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葡萄胎组织中CK-8表达观察

蔡鸿宁，张珏，胡俊波，高晗，吴绪峰

(湖北省妇幼保健院，武汉430070)

葡萄胎是胚胎外层滋养细胞发生水肿变性、绒毛水肿而形成的水泡状胎块，具有恶变倾向。葡萄胎患者清宫后，主要依靠连续监测血HCG、临床症状及体征诊断侵袭性葡萄胎。但有些患者术后未及时监测HCG，给诊断增加困难。寻找葡萄胎生物学特性的有效预测指标对于存在恶变潜能的葡萄胎患者有重要意义。细胞角蛋白8(CK-8)被发现与细胞增殖及凋亡调控、信号转导、肿瘤发生发展等有关。本研究观察并比较了早孕绒毛、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎组织中CK-8的表达变化，探讨CK-8与葡萄胎恶变的关系。

临床资料：2008年1月~2013年12月收治的葡萄胎患者60例，年龄18~38岁，中位孕周8周。患者清宫标本经病理检查确诊，其中部分性葡萄胎26例、完全性葡萄胎34例。葡萄胎患者清宫后均进行随访，根据宋鸿钊[1]提出的侵蚀性葡萄胎诊断标准，将60例葡萄胎患者分为良性转归组38例、恶变组22例。葡萄胎患者的受检标本来自初次清宫后病理科留存石蜡块，良性转归组中位年龄28岁，中位孕周8.5周；恶变组中位年龄25岁，中位孕周9.2周。选取来院人工流产的健康孕妇20例为对照组，中位年龄26岁，中位孕周8周，收集绒毛组织。

方法：采用免疫组化SP法检测恶变组、良性转归组葡萄胎组织及对照组绒毛组织中的CK-8。各组标本经10%甲醛固定，石蜡包埋，连续切片，按操作说明书进行SP法染色，DAB，显色，以PBS代替一抗作阴性对照，相同条件下已知阳性切片作阳性对照。用HIPAS-1000高清晰度彩色病理图像免疫组化测量系统进行分析。CK-8阳性为细胞质内出现棕黄色颗粒，光镜高倍镜下每张切片随机选取5个视野，每个视野计数200个细胞，计算阳性细胞百分比。阳性细胞百分比<25%为+，25%~50%为++，>50%为+++，+~+++为标本CK-8表达阳性。采用SPSS19.0统计软件进行统计学分析，计数资料比较采用秩和检验和χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

结果：恶变组葡萄胎组织、良性转归组葡萄胎组织、对照组绒毛组织中CK-8阳性表达率分别为82.82%(18/38)、47.37%(17/38)、35.00%(7/20)，三组两两相比，P均<0.05。见图1。

注：A为对照组；B为良性转归组；C为恶性组。

图1葡萄胎组织及正常绒毛组织中CK-8表达

讨论：CK-8属于细胞骨架蛋白家族，是上皮细胞表达的中间丝蛋白之一，在维持上皮细胞形态中发挥重要作用[2，3]。CK-8属Ⅱ型细胞角蛋白，要表达于上皮细胞和上皮源性的肿瘤细胞中。有研究显示，CK-8是上皮细胞的特征性标志物，可能成为癌症治疗的新靶点[4]。CK-8翻译后的修饰影响其稳定性与活性，其翻译后修饰包括磷酸化、糖基化及泛素化[5]。CK-8糖基化影响中间丝重组、亚细胞定位，糖基化异常可致细胞恶性转化和肿瘤转移[6]；CK-8泛素化与不溶性聚集物形成有关[7]，还与乳腺癌侵袭性相关，CK-8表达缺失或功能受损提示乳腺癌预后不良[4]。CK-8在部分上皮源性肿瘤中存在异常表达，如乳腺癌和胰腺癌等[8]；其也可在部分非上皮来源性的肿瘤中异常表达，如神经胶质瘤、黑色素瘤和肉瘤[9]。CK-8高表达可改变上皮细胞表型，促进上皮细胞恶性转化[10，11]。有研究显示，多数头颈部鳞状细胞癌和转移癌均存在CK-8高表达[12]。

本研究结果显示，正常绒毛组织、良性葡萄胎组织、恶变葡萄胎组织中CK-8阳性表达率逐渐增高，两两相比，差异均有统计学意义。由此推测，CK-8在葡萄胎发生及恶性转化中可能发挥一定作用，通过检测CK-8可预测葡萄胎的发展趋势，即高表达CK-8的葡萄胎恶变可能较大，而不表达CK-8的葡萄胎发生恶变的可能性较小。因此，我们认为CK-8可作为预测葡萄胎转归趋势的标志物。

参考文献：

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(收稿日期：2015-11-02)

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.07.040

通信作者：高晗(E-mail: gaohan720204@163.com)

基金项目：武汉市中青年医学骨干人才培养资助项目(220934012)。