赵立香，邵国丽（吉林农业科技学院制药工程学院，吉林吉林132101）



番石榴叶提取物促进金银花抗炎作用的试验

赵立香，邵国丽
（吉林农业科技学院制药工程学院，吉林吉林132101）

摘要：为了探讨番石榴叶提取物对金银花提取液抗炎作用的影响，采用水醇提取和水提取工艺分别制备番石榴叶和金银花提取液，用二甲苯致小鼠耳肿胀法，建立小鼠耳炎模型，并观察对大鼠棉球肉芽肿增生的影响。结果表明，番石榴叶提取物能促进金银花提取液的抗炎作用，随着番石榴叶剂量增加，抗炎作用随之增强。

关键词：金银花；番石榴叶；抗炎作用

由于许多合成药物具有较强的毒副反应，人们越来越重视从天然药物中开发抗炎药物。一些中药活性成分如苷类、生物碱类、黄酮类、萜类、挥发油等都具有很好的抗炎作用[1]。

金银花为中兽医常用药物，应用历史悠久，自古被誉为清热解毒的良药，其所含的很多化学成分均具有较强的抗菌作用。另外还可增强免疫力、抗早孕、护肝、抗肿瘤、消炎、解热、止血（凝血）、抑制肠道吸收胆固醇等，其临床用途非常广泛。

番石榴叶[2]，为桃金娘科植物番石榴的叶，叶中含有丰富的黄酮类化合物、酚类化合物、多糖、无机元素、挥发油、皂苷及齐墩果酸与熊果酸等多种功能成分[3]，可收敛止泻；番石榴叶提取物的抗炎[4]、止痛作用源于提取物中的挥发性成分。近年来国内外对番石榴叶的研究仍渐深入，对其研究越来越重视。

对中药联合抗炎研究较少，番石榴叶功能很多，具有抗炎作用，应用前景广阔。金银花的抗炎作用已被证明，但番石榴叶与之联合抗炎仍没有结论，因此，期待在本次研究中能有突破的进展。

1　材料与方法

1.1实验动物和药品健康昆明系小鼠50只（BALB/c小鼠，SPF级，6～8周龄，体重18±2 g，雄性），由吉林医药学院提供。

健康大鼠50只（SD，雄性，30日龄），由吉林大学提供。

金银花、番石榴叶，购自吉林市中药店，生理盐水、蒸馏水、二甲苯、水合氯醛（吉林农业科技学院实验室提供），磺胺粉，购自吉林市兽药店。

1.2器材塑料试剂盒，购自吉林市超市；6 mm打孔器（国产）；电子天平CP114（奥豪斯仪器，上海有限公司制造）；数显式电热恒温水浴锅（上海跃进医疗器械厂）；旋转蒸发仪（BUCHI，郑州长城科工贸有限公司）；干燥箱（DHG-9035A电热鼓风干燥箱，上海源长实验仪器设备厂）；灌胃针等（吉林农业科技学院实验室提供）。

1.3方法

1.3.1金银花提取液的制备色泽洁白的金银花100 g，并清洗干净备用。切碎片清洗后的金银花加水充分浸润。浸提、过滤将处理好的金银花放入锅中加水（1∶5）熬煮，熬制小碎片用手指稍用力可捏烂，40 min，将熬好的料液过滤，滤液浓缩至100 mL，既得浓度1 g/1 mL金银花浸提液[5]。

