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精异丙甲草胺对小麦药害及其安全剂解毒作用初步研究

2017-02-13吴仁海孙慧慧苏旺苍徐洪乐鲁传涛孙建伟杨东升

植物保护 2017年1期
关键词:草胺药害抑制率

吴仁海, 孙慧慧, 苏旺苍, 薛 飞, 徐洪乐,鲁传涛*, 孙建伟, 杨东升

(1. 河南省农业科学院植物保护研究所,河南省农作物病虫害防治重点实验室,郑州 450002; 2. 河南省南阳市桐柏县植保植检站,南阳 474750)

精异丙甲草胺对小麦药害及其安全剂解毒作用初步研究

吴仁海1, 孙慧慧1, 苏旺苍1, 薛 飞1, 徐洪乐1,鲁传涛1*, 孙建伟1, 杨东升2

(1. 河南省农业科学院植物保护研究所,河南省农作物病虫害防治重点实验室,
郑州 450002; 2. 河南省南阳市桐柏县植保植检站,南阳 474750)

为了探索精异丙甲草胺在小麦田的应用技术,室内研究了精异丙甲草胺对小麦的安全性,对安全剂进行筛选,并对安全剂作用机制进行初步研究。结果表明,精异丙甲草胺对小麦的生长抑制作用随着土壤含水量增大及温度的下降而上升。对4种安全剂进行筛选,结果表明,解草酮0.5、5 g/kg种子处理能够显著降低精异丙甲草胺对小麦的药害,解草啶、二氯丙烯胺、苯叉酰胺在低剂量下能够一定程度缓解精异丙甲草胺药害,但高剂量无缓解作用。进一步研究表明,解草酮0.5~4 g/kg种子处理能够有效降低精异丙甲草胺150~600 g/hm2(有效成分含量)造成的小麦药害,缓解率均在20%以上,其中1 g/kg解草酮种子处理缓解效果最好,提高小麦对精异丙甲草胺的耐药性可达4倍以上。生理指标测定结果表明,解草酮1 g/kg种子处理可显著提高小麦出苗期(播后4~6 d)GSTs比活力,而GSH含量与对照相当或降低。表明解草酮可能通过提高小麦GSTs活力来增强GSH对精异丙甲草胺的轭合代谢作用,而非通过增加GSH含量来提升精异丙甲草胺降解。

精异丙甲草胺; 小麦; 药害; 安全剂; 解草酮; 缓解技术

小麦是我国第二大粮食作物,年种植面积3 000多万hm2。麦田杂草是影响小麦产量的主要因素之一,我国30%小麦田深受杂草危害,小麦因此减产15%左右,每年损失约150万t[1]。近年来,由于长期单一施用除草剂及不规范调种和引种,小麦田禾本科杂草发生越来越重,多种禾本科杂草常常混合发生,难以防治。而麦田苗后防除禾本科杂草的除草剂,如炔草酯[2-4]、精噁唑禾草灵[2,5-6]、甲基二磺隆[7-9]等,大多数品种无法有效控制小麦田所有禾本科杂草,且杂草抗药性也迅速上升。酰胺类除草剂具有价格低廉、广谱高效、对禾本科杂草防效较好、不易产生抗药性等优点,是当前农田常用除草剂。因此部分地区利用酰胺类除草剂土壤处理防治小麦田杂草[10-11],但易出现药害。

精异丙甲草胺是酰胺类除草剂常用品种,在番茄、菜豆、甜菜、西瓜、油菜、烟草、马铃薯、芝麻、大豆、棉花等作物上登记推广,防除一年生禾本科杂草及部分阔叶杂草[12-14],但其并没有在小麦上获得大面积推广。虽然精异丙甲草胺具有较好的除草效果,但若在小麦田推广,其安全性须进一步提高。安全剂常常用来提高除草剂对作物的安全性,已有报道表明,二氯丙烯胺[15]、苯叉酰胺[15]、解草啶[16-17]、解草酮[18]均可用作酰胺类除草剂的安全剂。为了探索精异丙甲草胺在小麦田应用技术,评价其在小麦田使用潜力,本文对精异丙甲草胺在小麦上应用的安全性进行评估,并初步研究了精异丙甲草胺安全剂及解毒作用,现将结果整理如下。

