洁,杨庆,等.大枣现代研究开发进展与展望[J].世界科学技术-中医药现代化,2015,17(3):687-691.

[3] 郭盛,唐于平,段金戚.大枣的化学成分及药理作用研究进展[J].凯里:全国第8届天然药物资源学术研讨会论文集,2008.

[4] 伍月红,刘柏英.广东习用中药材品种鉴定和质量分析[J].时珍国医国药,2005,16(9):941-942.

[5] 畅凌冰,王治军,梁臣,等.黑枣的价值及繁育[J].绿色科技,2012(10): 68-69.

[6] 李小平.红枣多糖提取工艺研究及其生物功能初探[D].西安:陕西师范大学,2004.

[7] 中环人民共和国国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].北京:中国医药科技出版社,2015.

Study on Quality Standard of Fumabat jujubae fructus

Wen Yingwan Chen Yuting Zhong Liufang

ObjectiveTo establish the quality standard of Fumabat jujubae fructusMethodsAccording to the methods in Chinese Pharmacopeia 2015,the quality standard including characteristic identification,microscopic identification,TLC identification and determination of total ash has been identified.ResultsClear spots appeared in TLC had strong specificity and good adaptability. It was initially proposed that Determination of total ash was not more than 2.0% with an average value of 1.6%.ConclusionsThe methods are simple,reliable and reproducible.The quality of medicinal materials can be effectively controlled.

Fumabat jujubae fructus;Traditional Chinese medicinal materials;Quality Standard

10.12010/j.issn.1673-5846.2017.05.008

广州市番禺区食品药品检验所，广东广州 511400

温颖婉（1983-），主管中药师。研究方向：药品检验及实验室管理