1.3.2番石榴叶提取物的制备将番石榴干燥粉碎后的样品10 g置砂锅中，加蒸馏水200 mL，浸泡2 h后，用文火煮30 min，过滤，离心取上清液，残渣再加100 mL水煮20 min，合并滤液，加热浓缩至10 mL（1 g/mL），使浓度为1 g/mL，将浸提液高压（121℃，20 min）灭菌后，再将浸提液经微孔滤膜（0.22 μm）除菌后，在4℃下进行保存备用。1.3.3小鼠抗炎模型的建立及观察将体质健康的昆明系小鼠50只（BALB/c小鼠，SPF级，6～8周龄，体重18±2 g，雄性）随机分为空白对照组、金银花分别与高、中、低番石榴叶剂量组和金银花剂量对照组，每组10只[6]。空白对照组用生理盐水灌胃，金银花剂量对照组按86 g/kg制备好的金银花水煎液灌胃。其余3组分别用86 g/kg（86 g/kg）金银花水煎液和1.8 g/kg，0.6 g/kg，0.3 g/kg（1 g/1 mL）制备好的高、中、低番石榴叶提取物混匀后灌胃。各组每天给药1次，连续给药4 d。最后1次给药1 h后，将二甲苯0.02 mL均匀涂在小鼠右耳前、后两面，致炎。致炎后1 h将小鼠脱颈椎处死[7-8]，用6 mm直径打孔器在小鼠左右耳相同部位打下耳片，用电子天平称重。记录左右耳片质量，计算肿胀度。

公式：肿胀度＝右耳重量-左耳重量

抑制率%＝（空白对照组平均值-给药组平均值）/空白对照组平均值）×100%

1.3.4大鼠棉球肉芽肿增生的影响取30日龄雄性SD大鼠50只，分组同1.2.3，取脱脂棉制成体积大小一致的棉球（10±1）mg，高压灭菌后，置37℃干燥备用。大鼠用7%水合氯醛浅麻醉鼠，将其仰卧，无菌剪毛后于下腹部正中皮肤切开长约1 cm的切口，左右双侧腹股沟皮下植入10 mg无菌干燥棉球各一粒。缝合切口，疮口处洒上磺胺粉，以防感染。在大鼠醒后灌胃给药，空白对照组用生理盐水灌胃，金银花剂量对照组按86 g/ kg制备好的金银花水煎液灌胃。其余3组分别用62 g/kg（86 g/kg）金银花水煎液和1.8 g/kg，0.6 g/ kg，0.3 g/kg制备好的高、中、低番石榴叶提取物混匀后灌胃。以后每天灌胃1次，连续7 d，第8天颈椎脱臼处死大鼠，将棉球连同周围结缔组织一起取出，剔除脂肪组织，称湿重。然后置60℃烘干12 h，称得干重。减去原棉球净重，即为肉芽肿净重。按mg/100 g体重表示，计算抑制率（%）。进行组间比较[9]。

肉芽肿净湿重＝（棉球肉芽肿总湿重-原棉球净重）/大鼠体重×100；肉芽肿净干重＝（棉球肉芽肿总干重-原棉球净重）/大鼠体重×100；湿重抑制率（%）＝（溶剂对照组肉芽肿净湿重-给药组肉芽肿净湿重）/溶剂对照组肉芽肿净湿重×100%；干重抑制率（%）＝（溶剂对照组肉芽肿净干重-给药组肉芽肿净干重）/溶剂对照组肉芽肿净干重× 100%。

2　结果

2.1金银花与不同剂量的番石榴叶对小鼠耳肿胀度的影响通过表1可见，各组小鼠的耳肿胀情况分别为9.85±2.31 mg、5.43±2.62 mg、32±2.31 mg、5.30±2.41 mg、5.28±2.29 mg；抑制率分别为44.9%、44.6%、46.2%、46.4%。

表1　金银花与不同剂量的番石榴叶对小鼠耳肿胀度的影响

2.2金银花与不同剂量的番石榴叶对大鼠棉球肉芽肿增生的影响通过表2可见，各组大鼠的湿重抑制率分别为6.56%、11.4%.14.8%、21.3%和干重抑制率分别为13.6%、18.1%、27.2%、31.8%，试验组与对照组比较差异极显著（P＜0.01），试验组间差异也显著（P＜0.05）。