1 材料与方法

1.1 试验材料及药剂

小麦品种:‘郑麦9023’,河南秋乐种业科技股份有限公司,市售。安全剂:97%二氯丙烯胺(dichlormid),邹平铭兴化工有限公司;98%解草啶(fenclorim)、97%解草酮(benoxacor)、97%苯叉酰胺(AD-67),南京艾森精细化工有限公司。除草剂:960 g/L精异丙甲草胺乳油,瑞士先正达作物保护有限公司。丙酮,分析纯,天津市科密欧化学试剂开发中心。

1.2 药剂配制

960 g/L精异丙甲草胺乳油适量,加水稀释定容至所需浓度。

安全剂二氯丙烯胺、苯叉酰胺、解草啶、解草酮适量,以丙酮溶解并定容至所需浓度。

1.3 供试土壤

土壤为潮土,取自河南省农业科学院试验基地田土,风干,过0.850 mm筛。

土壤主要指标如下:

速效氮29.8 mg/kg,速效磷6.5 mg/kg,速效钾78.3 mg/kg,全氮0.046%,有机质0.549%,pH=8.38。

1.4 环境对精异丙甲草胺小麦药害影响评价方法

1.4.1 毒土法

将精异丙甲草胺药液加入风干土壤中,配制成精异丙甲草胺浓度为4、2、1、0.5、0.25 mg/kg毒土,并调节土壤含水量为设定含水量。取100 mL一次性塑料杯,先装入约2 cm高度土,植入小麦种子10粒,覆土5 cm,以保鲜膜封口以保湿,置于不同温度人工气候箱培养。人工气候箱中光照周期L∥D=14 h∥10 h,相对湿度90%,光照强度30 000 lx。

设置土壤含水量梯度为16%、18%,培养温度梯度为18、23、28℃。以清水拌土为对照,每个处理设3个重复。培养4 d后,去除土壤,调查小麦株高,计算生长抑制率及生长抑制方程,比较不同温度、土壤含水量下精异丙甲草胺对小麦生长的抑制作用。

1.4.2 土壤封闭法

取风干土壤,调节至所需含水量,装盆3/4处(高度7.5 cm,直径8.5 cm),植入小麦种子10粒,覆土,喷施相应剂量精异丙甲草胺于土表,室内平衡4 h,保鲜膜封口以保湿,置于不同温度人工气候箱培养。

设置高温低含水量和低温高含水量二组处理。高温低含水量组土壤含水量为15%,培养温度为28℃,设置精异丙甲草胺剂剂量为3 000、1 500、750、375、187.5 g/hm2(有效成分含量)。低温高含水量组土壤含水量为20%,培养温度为18℃,精异丙甲草胺土壤喷雾剂量为900、600、300、150、75 g/hm2(有效成分含量)。各处理设3个重复,以喷施清水为对照,培养12 d调查小麦地上部分株高,计算株高抑制率。

土壤封闭喷雾方法:以吉田k-3油漆喷枪喷雾,以直连便携式空气压缩机(ZB-0.071/7,泉州日豹机电有限公司)提供气压源,以减压阀调节压力至0.3~0.5 MPa,调节喷枪头控制喷雾速度为0.8~1 mL/s,喷液量为450 kg/hm2。

1.5 安全剂对精异丙甲草胺药害的缓解作用

1.5.1 精异丙甲草胺安全剂初步筛选

材料培育方法同毒土法,精异丙甲草胺2 mg/kg毒土处理,调节土壤含水量为20%。安全剂种子处理方法见文献[18],设置各安全剂种子处理剂量为0.5、5 g/kg种子,每个剂量处理20 g种子,药液量为种子质量的1/10,空白对照组以清水拌土、丙酮进行种子处理,阳性对照组以精异丙甲草胺2 mg/kg 毒土处理。每个处理设3个重复,置于18℃人工气候箱培养。培养4 d后去除土壤,调查小麦株高,计算生长抑制率和安全剂缓解率。

