徐丽霞

通过血细胞分析复检规则发现1例EDTA抗凝剂引起的血小板假性减少病例

徐丽霞

目的探讨血细胞复检规则的重要性及血小板假性减少的原因及处理方法。方法通过工作中遇到的1例血小板假性减少的病例，根据血细胞分析复检规则，制作血细胞涂片显微镜复检及使用不同的抗凝剂处理检测血小板。结果血涂片镜检发现血小板聚集成堆，EDTA抗凝剂采血管检测血常规血小板异常减低，肝素抗凝管检测血常规血小板正常。结论复检规则在血常规检测中起着重要的作用。通过复检规则能避免单纯依靠仪器造成的误诊和漏诊，采用血涂片复检和更换肝素抗凝剂等方法可发现EDTA抗凝剂引起的血小板聚集，纠正由EDTA抗凝剂引起的血小板假性减少。

复检规则；血小板假性减少；EDTA抗凝剂

随着现代化仪器的不断更新和应用，血细胞分析仪早已取代了手工计数法被广泛的应用到临床实验室中，血细胞分析仪具有快速，准确，便捷的特点，特别是在人员紧张，标本量日益增大的情况下，更是给临床试验室带来了极大的帮助。但是血细胞分析仪也存在一定的不足，比如有时候也会有一些假阳性结果，需要手工推片来复检，以免造成漏诊和误诊。为此，国际血液学复检专家组（International Consensus Croup for hematology Review）在2005年制定了自动血细胞计数和白细胞分类计数的复检标准，该标准被国际实验血液学协会（ISLH）作为一个推荐方法介绍给全球使用各种自动化血液分析系统的专业人士参考[1]，这就是41条复检规则。在血常规检测中经常会遇到血小板减少的病例，根据国际血液学复检专家组制定的41条复检规则，对于血小板低于50×109/L的标本要采取复检，通常采用血涂片复检的方法，对于严重的血小板减少的病例，或者怀疑是EDTA抗凝剂引起的血小板假性减少的病例，涂片镜检能发现血小板聚集成团，重点观察片子的边缘和尾部，要更换枸橼酸钠抗凝管或肝素抗凝管采血，重新检测。

本文就临床工作中遇到的1例血小板减少的病例通过复检规则发现是血小板假性减少，并进一步验证是EDTA依赖性血小板假性减少来阐述血常规复检的重要性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

临床工作中遇到的1例血小板假性减少的病例，2017年4月2日，患者孙某，男，70岁，血小板9×109/L，其余指标都正常，复查结果血小板12×109/L。和临床医生及患者沟通得知患者以前去过多家医院检查过多次均是血小板减低，但始终未查出原因，因为血小板减低已经超出复检规则，按复检规则要推片镜检，制作血涂片经瑞-姬染色后显微镜下可见血小板聚集成团。

1.2 仪器与试剂

仪器日本Sysmex公司生产的XT-2000i全自动血细胞分析仪及原装配套试剂和质控物，质控采用高、中、低3个水平测试，Olympus显微镜。

试剂染色液贝索瑞-姬氏染色液，抗凝剂：EDTAK2抗凝肝素抗凝。

1.3 方法

取EDTA抗凝管中的血液制作血涂片，经瑞-姬染色后镜检，换肝素抗凝管重新采血做血常规检测，把EDTA抗凝管的标本放37℃水浴箱中孵育1小时后上机检测。

2 结果

在显微镜下镜检血涂片可见血小板聚集成堆，肝素抗凝血检测血小板102×109/L，EDTA抗凝管37℃水浴之后检测血小板仍然是减低的。

3 讨论

血小板是临床出血性疾病的重要参数之一，对临床医生判断患者情况有重要的指导意义，目前血细胞分析仪计数血小板受到多种因素的影响，红细胞碎片、白细胞碎片、小红细胞增多，导致血小板假性增高，另外血小板卫星现象，血小板碎片和EDTA抗凝剂诱导的血小板聚集又可导致仪器测定血小板降低。根据国际血液学复检专家组制定的41条复检规则，对于血小板低于50×109/L的标本要采取复检，通常采用血涂片复检的方法，复检规则在血常规检测中起着重要的作用。通过复检规则能避免单纯依靠仪器造成的误诊和漏诊。本文就是通过复检规则发现了1例EDTA-K2依赖性血小板假性减少病例。

