魏峰

【摘要】 目的 研究脑脊液培养细菌的阳性结果， 并分析其耐药状况。方法 选取468份脑脊液标本， 对其进行细菌培养与鉴定， 并检测其耐药状况， 统计细菌的阳性结果与药敏情况。结果 468份脑脊液标本中， 阳性检出率为17.7%， 以革兰阳性菌（65.1%）为主， 其次为革兰阴性菌（33.7%）、真菌（1.20%）。革兰阳性菌其对利奈唑烷、万古霉素的敏感性高， 对头孢唑啉、氨苄西林则表现为高耐药性。革兰阴性菌主要为鲍曼不动杆菌， 对替加环素、阿米卡星的敏感性较高， 对亚胺培南、头孢菌素类的耐药性高。结论 脑脊液培养菌群中以革兰阳性菌为主， 常见的为凝固内阴性葡萄球菌、革兰阳性杆菌。监测并探讨脑脊液常见细菌及耐药状况， 为抗菌药物的治疗以及中枢神经系统（CNS）感染疾病的预防做出了积极贡献。

【关键词】 中枢神经系统；耐药性；病原菌；细菌培养

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.16.120

因颅内感染发病迅速且具有高病死率， 颅内感染的控制是CNS感染疾病的研究重点。临床诊断治疗颅内感染的重要依据是脑脊液标本的细菌培养以及药敏试验， 同时， 也为抗菌药物的合理使用与规划、临床疗效的提高提供了指导性意见[1]。本文回顾性分析了本院采集的468份脑脊液标本培养结果， 监测讨论脑脊液常见细菌及耐药状况， 取得了较为满意的结果， 现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取本院2012年2月～2015年5月采集的468份脑脊液标本， 其中男252例， 女216例， 年龄1个月～75岁， 平均年龄（45.8±8.9）岁。通过腰椎穿刺方法采取脑脊液标本， 送至微生物室进行培养。

1. 2 试剂与仪器 采用由法国生物梅里埃公司提供的全自动微生物鉴定仪（型号为VITEK-2 ）， 以及其配套试剂， 包括GPI、GNI+、GPS-110、GNS-143、YBC鉴定卡与药敏卡。同时采用全自动培养仪以及配套厌氧瓶与需氧瓶。而培养基、触酶试剂、氧化酶购自秦皇岛正泽公司。

1. 3 方法 无菌采集3～5 ml脑脊液， 并置入培养瓶中， 放入全自动培养仪中恒温35℃培养24 h， 观察记录结果。当仪器警报系统显示出现阳性瓶时， 用革兰染色法涂片检查菌群， 同时接种于血培养基， 在浓度为5%的CO2培养基中恒温培养， 时间为18～24 h， 若菌群继续生长则进行机鉴定与药敏试验；当仪器警报系统显示出现阴性瓶时， 接种于血培养基， 在浓度为5%的CO2培养基中恒温培养， 时间为48 h， 仍为无菌生长， 则报告为无细菌生长。参照《全国临床检验操作规程》第3版操作。通过全自动微生物鉴定仪分离所得菌群对其鉴定， 同时进行药敏试验， 药敏试验结果以美国临床与实验室标准化协会（CLSI）制定的标准为依据。对于同一患者的相同菌种在10 d内记为一种， 药敏试验不需要重复。

2 结果

2. 1 病原菌阳性率与科室分布情况 468份脑脊液标本中阳性检出率为17.7%（83株病原菌）， 其中包括54株革兰阳性菌（65.1%）， 以凝固内阴性葡萄球菌为主， 其次为革兰阳性杆菌、浅绿气球菌、草绿色链球菌、副血链球菌等；28株革兰阴性菌（33.7%）， 以鲍曼不动杆菌为主， 其次为阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌等；1株真菌（1.2%）， 主要为新型隐球菌。病原菌的分布情况如下：分布在神经外科（30株， 36.1%）， 其次为外科重症加强护理病房（ICU）（26株， 31.3%）、内科ICU（11株， 13.3%）、神经内科（10株， 12.0%）、儿科及其他科室（6株， 7.2%）。

2. 2 革兰阳性菌药敏率 革兰阳性菌以凝固酶阴性葡萄球菌为主， 其对利奈唑烷、呋喃妥因以及万古霉素的敏感性高， 分别为93.6%、85.1%、100.0%， 而对于头孢唑啉、氨苄西林则表现为100.0%的耐药性。

2. 3 革兰阴性菌药敏率 革兰阴性菌主要为鲍曼不动杆菌， 其对替加环素、阿米卡星的敏感性较高， 分别为86.2%、72.5%， 而对于亚胺培南、哌拉西林、庆大霉素、左氧氟沙星、头孢菌素类的耐药性在71.4%～100.0%。其他革兰阴性菌有阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌。阴沟肠杆菌对阿米卡星、头孢他啶、碳青霉烯类、头孢吡肟、左旋氧氟沙星、庆大霉素的敏感性较高， 均为100.0%， 而对头孢唑啉以及氨苄西林的耐药性达到了100.0%；大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌对阿米卡星、碳青霉烯类、头孢他啶、头孢吡肟的敏感性较高， 而对氨苄西林的耐药性达到了100.0%。

3 讨论

CNS感染疾病因病死率高， 早期诊断治疗对患者来说意义重大。脑脊液标本的培养结果是否呈阳性是CNS感染的重要诊断依据。在流行病学的分布上， 病原菌随着地区、机构的不同而不同[2]。近年来， 因滥用抗菌素导致病原菌的耐药性普遍提高， 知晓本地区病原菌流行病学特征对临床合理使用抗生素不可或缺。本次研究结果显示， CNS感染的主要病原菌为大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌与凝固内阴性葡萄球菌， 表明了分离菌主要是在医院通过获得性感染。在本次研究结果中， 脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌的阳性率低， 但并不代表其感染率低， 可能与其体外培养条件严苛有关。

本研究结果显示， 病原菌的主要分布场所为神经外科， 这可能与此区患者手术操作较多， 更容易感染病原菌有关。外科ICU的病原菌多为耐药性较强， 可能与此区患者长期应用抗生素治疗有关。革兰阳性菌中主要的凝固酶阴性葡萄球菌对多种抗生素的耐药性严重， 应在临床应用中控制其使用， 并正确选择抗生素。而阴性菌中以鲍曼不动杆菌为主， 其次为阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌， 表现为多重耐药性， 机制复杂。其中阴沟肠杆菌可产生Ⅰ类头菌素酶与超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）[3]， 可通过转导与转化的方式引起ESBLs类细菌的泛滥。

综上所述， 脑脊液培养菌群中以革兰阳性菌为主， 常见的为凝固内阴性葡萄球菌、革兰阳性杆菌。监测并探讨脑脊液常见细菌及耐药状况， 为抗菌药物的治疗以及CNS感染疾病的预防做出了积极贡献。

参考文献

[1] 林晓， 黄东煜， 张昕， 等. 2008-2010年住院患者不发酵糖菌分布及耐药性分析.国际呼吸杂志， 2013， 33（8）：583-586.

[2] 杨秀芬， 王彦霞， 张征， 等. 2005-2010年我院感染细菌分布特点及变迁分析.临床荟萃， 2011， 26（19）：1704-1706.

[3] 安宝清， 王金侠， 唱丽敏. 320株鲍曼不动杆菌的临床分布及耐药性分析.临床荟萃， 2011， 26（17）：1534-1536.

[收稿日期：2015-12-30]