王生清　杨小兰

2013-2014年白银地区革兰阴性杆菌耐药监测分析

王生清杨小兰

目的：了解2013～2014年白银地区分离的革兰阴性杆菌的临床分布及耐药情况。方法：收集2013年1月至2014年12月白银地区参加全国细菌耐药监测网的三家成员单位分离出的革兰阴性杆菌，并应用半自动或全自动细菌鉴定分析仪鉴定，药敏试验方法按CLSI规定的标准进行，以Whonet 5.6软件进行数据分析。结果：共分离革兰阴性杆菌7316株，肠杆菌科以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主；非发酵菌以铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌为主。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类、酶抑制剂复方制剂、阿米卡星具有很好的抗菌活性；大肠埃希菌对喹诺酮类耐药率大于65%。鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率分别为28.7%和42.4%。米诺环素和头孢哌酮-舒巴坦对鲍曼不动杆菌具有较好的抗菌活性。结论：应重视细菌耐药监测网的统计，根据细菌学结果指导抗生素的选择，减少盲目使用抗生素增加细菌耐药性。

革兰阴性杆菌；耐药；抗菌药物；合理用药

细菌耐药性具有地域性且不断地发生变化，因此，及时了解本地区临床细菌分布及耐药情况的动态变化，为临床控制感染，合理使用抗生素，预防和发现新的耐药菌株，减少耐药菌的流行提供科学依据。现将2013～2014年白银地区临床分离的革兰阴性杆菌临床分布及耐药情况总结如下。

1　材料与方法

1.1菌株来源收集白银地区参加全国细菌耐药监测网上报的3家医院2013年1月至2014年12月门诊及住院患者送检标本中分离到的革兰阴性杆菌临床数据，包括标本种类、细菌鉴定和药敏情况，并排除同一患者同一部位重复菌株数据。

1.2培养基哥伦比亚血平板、万古霉素巧克力平板和麦康凯平板。血平板和巧克力平板置于35℃的5% CO2培养箱，麦康凯平板置于35℃的普通培养箱培养18～24h后观察结果。

1.3细菌鉴定和药敏其中一家医院采用法国生物梅里埃公司VITEK 2 COMPACT全自动微生物鉴定仪及其配套药敏卡。另外两家医院采用手工生化、API系统鉴定结果，药敏用K-B法、E-Test法。药敏结果按照美国临床和实验室标准化协会（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）2013版标准判断结果。

1.4数据统计学方法分析培养革兰阴性病例（G-）的细菌种类、标本类型及耐药性，使用WHONET 5.6统

计软件进行统计分析，病原菌构成比用百分率（%）表示，药敏结果用耐药率（%）表示。

2　结果

2.1总体菌株分离情况和标本分布肠杆菌科细菌分离率前3位依次是大肠埃希菌（33.3%）、肺炎克雷伯菌（15.3%）和阴沟肠杆菌（10.6%），非发酵菌分离率前3位依次是铜绿假单胞菌（13.1%）、鲍曼不动杆菌（9.3%）和嗜麦芽窄食单胞菌（2.7%）。见表1。按标本来源排在前4位的依次是痰液标本（36.8%）、尿标本（15.7%）、血液（12.1%）和分泌物标本（7.9%）。见表2。

表1革兰阴性杆菌菌株分布

表2　革兰阴性杆菌标本类型分布

2.2检出主要肠杆菌科细菌和流感嗜血杆菌耐药情况肠杆菌科细菌对青霉素类、第1，2代头孢菌素耐药率多大于60%；对第3代头孢菌素、氨曲南耐药率基本在30%～40%，阿米卡星，酶抑制剂复方制剂，耐药率基本低于10%。大肠埃希菌对喹诺酮类耐药率大于65%。肺炎克雷伯菌较其他肠杆菌科细菌耐药率低，检测出1株大肠埃希菌对亚胺培南耐药。嗜血杆菌属对所测药物整体较为敏感，对多数药物的耐药率低于20%。流感嗜血杆菌对亚胺培南耐药率为29.1%。见表3。

2.3检出主要非发酵菌耐药情况非发酵菌中铜绿假单胞菌对多数被测药物耐药率低于30%，对亚胺培南耐药率为28.7%，对氟喹诺酮类的耐药率小于30%。铜绿假单胞菌对头孢他啶、头孢吡肟的耐药率均低于鲍曼不动杆菌。鲍曼不动杆菌对试验的所有抗菌药物，体外抗菌活性均不理想。对多数被测药物耐药率达到70%以上。多粘菌素、头孢哌酮/舒巴坦具有较好的抗菌活性，对亚胺培南的耐药率约在42.4%。对左氧氟沙星的耐药率为54.2%，略优于环丙沙星。为嗜麦芽窄食单胞菌和洋葱伯克霍尔德菌，对测定药物耐药率基本低于15%。见表4。

