张丹丹　陆阳　马良

肠杆菌科细菌ESBLs和Am pC酶检测及耐药性分析

张丹丹陆阳马良

目的 探讨肠杆菌科细菌ESBLs和AmpC酶检测及耐药性。方法 选取300株肠杆菌，AmpC酶、ESBLs表型通过双纸片确诊试验、双纸片氯唑西林增效试验予以测定，观察300株菌种对10种抗菌药物的耐药性。结果 300株肠杆菌中检测到ESBLs菌158株，AmpC酶菌130株；单产AmpC酶菌对头孢曲松、氨曲南、哌拉西林、头孢噻肟产生的耐药性明显低于非产酶菌，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 ESBLs和AmpC酶是造成肠杆菌细菌产生耐药的重要原因，可依照实际药敏结果采取合理治疗。

肠杆菌；ESBLs；AmpC酶；耐药性

近些年来，临床中越来越广泛的使用抗菌药物对患者进行治疗，但是伴随抗菌药物的使用率越来越高，导致其细菌耐药性也越来越强，使得临床治疗及医院感染的控制均受到一定的威胁[1］。在临床中，肠杆菌是比较常见的一种耐药菌，是进行抗感染治疗的一个重点项目。本文选取300株菌株对肠杆菌科细菌ESBLs、AmpC酶测定结果及其耐药性予以研究，现报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

选取我院2015年3月～2016年3月的患者标本培养的300株肠杆菌。

1.2方法

细菌均通过VITEK60微生物鉴定仪及配套GNB鉴定卡完全确认。ESBLs检测采用为双纸片确诊试验（纸片扩散法）筛选表型，通过确证试验后对其予以测定，菌株极有可能产生ESBLs：孢噻肟抑菌环直径≥27 mm，头孢他啶抑菌环直径≥22 mm，完成确证试验之后，对比增加克拉维酸药物、增加克拉维酸抑菌环，当数值提高＞5 mm表明其产生ESBLs。AmpC酶检测的表型筛选方法为双纸片氯唑西林增效试验（纸片扩散法），实施确证的方法是改良后的Hodge试验。产生AmpC酶：头孢西丁抑菌圈直径＜18 mm，通过确证试验显示，头孢西丁抑菌圈数值＞2 mm表明其产生AmpC酶。统计两种检测方法所得到的测定结果，然后对其实施药检试验，对产酶菌与产酶菌的测定结果予以对比研究。通过纸片扩散法对其实施药敏试验，检测抗生素药物的耐药性，铜绿假单胞菌ATCC27853及大肠埃希菌ATCC25922为质控菌。

1.3统计学方法

采用SPSS 21.0统计学软件进行处理分析，计数资料经χ2检验，计量资料经t检验，P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2　结果

2.1肠杆菌的菌种分布

300株菌种共检测到ESBLs菌158株（52.7%），检测到AmpC酶菌130株（43.3%）。其中单产ESBLs菌130株（43.3%）、AmpC酶菌104株（34.7%）、不产AmpC酶20株（6.7%）、不产ESBLs菌30株（10%）、产AmpC酶、ESBLs菌16株（5.3%）。

2.2菌种的耐药性分析

单产AmpC酶菌对于头孢曲松、氨曲南、哌拉西林、头孢噻肟具有较高的耐药性，与非产酶菌的耐药性对比，差异具有统计学意义（P＜0.05）；高产AmpC酶菌与非产酶菌在4重耐药率、8重耐药方面，差异具有统计学意义（P＜0.05），如表1所示。