1.5.2 不同剂量解草酮对精异丙甲草胺药害缓解效果评价方法

材料培育方法同土壤封闭法,风干土壤加清水调节含水量为20%。解草酮种子处理剂量为4、2、1、0.5、0.1 g/kg,播后土表封闭喷施精异丙甲草胺,设置精异丙甲草胺剂量为600、300、150 g/hm2(有效成分含量),以丙酮处理种子播后土表喷施600、300、150 g/hm2(有效成分含量)精异丙甲草胺为相应除草剂对照,喷施清水为空白对照,每个处理设3个重复,置于18℃人工气候箱,培养12 d后测定小麦地上部分株高,计算生长抑制率和安全剂缓解率。

1.5.3 解草酮作用机制测定方法

风干土壤加清水调节绝对含水量为20%。设置解草酮1 g/kg种子处理+600 g/hm2(有效成分含量)精异丙甲草胺土壤封闭、解草酮1 g/kg种子处理、600 g/hm2(有效成分含量)精异丙甲草胺土壤封闭、空白对照组4个处理,置于恒定18℃人工气候箱培养,分别于药后4、5、6、7、8、9 d剪取小麦幼苗,液氮速冻后待用,参照文献测定谷胱甘肽转移酶(glutathioneS-transferase,以下简写为GSTs)[19]比活力及谷胱甘肽(glutathione,以下简写为GSH)含量[20]。

1.6 数据处理与方差分析方法

以DPS2000软件进行统计分析,以Duncan’s新复极差法进行差异显著性检验;其他计算分析参照文献[21]使用Excel 2003进行。除草剂对小麦生长抑制率及安全剂的缓解率计算公式如下:

生长抑制率(%)=

(1)

缓解率(%)=Sa- S1

(2)

式中:Sa为a剂量下除草剂对小麦生长抑制率;

S1为a剂量下除草剂与安全剂混用对小麦生长抑制率。

2 结果与分析

2.1 环境条件对小麦精异丙甲草胺药害的影响

在室内不同温度、土壤含水量下,采用毒土法测定异丙甲草胺对小麦生长的抑制作用,结果表明,在土壤含水量恒定(16%),温度为18、23、28℃时,精异丙甲草胺对小麦生长抑制中浓度ED50值分别为5.31、6.40、13.94 mg/kg土,表明随着温度下降,精异丙甲草胺对小麦生长抑制作用升高。在温度恒定(23℃),土壤含水量由16%升至18%,精异丙甲草胺对小麦芽抑制ED50值由6.40 mg/kg土降低至3.31 mg/kg土,表明随着土壤含水量上升,精异丙甲草胺对小麦生长抑制作用亦加重。

表1 不同温度、土壤含水量下精异丙甲草胺对小麦生长抑制作用

Table 1 The wheat-seedling growth inhibition caused byS-metolachlor under different temperatures and soil moistures

温度/℃Temperature含水量/%Moisture抑制活性方程EquationofinhibitiveactivityED50/mg·kg-1R1816y=4.3234+0.9330x5.310.99912316y=4.6003+0.4958x6.400.99222816y=4.1703+0.7252x13.940.95022318y=3.8611+2.1919x3.310.9977

为了进一步评估温度、土壤含水量对精异丙甲草胺药害的影响,在室内盆栽条件下测定精异丙甲草胺土壤封闭对小麦生长的抑制作用,结果表明,在高温低含水量(28℃、土壤含水量15%)条件下,187.5、375、750、1 500、3 000 g/hm2(有效成分含量)精异丙甲草胺使用剂量,对小麦株高抑制率分别为1.57%、0.91%、8.01%、66.20%、71.91%;而低温高含水量(18℃、土壤含水量20%)的情况下,75、150、300、600、900 g/hm2(有效成分含量)精异丙甲草胺对小麦的抑制率分别为33.1%、69.47%、87.38%、88.85%、90.40%。由此可见低温高含水量(18℃,土壤含水量20%)下150 g/hm2(有效成分含量)精异丙甲草胺与高温低含水量(28℃,土壤含水量15%)1 500 g/hm2(有效成分含量)精异丙甲草胺对小麦的药害相当,但精异丙甲草胺剂量相差10倍,表明环境对异丙甲草胺药害影响巨大。

表2 28℃土壤含水量15%条件下精异丙甲草胺对小麦生长的影响1)