表3　检出主要肠杆菌科细菌和流感嗜血杆菌耐药情况［株（%）］

3　讨论

总体分离情况和标本分布看，2013～2014年白银地区革兰阴性杆菌监测网共分离到非重复的革兰阴性杆菌7316株，肠杆菌科细菌分离率前3位依次是大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌；非发酵菌分离率前3位依次是铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌。这与国内其它统计结果相一致［1，2］。与中国细菌耐药性监测（CHINET）、卫生部全国细菌耐药监测（Mohnarin）细菌耐药监测数据接近［3］。在欧洲，菌株构成以肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌为主［4，5］。本研究中临床标本按来源排在前3位的依次是痰（36.8%）、尿（15.7%）、血（12.1%）。自然采集痰标本时，标本需经过患者咽喉部，会受到定植于咽喉部的细菌污染，如果不能正确去除定植，会影响痰标本的检出意义。有必要向临床呼吁多送检有价值的血液等封闭腔体液标本，控制和少送检呼吸道痰标本。

表4　检出主要非发酵菌耐药情况［株（%）］

肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍保持很高的敏感性，发现1株对亚胺培南耐药的大肠埃希菌；酶抑制剂复方制剂、阿米卡星具有很好抗菌活性，耐药率基本在10%以下，大肠埃希菌对喹诺酮类耐药率大于65%，大于国内其它报道［1，2］，可能存在地区差异。流感嗜血杆菌属对所测药物整体较为敏感，对多数药物的耐药率低于20%。

非发酵菌中铜绿假单胞菌对多数被测药物耐药率低于30%，铜绿假单胞菌体外药敏试验敏感性较高，但其具有持留性［6］，易定植在体弱及老年人呼吸道，形成生物被膜，降低抗生素的渗透性，使细菌周围的药品达不到有效的杀菌浓度，易造成感染的反复发作。鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率约在42.4%。有报道显示2009～2013年，鲍曼不动杆菌的耐药率呈明显上升趋势，亚胺培南由10%升高到60.8%［7］。但在临床治疗上，医生在考虑治疗相关感染时，应排除鲍曼不动杆菌定植，针对感染情况合理选择抗菌药物。在院内感染控制中对多重耐药甚至泛耐药的鲍曼不动杆菌除及时隔离病人外，还应注意加强病房环境的消毒和医护人员的手卫生，防止多重耐药和泛耐药菌株的传播。

肠杆菌科细菌对第三代头孢菌素中，头孢噻肟耐药率高于头孢他啶，这可能与CTX-M型是我国流行的主要ESBLs基因型有关［8］，CTX-M型ESBLs对头孢噻肟水解能力强，对头孢他啶水解能力弱［9］。呋喃妥因是临床上常用于治疗尿路感染的药物，本研究显示其对大肠埃希菌的耐药率小于10%，而尿路感染中大肠埃希菌是最常见的分离菌株，因此，治疗大肠埃希菌引起的泌尿道感染，仍可经验性选择该药物。

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Distribution and drug resistance monitoring of pathogenic bacteria detected in Baiyin between 2013 and 2014

Wang Shengqing，Yang Xiaolan.Department of Laboratory，the First People's Hospital of Baiyin，Baiyin 730900，China

Objective:We investigate the clinical distribution and drug resistance of Gram-negative bacteria in Baiyin area of 2013～2014.Methods:Collect the Gram-negative bacteria of three hospitals of Mohnarin from January 2013 to December 2014 in Baiyin area，which were identified to species by the semiautomatic or fully automatic bacterial identification analyzer.The determination of drug suscebility were performed referring to CLSI，and Whonet 5.6 software was adopted to analyze data.Results:7316 bacterial strain were obtained in total.Escherichia coli and klebsiella pneumoniae in the majority of enterobacteriaceae.Pseudomonas aeruginosa and acinetobacter baumannii in the majority of non-fermentative bacterial.Enterobacteriaceae has a good antibacterial activity to carbapenems，Enzyme inhibitor compound preparation，amikacin.Drug resistance rate of escherichia coli to quinolones was more than 65%.Acinetobacter baumannii and pseudomonas aeruginosa is resistant to imipenem，and resistance rates were 28.7%and 42.4%respectively.Minocycline and cefoperazone-sulbactam against Acinetobacter baumannii has good antibacterial activity.Conclusion:Attention should be paid to bacterial drug resistance monitoring. According to the result of bacterial resistance to guide the choice of antibiotics，and reduce the blind use of antibiotics to avoid increasing resistance.

gram-negative bacilli；drug resistance；antibiotic；rational used of drugs

A

1004-2725（2016）04-0246-05

730900甘肃 白银，白银市第一人民医院检验科

王生清，E-mail：qhwangsq@163.com