3　讨论与小结

通过小鼠耳肿胀和大鼠棉球肉芽肿增生试验可见，金银花提取液、金银花提取液和番石榴叶提取物混合各组均有不同程度的抗炎作用，空白对照组、金银花剂量组、金银花与低剂量番石榴叶组、金银花与中剂量番石榴叶组、金银花与高剂量番石榴叶组，各组小鼠的耳肿胀抑制率分别为44.9%、44.6%、46.2%、46.4%。各组大鼠的湿重抑制率分别为6.56%、11.4%.14.8%、21.3%和干重抑制率分别为13.6%、18.1%、27.2%、31.8%，小鼠耳肿胀试验组与对照组比较差异极显著（P＜0.01），试验组间差异不显著（P＞0.05）；大鼠棉球肉芽肿增生试验，试验组与对照组差异极显著（P＜0.01），组间差异也显著（P＜0.05）。试验表明，番石榴叶提取物对金银花提取液的抗炎作用效果有一定的促进作用。也可能存在着药物对不同组织的抗炎效果存在差异性，需要下一步进行深入的研究。

表2　金银花与不同剂量的番石榴叶对大鼠棉球肉芽肿增生的影响

参考文献：

[1]刘辉，张艺，蒲友明.番石榴叶的资源概况及化学成分的研究进展[J].湖南中医药大学学报，2007（8）：370-372.

[2]邓家刚，郭力城.抗炎中药活性成分的进展[J].现代医药卫生，2007，23（2）：201-203.

[3]彭雪萍，马庆一，刘艳芳，等.苹果废渣中天然抗氧化物的提取、分离及活性研究[J].食品工业科技，2006，27（11）：111.

[4]丁利君，吴振辉，蔡创海，等.金银花中黄酮类物质最佳提取工艺的研究[J].食品科学，2002，23（2）：62.

[5]蔡玲婓，徐迎.番石榴叶提取物对常见细菌的体外抗菌作用[J].2005，24（12）：1095-1097.

[6]徐淑云，卞如濂，陈修.药理实验方法学[M].北京：人民卫生出版社，2003：911.

[7] Anna Gramza，Santosh Khokhar，Shihikura Yoko，et al . Antioxidant activity of tea extracts in lip ids and correlationwith polyphenol content[J].European Journal ofLip id Science and Technology，2006，108（4）：1：351.

[8] Myung Woo Byun，Cheorun Jo，Tae Woog Jeon，et al . Effects of gamma irradiation on color characteristics and biological activities of extracts of Lonicera japonica（Japanese honeysuckle）with methanol and acetone[J].Lebensmittel-Wissenschaft und-Technologie，2004，37（1）：29.

[9]林跃虹，李惠民，张晓民，等.白芍配伍桂枝抗炎作用的实验研究[J].实用临床医药杂志，2008，12（7）：22-24.

Guava leaf extract promotes thestudy of liquid anti- inflammatory effects of extracting honeysuckle

ZHAO Li-xiang，SHAO Guo-li
（College of Pharmaceutical engineering，Jilin College of Agricultural Science and Technology，Jilin 132101，China）

Abstract：In order to investigate the effect of guava leaf extract on the anti-inflammatory activity of extract of Floss Lonicerae，we adopted a water alcohol extraction and water extraction process to prepare guava leaf and honeysuckle flower extract .And then we used the extracts to study the effect on xylene induced ear edema in mouse model by observing the influence on rat granuloma hyperplasia induced by cotton ball.The results showed that guava leaf extract promoted the anti-inflammatory effect of honeysuckle extract，and with the increase of the dose of guava leaf，the anti-inflammatory effect increased，and the inhibition rate reached.

Key words：Honeysuckle；Guava leaf；Anti inflammatory effect

作者简介：赵立香（1976-），女，讲师，博士，从事动物药理学教学，E-mail：zhaolixiang123@tom.com

收稿日期：2014-09-04

中图分类号：R 282

文献标志码：A

文章编号：0529- 6005（2016）01- 0072- 03