Table 2 The influence ofS-metolachlor on wheat-seedling
growth under the conditions of 15% soil moisture at 28℃

剂量/g·(hm2)-1Dose平均株高/cmAverageheight抑制率/%Inhibitionrate3000(4.71±0.97)bB71.911500(5.67±0.72)bB66.20750(15.43±0.24)aA8.01375(16.62±0.35)aA0.91187.5(16.51±0.23)aA1.57CK(16.77±0.26)aA-

1) 同列数值后不同的大、小写字母分别表示处理间差异极显著(P<0.01)和显著(P<0.05),下同。 Different capital or lowercase letters indicate significant difference among treatments in the same part at 0.01 or 0.05 level. The same below.

表3 18℃土壤含水量20%条件下精异丙甲草胺对小麦活性测定结果

Table 3 The effects ofS-metolachlor on wheat-seedling growth under the conditions of 20% soil moisture at 18℃

剂量/g·(hm2)-1Dose平均株高/cmAverageheight抑制率/%Inhibitionrate900(1.55±0.07)dC90.40600(1.80±0.09)dC88.85300(2.03±0.23)dC87.38150(4.92±1.45)cC69.4775(10.78±1.42)bB33.10CK(16.11±0.41)aA-

2.2 安全剂对精异丙甲草胺药害的缓解作用

2.2.1 不同安全剂对精异丙甲草胺药害的解毒效果

不同安全剂小麦种子处理对精异丙甲草胺药害减缓作用见表4。低剂量(0.5 g/kg种子)下,4种安全剂种子处理对精异丙甲草胺药害均有一定缓解效果,缓解率高于10%。二氯丙烯胺、苯叉酰胺、解草啶高剂量(5 g/kg种子)种子处理对精异丙甲草胺药害缓解性能较差,二氯丙烯胺甚至出现加重药害的现象。解草酮0.5、5 g/kg种子处理,对精异丙甲草胺对小麦药害缓解率均在 20%以上,表明解草酮对精异丙甲草胺药害缓解效果最好。

表4 4种安全剂种子处理对精异丙甲草胺小麦药害的缓解作用1)

Table 4 The alleviation of four kinds of safeners by seed treatment to wheat-seedling injury fromS-metolachlor

安全剂Safener剂量/g·kg-1Dose生长抑制率/%Growthinhibitionrate缓解率/%Alleviationrate二氯丙烯胺Dichlormid0.524.10cCD14.54568.56aA-29.92苯叉酰胺AD-670.516.76cdD21.88542.49bB-3.84解草啶Fenclorim0.521.68cD16.97535.32bBC3.32解草酮Benoxacor0.517.45cdD21.19511.60dD27.04CK+-38.64bB-

1) CK+为阳性对照组,以精异丙甲草胺2 mg/kg毒土处理。 CK+: The positive control group, soil-treated with 2 mg/kgS-metolachlor.

2.2.2 解草酮对精异丙甲草胺药害缓解效率评估

不同剂量的解草酮种子处理对精异丙甲草胺对小麦药害的缓解效果见表5。150 g/hm2(有效成分含量)精异丙甲草胺单独使用对小麦的生长抑制率达30.19%,而解草酮0.1~4 g/kg种子处理显示出较好的保护效果,小麦生长抑制率降低到10%以下,缓解率为24.04%~28.97%。单独使用300 g/hm2(有效成分含量)精异丙甲草胺,小麦生长抑制率超过60%,解草酮0.1~4 g/kg种子处理缓解率为30.31%~52.74%,其中解草酮0.5~4 g/kg处理下,缓解率可达45%以上,显示出明显的缓解效果。精异丙甲草胺使用量为600 g/hm2(有效成分含量)时,小麦生长抑制率为70.49%,解草酮0.5~4 g/kg种子处理缓解率为21.42%~54.64%,其中1 g/kg种子处理后小麦生长抑制率降低至15.85%,甚至低于150 g/hm2(有效成分含量)精异丙甲草胺单独使用对小麦的生长抑制作用,表明解草酮1 g/kg种子处理可提高小麦对精异丙甲草胺的耐药性达4倍以上。以上结果表明,解草酮0.5~4 g/kg种子处理对精异丙甲草胺小麦药害缓解作用明显,其中以1 g/kg种子处理效果最为理想。

