赵秋霞　周松伟　王莉

荧光定量PCR法检测HBV-DNA与ELISA法乙肝免疫学指标的相关性

赵秋霞周松伟王莉

目的 探讨荧光定量PCR法检测HBV-DNA与ELISA法乙肝免疫学指标的相关性。方法 以2014年1月～2015年12月我院收治的110例乙肝患者为研究对象，全部患者均以荧光定量PCR法和ELISA法分别对HBV-DNA和前s1抗原等乙肝免疫学指标进行检测。结果 （1）模式1（大三阳患者）HBV阳性符合率93.70%、前s1抗原阳性率81.66%；模式2（小三阳患者）HBV阳性符合率61.76%、前s1抗原阳性率64.71%，两项指标均占多数；（2）HBsAg浓度与前s1抗原阳性率呈正相关。结论 乙肝免疫学指标与HBV-DNA存在相关性，两者联合应用能提高临床诊断准确性，乙肝前s1抗原能够反映HBV复制状态与传染性，可作为HBeAg和HBV-DNA检测的补充和对照。

乙型肝炎；HBV-DNA；免疫标志物；相关性

乙型病毒性肝炎是临床常见肝脏炎性病变[1］。乙肝免疫学指标检测（乙肝两对半）是现阶段临床筛查、诊疗乙肝最常用方法，它能够反映出机体对乙肝病毒的免疫反应状态，但无法直接表达HBV复制。HBV-DNA监测是能够反映HBV复制活跃度及传染性的重要方法。有报道指出[2］，HBV-DNA与乙肝免疫学指标间的相关性对临床治疗乙肝和判断预后具有重要指导意义，鉴于此，文章现以110例患者为研究对象进行分析和探讨，现报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

以2014年1月～2015年12月我院收治的110例乙肝患者为研究对象，全部患者入院时不同程度的伴有恶心、上腹不适等消化道表现及乏力、疲劳、轻度发热等全身表现，部分患者黄疸或肝区疼痛等。经诊断，患者病症均符合文献标准[3］，临床判定为乙型病毒性肝炎。其中，男60例，女50例；患者年龄18～72岁，平均年龄（46.3±9.1）岁；急性乙肝53例，慢性乙肝57例；患者病程1～14周，平均病程（6.3±2.7）周。

1.2方法

全部患者均以荧光定量聚合酶链式反应（PCR法）和酶联免疫吸附实验（ELISA法）分别对HBV-DNA和乙肝免疫学指标进行检测，对比分析检测结果。乙肝免疫学指标检测项目：（1）乙肝表面抗原（HBsAg）；（2）乙肝表面抗体（抗-HBs）；（3）乙肝e抗原（HBeAg）；（4）乙肝e抗体（抗-HBe）；（5）乙肝核心抗体（抗-HBc）；（6）乙肝前s1抗原。

表1　110例患者乙肝免疫学指标表现模式

2　结果

检查结果显示，110例患者分别处于不同乙肝发病阶段，详见表1。通过PCR检测HBV-DNA和前s1抗原测定，结果显示，模式1（大三阳患者）HBV阳性符合率和前s1抗原阳性率最高，模式2（小三阳患者）HBV阳性符合率和前s1抗原阳性率次之，模式6（乙肝恢复期患者）HBV阳性符合率最低，模式5、模式6 前s1抗原阳性率均为0%，详见表2。

