李玉娟

内蒙古包头轻工职业技术学院乳品与农牧学院

包头地区奶牛子宫内膜炎致病葡萄球菌耐药性研究

李玉娟

内蒙古包头轻工职业技术学院乳品与农牧学院

从包头市所属辖区的奶牛养殖场采集到子宫内膜炎患牛的子宫分泌物120份，对其进行了致病葡萄球菌分离及鉴定，分离出50株葡萄球菌，其中金黄色葡萄球菌32株，凝固酶阴性葡萄球菌18株。在凝固酶阴性葡萄球菌中，产色葡萄球菌8株，腐生葡萄球菌5株，表皮葡萄球菌2株，头葡萄球菌2株，溶血葡萄球菌1株。针对现状进行葡萄球菌药敏试验。

一、药敏试验方法

1.药物浓度的配置

本试验所选抗生素的配制方法，保存方法、稀释浓度梯度均依据美国临床实验室标准化协会CLSI 2012年版药敏试验标准进行。

2.菌液制备

用移液枪精确移取200μL菌液打入事先准备好的、装有灭菌肉汤的试管内，在36℃±1℃的恒温摇床振荡过夜培养。次日，以灭菌的MH肉汤作为稀释液，对菌液进行稀释，使菌液达到0.5麦氏比浊管的浊度。将稀释好的菌液再按1:100的比例稀释菌液，配置成含菌量约为1×106CFU/毫升的菌液，备用。

3.MIC值的测定

本试验采用标准微量肉汤稀释法测定各受试药物的MIC值，并在96孔板上完成。试验设三种对照，分别是MH肉汤对照、不同抗菌药物对照、菌液对照试验所选的每种药物均重复三次，并以ATCC 29213作为质控菌株。本试验以MH肉汤对照和抗菌药物对照不长菌，菌液对照变浑浊以及ATCC的最小抑菌浓度MIC在质控范围内为前提下，若在96孔板中不长菌那个空的药物浓度即为最小抑菌浓度(MIC)。药物的控制范围及配置见表1。

表1 试验药物控制范围、判定标准及配置

二、试验结果

1.葡萄球菌药敏试验结果

本试验分别选取了11种兽医临床常用药和2种联合用药对分离的50株葡萄球菌进行药物敏感性试验，实验结果显示：青霉素、阿莫西林、氨苄西林的耐药率均较高，耐药率分别是98.0%，80.0%及92.0%；而头孢吡肟、克拉霉素、多西环素的耐药率均较低，耐药率为28.0%,38.0%,40.0%;其它耐药率在40.0%～80.0%之间。本试验选用的两种联合用药对葡萄球菌均表现出较高的敏感性。

2.葡萄球菌多重耐药情况

葡萄球菌多重耐药情况结果显示，包头地区多重耐药情况比较严重，耐药范围在3～11耐之间。研究显示，有2株菌同时对11种抗生素耐药，有1株菌同时对10种抗生素耐药，有4株菌同时对9种抗生素耐药，有9株菌同时对8种抗生素耐药，有7株菌同时对7种抗生素耐药，有6株菌同时对6种抗生素耐药，有8株菌同时对5种抗生素耐药，有11株菌同时对4种抗生素耐药，有2株菌同时对3种抗生素耐药。

三、讨论

试验还选择了临床上常用的两种联合用药进行体外药物敏感性试验。试验结果显示两种联合用药均表现出较高的敏感性，耐药率均在10%～20%之间。因此，在临床用药时兽医应多选用联合用药，这样既可以减少耐药菌株的出现，又可以减少多重耐药菌株的流行，最终达到更好的治疗效果。

四、结论

分离到的葡萄球菌对青霉素耐药率最高（98.0%），最低的是头孢吡肟（28.0%），有多重耐药菌株检出，范围在3～11耐之间；本试验所选用的两种联合用药均表现出较高的敏感性，耐药率均小于20%。