表5 解草酮种子处理对不同剂量的精异丙甲草胺小麦药害缓解效果

Table 5 The alleviating effect of benoxacor seed treatment on wheat-seedling injury from different doses ofS-metolachlor

解草酮剂量/g·kg-1Seedtreatmentdoseofbenoxacor精异丙甲草胺剂量/g·hm-2 DoseofS-metolachlor150g/hm2株高抑制率/%Inhibitionrateofheight缓解率/%Alleviationrate300g/hm2株高抑制率/%Inhibitionrateofheight缓解率/%Alleviationrate600g/hm2株高抑制率/%Inhibitionrateofheight缓解率/%Alleviationrate030.19aA-62.82aA-70.49aA-0.11.98bB28.2132.51bB30.3170.71aA-0.220.56.15bB24.0413.21cB49.6149.07abAB21.4212.99bB27.2017.01bcB45.8115.85cB54.6425.73bB24.4610.08cB52.7432.32bcAB38.1741.22bB28.9712.08cB50.7444.88abAB25.61

2.2.3 解草酮对精异丙甲草胺解毒机制的初步研究

2.2.3.1 解草酮种子处理对小麦GSTs比活力的影响

小麦幼苗破土前(药后4~5 d),解草酮1 g/kg种子处理与解草酮1 g/kg种子处理+600 g/hm2(有效成分含量)精异丙甲草胺处理GSTs比活力无显著差异,均极显著高于空白对照处理。药后第6 天,小麦破土出苗,小麦胚芽鞘吸收除草剂,除草剂药害开始显现,此时解草酮1 g/kg种子处理+600 g/hm2(有效成分含量)精异丙甲草胺、600 g/hm2(有效成分含量)精异丙甲草胺处理及对照GSTs比活力无显著差异,均显著低于解草酮1 g/kg种子处理。而处理后7 d,解草酮1 g/kg种子处理+600 g/hm2(有效成分含量)精异丙甲草胺处理GSTs比活力上升,显著高于600 g/hm2(有效成分含量)精异丙甲草胺处理及对照。处理后8~9 d,各处理间GSTs比活力均无显著差异。

图1 解草酮1 g/kg种子处理对封闭喷施精异丙甲草胺的小麦幼苗GSTs比活力的影响Fig.1 The influence of seed-treatment with 1 g/kg benoxacor on wheat-seedling GSTs activity with pre-emergent spray of S-metolachlor

2.2.3.2 解草酮种子处理对小麦GSH含量的影响

试验期间,600 g/hm2(有效成分含量)精异丙甲草胺处理小麦幼苗GSH含量与对照均无显著差异。经解草酮1 g/kg种子处理播后封闭喷施600 g/hm2(有效成分含量)精异丙甲草胺处理,药后4 d小麦幼苗组织GSH含量极显著高于对照,6~7 d较对照显著降低38.96%~39.42%,其余时间与对照无显著差异。解草酮1 g/kg种子处理7 d小麦幼苗组织GSH含量较对照显著下降23.65%,其余时间与对照无显著差异。表明解草酮1 g/kg种子处理对破土前后小麦幼苗组织GSH含量变化有影响,封闭喷施600 g/hm2(有效成分含量)精异丙甲草胺本身对小麦幼苗组织GSH含量变化无显著影响。

图2 解草酮1 g/kg种子处理对封闭喷施精异丙甲草胺小麦幼苗GSH含量的影响Fig.2 The influence of seed-treatment with 1 g/kg benoxacor on wheat-seedling GSH content with pre-emergent spray of S-metolachlor

3 结论与讨论

酰胺类除草剂对杂草的活性与对作物的药害受温度和湿度影响非常大,通常温度越低、湿度越大时,药害作用就会越强[22]。本试验利用毒土法证实,精异丙甲草胺对小麦生长的抑制作用随着温度的降低而增大,随着土壤含水量的上升亦增大;利用土壤封闭处理表明,精异丙甲草胺在低温高含水量情况下对小麦抑制作用较高温低含水量情况下升高约10倍。冬小麦出苗期温度低,墒情较好,因而精异丙甲草胺在冬小麦田应用药害风险很高。