3　讨论

CTX肠杆菌科在我国临床中是比较常见的一种病原菌，在使用环丙沙星、丁胺卡那等药物进行治疗时，往往显示出中性耐药性，所以对其进行临床治疗时，应注意保持谨慎状态[2-5］；肠杆菌对于亚胺硫霉素、头孢吡肟均存在较为显著的敏感性，所以可进行临床上的推广应用。通过本文研究可知，300株肠杆菌共检测到ESBLs菌158株，AmpC酶菌130株，其中大肠埃希菌、克雷伯菌属细菌具有较高的检测率。通过药敏实验可知，受检菌均对于1～3代头孢菌素具有较为显著的耐药性，其中产AmpC酶和ESBLs菌耐药性与非产酶要显著增强，所以在观察受检菌产生耐药性的相关因素中，产AmpC酶和ESBLs菌具有较为重要的临床意义。通过本文的研究可知，对AmpC酶实施治疗时可通过亚胺培南等碳青霉烯类抗菌药物予以对应治疗，或通过头孢吡肟等四代头孢对单产AmpC酶菌感染予以相应的治疗，可根据患者实际药敏情况合理选用哌拉西林、头孢哌酮等抗菌药物[6-8］。

表1　300株菌种的抗菌药物耐药性（%）

总而言之，在临床中对患者进行抗感染治疗时，需对AmpC酶、ESBLs等耐药酶进行有效检测，使得抗菌药物的使用更具有合理性，有效预防耐药性的产生。

[1]周志慧，李兰娟，俞云松，等. 两种检测阴沟肠杆菌AmpC酶方法的比较[J］. 中华检验医学杂志，2012，25（5）：88-90.

[2]罗兰，廖康，禤建美，等. 肠杆菌科菌持续高产AmpC酶的检出及耐药分析[J］. 临床检验杂志，2004，22（1）：41-42.

[3]张俊峰，许现伟. 肠杆菌科细菌ESBLs和AmpC酶检测及耐药性分析[J］. 中国实用医药，2013，8（15）：143-144.

[4]陈恒，江立千. 大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶与AmpC酶耐药性分析[J］. 检验医学与临床，2010，7（8）：714-715.

[5]余娴，袁斌，雷军. 产“超-超广谱”β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的耐药表型及基因分析[J］. 中国抗生素杂志，2011，36（1）：56-59.

[6]李伟. 心肌标志物检测对急性心肌梗死的快速诊断价值探讨[J］.基层医学论坛，2016，20（7）：942-943.

[7]曾令恒，姜朝新，赵艳华，等. 心肌标志物在诊断急性心肌梗死中的临床应用及诊断临界值分析[J］. 检验医学与临床，2013，10 （28）：2365-2367.

[8]杨忠路，王辉山，刘涛，等. 心肌坏死标志物联合检测对急性心肌梗死早期诊断及鉴别的价值[J］. 现代生物医学进展，2015，15 （11）：2086-2088.

Detection and Drug Resistance Analysis of ESBLs and Am pC in Intestinal Bacteria

ZHANG Dandan LU Yang MA Liang Department of Clinical Laboratory，The Hospital of Traditional Chinese Medicine of Luohe City， Luohe He'nan 462000， China

Objective To study the enterobacteriaceae bacteria ESBLs and AmpC enzyme detection and drug resistance. Methods Chose 300 strains of intestinal bacilli， AmpC enzyme， ESBLs phenotype by double disc conf rmatory test， observation of 300 strains bacteria resistance of 10 kinds of antim icrobial agents. Results 300 strains of intestinal bacilli detected in ESBLs 158 strains bacteria， AmpC enzyme 130 strains bacteria； The yield of AmpC enzyme bacteria resistance to ceftriaxone， aztreonam， cefotaxime and cefotaxime have signif cantly lower than that of enzyme producing bacteria， the difference was statistically signifcant （P＜0.05）. Conclusion ESBLs and AmpC enzyme is the important cause of bacteria resistance， can be in accordance with the actual drug susceptibility results take reasonable treatment.

Bacteria， ESBLs， AmpC enzyme， Drug resistance

R 446.5

A

1674-9308（2016）25-0175-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2016.25.108

河南省漯河市中医院检验科，河南 漯河 462000