按照国际血液学标准化委员会的建议，1.5～2.2 mg的EDTA-K2抗凝1 ml的全血可以抑制血小板聚集，从而达到抗凝的目的，但有极少数人的血小板在用EDTA抗凝时，反而会出现血小板聚集，这种EDTA依赖性假性血小板减少可能与血浆中存在的抗血小板抗体和抗心磷脂抗体等自身抗体有关。EDTA-K2可使血液发生免疫介导，产生冷抗血小板抗体，使血小板发生凝集现象，这种EDTA依赖的冷抗血小板自身抗体还能直接作用于血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa上，同时这种与血小板结合后的自身抗Fc端又可与淋巴细胞或单核细胞膜上Fc受体结合，出现卫星现象[2]，由于EDTA-K2可引起血小板的聚集或发生卫星现象，分析仪不能识别凝集的血小板，导致血小板计数偏低；当血小板聚集成堆与白细胞体积接近时，可被分析仪当作白细胞进行计数，这就造成了血小板假性减少和白细胞假性增多。

有报道称EDTA-K2作为抗凝剂，保持红细胞，白细胞，血小板形态不发生改变已被广泛应用并作为标准执行，但EDTA-K2作为抗凝剂的确有促使和诱导血小板发生凝集，从而导致血小板计数假性低下的问题偶有出现[3]。有文献报道EDTA依赖性假性血小板减少EDTA（PTCP）发生率为0.09%～0.21%[4]，虽然发生率不高，但应加以重视，2007年周小棉等[5]报道能用其它抗凝剂，如枸橼酸盐、NaF代替EDTA能得到准确的血小板计数。也可用肝素抗凝管，本文中的病例重新采血用肝素抗凝管后血小板计数为102×109/L，血小板假性减少得以纠正。血涂片形态检查，也是最基本最重要的实验室检查。对血小板减少的病例，重点关注血小板数量、大小、形态、聚集状态[6]。当发现患者血小板计数值偏低，患者没有任何出血倾向，此外，可引起血小板减少的疾病的相关检查指标在正常范围之内，应高度怀疑为EDTA-PTCP[7]。工作中发现血小板计数减少、直方图异常或异常报警时，操作人员应首先观察标本是否有凝集[8]。对于EDTA依赖性假性血小板减少的患者，要告知患者以后检查血常规时要和临床医生说明情况，采取不同的抗凝剂检测血常规。由于这种假性血小板减低会导致临床增加不必要的辅助检查，甚至引起临床误诊、误治，带给患者心理上的压力及身体上的痛苦，导致医疗资源的浪费。因此，提高假性血小板减少症的检测水平，必要时涂片镜检，已受到检验医生的重视，作为检验人员，在临床检验工作中更要做到认真仔细，严格按照血常规复检规则去做。对于临床上无任何出血症状与体征，出凝血时间正常而血小板明显减少者，建议涂片镜检观察是否有血小板聚集，如果有血小板聚集，怀疑为EDTA抗凝剂诱导的血小板假性减少，同时换肝素抗凝管重新采血检测。涂片镜检对于EDTA抗凝剂诱导的血小板聚集有着重要的价值。依据复检规则复检后避免了误诊，提高了检测的准确性。

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One Case of Thrombocytopenia Caused by EDTA Anticoagulants Were Found by Blood Cell Analysis Re-examination Rule

XU Lixia Department of Laboratory, TCM Hospital of Wangqing County,Wangqing Jilin 133200, China

ObjectiveTo investigate the importance of blood cell re examination rules and the causes and treatment of false reduction of platelets.MethodsA case of thrombocytopenia was encountered in the work. According to the blood cell analysis re examination rules, blood smear microscopy was used to recheck and use di ff erent anticoagulants to detect platelets.Results Platelet aggregation was detected by blood smear microscopy.Routineblood routine test, blood platelet abnormality and blood routine examination of heparin anticoagulant tube were detected by EDTA anticoagulant.ConclusionThe review rules play an important role in routine blood test. By reviewing the rules,he misdiagnosis and missed diagnosis can be avoided by relying solely on the instrument. Platelet aggregation induced by EDTA anticoagulant can be detected by blood smear reexamination and replacement of heparin anticoagulant. Correction of Pseudo thrombocytopenia by EDTA anticoagulants.

re-examination rule; platelet pseudo reduction; EDTA anticoagulant

R446

A

1674-9308（2017）24-0048-03

10.3969/j.issn.1674-9308.2017.24.023

吉林省汪清县中医院检验科，吉林 汪清 133200