安全剂对除草剂的解毒作用有较强的选择性[23],能够增强一些作物对除草剂的抵抗作用,但使用不当亦会对作物产生药害[24]。二氯丙烯胺、苯叉酰胺、解草啶在低剂量下(0.5 g/kg种子)对小麦表现出一定的保护作用,而高剂量(5 g/kg种子)下无法降低除草剂对小麦生长的抑制作用,二氯丙烯胺甚至出现加重药害的现象,表明这3种化合物并不是小麦精异丙甲草胺理想的安全剂。解草酮对精异丙甲草胺缓解效果较好,安全性高。解草酮0.5~4 g/kg种子处理对150~600 g/hm2(有效成分含量)精异丙甲草胺对小麦的药害均有明显的缓解效果,缓解率均在20%以上,其中以1 g/kg种子处理缓解效果最好,提高小麦对精异丙甲草胺耐药性可达4倍以上,表现出一定的应用价值。

精异丙甲草胺等酰胺类除草剂主要通过植物胚芽鞘吸收而产生毒害[25-26]。不敏感植物能够通过GSH与除草剂轭合等途径将除草剂降解而解毒[27],GSTs能够增强对除草剂与GSH的轭合作用,从而加速除草剂的降解[19]。一些研究表明,安全剂能够促进GSH轭合物的形成而保护作物免受除草剂的伤害,但这是由于安全剂诱导了GSH或GSTs,还是对两者都有效果,目前尚无定论[28]。本研究表明,解草酮1 g/kg种子处理,在出苗前(播后4~5 d)小麦幼苗GSTs比活力均显著高于对照,而GSH含量与对照相当;播后6~7 d小麦幼苗GSTs比活力高于对照,但GSH含量低于或显著低于对照,表明解草酮可能通过提高GSTs活力来增强GSH对精异丙甲草胺的轭合代谢而解毒,而非通过增加GSH含量来提升精异丙甲草胺降解。

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(责任编辑:田 喆)

Phytotoxicity ofS-metolachlor to wheat and its safener

Wu Renhai1, Sun Huihui1, Su Wangcang1, Xue Fei1, Xu Hongle1,
Lu Chuantao1, Sun Jianwei1, Yang Dongsheng2

(1.InstituteofPlantProtection,HenanAcademyofAgriculturalSciences,HenanKeyLaboratoryofCropPestControl,Zhengzhou450002,China; 2.TongbaiPlantProtectionandQuarantineStationinNanyang,HenanProvince,Nanyang474750,China)

In order to explore the application technology ofS-metolachlor in wheat fields, the safety ofS-metolachlor to wheat was evaluated and its safeners were examined indoors, and then the mechanism of efficient safener was studied. The results indicated that the wheat-seedling growth inhibition fromS-metolachlor would be aggravated as the soil moisture increased and the temperature decreased. Meanwhile, four safeners were tested by seed treatment. At 0.5, 5 g/kg, benoxacor could significantly reduce the phytotoxicity fromS-metolachlor. Fenclorim, dichlormid and AD-67 also showed moderate antidotal effect at 0.5 g/kg, but vanished at 5 g/kg. Further research showed that benoxacor was an excellent safener ofS-metolachlor on wheat. When seeds treated at 0.5-4 g/kg, wheat-seedling growth inhibition rate caused by 150-600 g/hm2S-metolachlor decreased by about 20%. As the best treatment, 1 g/kg benoxacor enhanced wheat-seedling resistance toS-metolachlor by more than 4 times. The physiological results showed wheat-seedling (4-6 d after sowing)GSTs activity significantly increased under seed treatment with 1 g/kg benoxacor, but no significant difference in GSH content, revealing that benoxacor might reduce wheat-seedling injury fromS-metolachlor by improving GSTs activity rather than GSH content in wheat.

S-metolachlor; wheat; phytotoxicity; safener; benoxacor; alleviating technology

2016-02-25

2016-06-20

公益性行业(农业)科研专项(201203098);河南省科技攻关计划项目(152102110141,162102110004)

S 482.46

A

10.3969/j.issn.0529-1542.2017.01.016

* 通信作者 E-mail: chuantaolu@qq.com

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