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蒙药特润舒都乐对正常小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响

2016-11-24乌日娜王纯洁

中国畜牧兽医文摘 2016年5期
关键词:发炎蒙药腹腔

乌日娜王纯洁

(1.内蒙古锡林郭勒职业学院,内蒙古锡林浩特 026000;

2.内蒙古农业大学,内蒙古呼和浩特 010070)

蒙药特润舒都乐对正常小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响

乌日娜1王纯洁2

(1.内蒙古锡林郭勒职业学院,内蒙古锡林浩特 026000;

2.内蒙古农业大学,内蒙古呼和浩特 010070)

目的:观察和探讨蒙药特润舒都乐的作用机理与调节巨噬细胞吞噬功能的相关性。方法:对30只ICR小鼠随机分为空白组,模型组,特润舒都乐组,每组各10只。除空白组外,其余各组采用腹腔注射大肠杆菌方法复制蒙医“粘疫”热症模型。特润舒都乐组于造模后2h灌特润舒都乐0.1 ml/10 g,每日2次,连续5d。于末次灌胃2h后处死小鼠,抽取腹腔洗液,离心,计数巨噬细胞数。与5%鸡红细胞悬液孵育45min,固色,染色,油镜下记数,计算吞噬百分率和吞噬指数。结果:模型组与空白组比较腹腔巨噬细胞游出数量明显增加(P<0.05),吞噬指数较空白组有显著性差异(P<0.05);特润舒都乐组与模型组比较巨噬细胞游出数量无显著性差异(P>0.05),腹腔巨噬细胞吞噬百分率及吞噬指数明显提高(P<0.05)。结论:特润舒都乐明显增加腹腔巨噬细胞的吞噬功能,特润舒都乐的治疗作用可能与巨噬细胞吞噬功能有关。

蒙药 特润舒都乐 作用机理 巨噬细胞吞噬功能

蒙药特润舒都乐已被证实具有抗发炎的效用,但尚未有研究针对蒸煮后之蒙药特润舒都乐是否具有活性做进一步分析。本研究先对蒙药特润舒都乐萃取物活性进行分析,再利用细胞模式进行免疫活性分析,探讨蒙药特润舒都乐是否仍具抗发炎之功效,以蒙药特润舒都乐喂饲乳羊的可行性评估。对30只ICR小鼠随机分为空白组,模型组,特润舒都乐组,每组各10只。除空白组外,其余各组采用腹腔注射大肠杆菌方法复制蒙医“粘疫”热症模型,进行临床实验,现报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验材料

对30只ICR小鼠随机分为空白组,模型组,特润舒都乐组,每组各10只。除空白组外,其余各组采用腹腔注射大肠杆菌方法复制蒙医“粘疫”热症模型。

1.2 处理方法

除空白组外,其余各组采用腹腔注射大肠杆菌方法复制蒙医“粘疫”热症模型。特润舒都乐组于造模后2h灌特润舒都乐0.1 ml/10 g,每日2次,连续5d。于末次灌胃2h后处死小鼠,抽取腹腔洗液,离心,计数巨噬细胞数。与5%鸡红细胞悬液孵育45min,固色,染色,油镜下记数,计算吞噬百分率和吞噬指数。

2 结果

模型组与空白组比较腹腔巨噬细胞游出数量明显增加(P<0.05),吞噬指数较空白组有显著性差异(P<0.05);特润舒都乐组与模型组比较巨噬细胞游出数量无显著性差异(P>0.05),腹腔巨噬细胞吞噬百分率及吞噬指数明显提高(P<0.05)。

图1 空白组、模型组与特润舒都乐组乳腺组织病理变化

3 讨论

随着我国人民健康自我意识逐渐增加,对于成分为天然植物的中草药的需求量日益增加,国内中草药制药业便迅速发展,各大中药制药厂每个月至少产出两百吨以上的蒙药特润舒都乐废弃量,大量蒙药特润舒都乐主要利用于有机肥料之基质。蒙药特润舒都乐的主要成分为粗纤维与碳水化合物,如可利用反刍动物瘤胃中的微生物来分解纤维,将蒙药特润舒都乐进行消化与破坏,并有效的降解,将可增加其附属效益。各种中草药分离之多醣已被证实均对于体内与体外有免疫调节之影响,因此具有潜力开发作为免疫调节剂。多醣可活化免疫反应,其借着活化巨噬细胞,也连带活化B 细胞与其他免疫细胞。发炎反应是先天免疫重要之部分,借着活化NF-κB 而调控下游信息传递因子,使促发炎激素产生并表现。适量的释放出促发炎激素可帮助先天性免疫反应而抵挡外来病原体,反之持续性表现会引起急性发炎反应之产生,例如败血症甚至导致死亡。随着地球暖化,尤其为热带地区,家畜之饲养环境温度相对增加,造成动物热紧迫,进而食欲减少、生产变差、健康也相对影响,抵抗力较差,疾病感染性增加。

而小鼠巨噬细胞株RAW264.7 冻细胞方式为从细胞培养箱取出欲冻之细胞,并以玻璃吸管去除DMEM 培养基,将已将细胞培养液加入10% DMSO并另外再添加10% 胎牛血清混匀之DMEM,并将细胞打散且分装1ml 于冷冻小管中,直接冰置-80 oC 至隔天,最后再放入液态桶保存中。

将蒙药特润舒都乐进行消化与破坏,并有效的降解,将可增加其附属效益。研究显示蒙药特润舒都乐的根部富含大量多醣与指标成分阿魏酸与蒿本内酯,蒙药特润舒都乐蒸煮后汤汁对肠胃道具保健功能,亦有抗发炎之功效。然而,蒙药特润舒都乐蒸煮后药渣与药渣进行青贮保存所残留之指标成分含量与抗发炎之功效尚未任何报告,故本实验为以高效液相层析先分析蒙药特润舒都乐与药渣青贮中残存之指标成分含量,并利用小鼠巨噬细胞RAW264.7 探讨是否具有细胞毒性与其抗发炎之可能,以作为后续反刍动物喂饲试验的基础。 巨噬细胞中含有大量的溶酶体、吞噬体和残余体,因此用台蓝或墨汁注射到实验动物体内,可以见到巨噬细胞内聚集很多蓝色或黑色的颗粒,用这种方法可以来标识巨噬细胞,用淀粉肉汤刺激实验动物形成较多的巨噬细胞。本实验显示,特润舒都乐明显增加腹腔巨噬细胞的吞噬功能,特润舒都乐的治疗作用可能与巨噬细胞吞噬功能有关。

[1]黄丽华,王纯洁,敖日格乐,等. 蒙药特润舒都乐浸膏对脂多糖刺激RAW264.7细胞分泌炎性因子的影响[J].细胞与分子免疫学杂志,2013,(4):387-389.

[2]纳仁高娃,王纯洁,黄丽华.蒙药特润舒都乐提取物抗炎作用研究[J].动物医学进展,2013,(5):67-70.

[3]郭婧,王纯洁,苏迅,等.正交法筛选治疗奶牛乳腺炎蒙药复方中最佳抗炎免疫成分复方的研究[J].黑龙江畜牧兽医,2015,(5):147-149.

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