表2　各模式下的PCR检测结果 [n（%）］

3　讨论

乙肝免疫学指标检查主要是指对乙肝表面抗原、乙肝表面抗体、乙肝e抗原、乙肝e抗体和乙肝核心抗体的检查，俗称乙肝五项，主要用来判断人体是否遭受乙肝病毒感染并粗略估计病毒复制水平，可用于乙肝疾病监测和疗效动态观察[4-5］。本次临床研究在这五项检查项目基础上加入了对乙肝前s1抗原的检测。肝细胞膜是HBV的主要附着体，前s1蛋白的氨基酸21～47片段是肝细胞受体结合部位，提示前s1抗原具有高度敏感性和免疫原性，人体含有HBV就会有前s1抗原。有临床研究证实，前s1抗原是HBV感染后最早出现的血清学标志物，这对于乙肝病毒的早期诊断具有重要参考意义[6］。HBV-DNA即乙肝病毒基因，是HBV感染最直接、特异性强和灵敏性高的指标，可用于鉴别HBV复制及是否具有传染性。本次临床研究以荧光定量PCR法对HBV-DNA进行定量检查，这能够直观的帮助临床掌握机体内病毒含量，了解患者病情，指导意义显著。此次研究结果显示，大三阳、小三阳患者HBV阳性符合率和前s1抗原阳性率均处于较高水平，发病之初或病情逐渐转复以后，HBV阳性符合率和前s1抗原阳性率较低，HBsAg浓度与前s1抗原阳性率呈正相关，与既往文献研究结论基本一致[7-8］，提示前s1抗原可作为HBeAg和HBV-DNA检测的补充和对照，乙肝免疫学指标与HBV-DNA存在相关性，两者联合应用能提高临床诊断准确性。

[1]黄存敏，李艳艳，梁海辉，等. ELISA法与荧光定量PCR法检测乙肝病毒相关性分析[J］.国际病毒学杂志，2015，22（z1）：207-209.

[2]黄静. 荧光定量PCR检测HBV-DNA与ELISA法乙肝免疫学检测的探讨[J］. 中国医药科学，2013，3（6）：110-111.

[3]周玉林，郑金川，吴旭耀，等. 荧光定量PCR法检测乙肝病毒DNA与乙肝病毒标志物相关性[J］. 中国农村卫生事业管理，2013，33（10）：1191-1192.

[4]龚杰，刘柏林，方艳秋，等. 乙肝病毒外膜大蛋白、前S1抗原、HBV-DNA与血清标志物之间相关性分析[J］. 中国实验诊断学，2013，17（9）：1634-1637.

[5]王碧玉，黄燕妮. 乙肝两对半定量、乙肝DNA定量与乙肝前S1抗原联合检测的临床意义[J］. 海南医学，2016，27（7）：1182-1184.

[6]罗慧琴，王志刚，李玲，等. 乙肝患者血清标志物与前S1抗原及HBV-DNA相关性分析[J］. 国际检验医学杂志，2013，34（24）：3337-3338.

[7]曾繁钰，蒋冰，谭璐，等. Pre S1抗原与HBV血清学标志物和HBV DNA的相关性及临床意义[J］. 武汉大学学报（医学版），2014，35（1）：85-88，105.

[8]张蕾，周玉妮，董景云，等. 血清HBV-DNA载量、乙肝免疫学标志物定量与老年慢性乙肝患者肝功能的关系[J］. 中国老年学杂志，2014，34（13）：3563-3564.

The Correlation Between HBV-DNA and EL ISA Method of Hepatitis B Imm une Index by Fluorescence Quan titative PCR Method

ZHAO Qiuxia ZHOU Songwei WANG Li Department of Clinica l Laboratory， The People's Hospital of Xinghua City， Xinghua Jiangsu 225700， China

Objective To study the correlation between the HBV-DNA and the ELISA method of hepatitis B immune index by fuorescence quantitative PCR method. Methods From January 2014 to December 2015， 110 cases of hepatitis B patients in our hospital were selected as the object of study. A ll the patients were by f uorescence quantitative PCR and ELISA respectively of HBV-DNA， Pre-s1 antigen and HBV immunological markers were detected. Resu lts Pattern 1 （ HBeAg positive patients ） in patients with HBV positive coincidence rate of 93.70%， Pre-s1 antigen positive rate of 81.66%； Pattern 2 （ HBV-DNA patients ） with HBV positive coincidence rate of 61.76% and Pre-s1 antigen positive rate was 64.71%， two indicators are in the majority； II HBsAg concentration is similar to that of Pre-s1 antigen positive rate was positively. Conclusion There was correlation betw een HBV Imm unological Markers and HBV-DNA and com bined application can increase the accuracy of clinical diagnosis and HBV Pre-s1 antigen can ref ect HBV replication and infectivity， as HBeAg and HBVDNA detection and control.

Hepatitis B， HBV-DNA， Immune markers， Correlation

R 446.6

A

1674-9308（2016）25-0045-03

10.3969/j.issn.1674-9308.2016.25.026

江苏省兴化市人民医院检验科，江苏 兴化 225700