王波，魏涧，郭小军，李泉源，丁韬，瞿丛新，兰江

(湖北医药学院附属东风医院器官移植乳腺外科，湖北十堰442000)

AIB1在三阴性乳腺癌中的表达及意义

王波，魏涧，郭小军，李泉源，丁韬，瞿丛新，兰江

(湖北医药学院附属东风医院器官移植乳腺外科，湖北十堰442000)

目的探讨乳腺癌扩增基因1(AIB1)蛋白的表达与三阴性乳腺癌预后的关系。方法利用免疫组化方法检测108例三阴性乳腺癌病理标本中AIB1蛋白表达情况，结合患者临床病理资料，分析AIB1不同表达水平与三阴性乳腺癌患者预后的相关性。结果108例三阴性乳腺癌患者，AIB1蛋白阳性表达43例(40%)，阴性表达65例(60%)。与AIB1蛋白阴性表达组比较，AIB1阳性表达组的总生存与无复发生存均明显低于阴性表达组，差异有统计学意义(P＜0.05)。结论AIB1蛋白阳性表达与三阴性乳腺癌患者的不良预后相关。有必要进行深入的研究，进一步明确AIB1可否成为三阴性乳腺癌潜在的治疗靶点。

乳腺癌扩增基因1；三阴性乳腺癌；预后；表达

乳腺癌扩增基因1(Amplified in breast cancer 1，AIB1)在包括乳腺癌在内的前列腺癌、食管癌等多种恶性肿瘤中高表达，并与其发生、发展以及临床不良预后相关。但是，AIB1在三阴性乳腺癌(Triple negative breast cancer，TNBC)中的表达及临床意义，国内外少有报道。本文通过回顾性分析，针对性探讨AIB1在三阴性乳腺癌中的表达与预后的关系，进一步深入认识三阴性乳腺癌的特点，为三阴性乳腺癌的临床治疗提供新的思路。

1 资料与方法

1.1 一般资料本研究收集湖北医药学院附属东风总医院乳腺科自2005年1月至2013年1月初次收治的，且经手术治疗、病理确诊的三阴性乳腺癌162例，剔除资料记载不完整病例，最终入选120例，均为浸润性导管癌，术后均行FEC方案化疗6个疗程，入选患者均为女性，年龄28～68岁，中位年48岁。绝经前95例，绝经后25例。按照AJCC 2002年版TNM国际标准分期，Ⅰ期35例，Ⅱ期41例，Ⅲ期44例，Ⅳ0例。入选患者均签署知情同意书，且经本院伦理委员会审核批准通过。

1.2 方法用免疫组织化学的链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(S-P)法，进行AIB1蛋白表达的检测，具体操作按照说明书进行。免疫组织化学的一抗：鼠抗人AIB1多克隆抗体(Santa Cruz公司，浓度1：50)；鼠抗人雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、表皮生长因子受体(HER2)单克隆抗体(北京中杉生物技术公司，浓度1:50)。S-P试剂盒购自北京中杉生物技术公司，用已知的阳性病理标本作为阳性对照，磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗，作为阴性对照。

1.3 免疫组织化学结果判断

1.3.1 AIB1免疫组织化学结果判断标准AIB1阳性细胞为：细胞核和细胞质出现黄色或棕黄色颗粒，其染色结果判定采用Sinicrope改良法[1]。阳性细胞≥5%为AIB1蛋白阳性表达。

1.3.2 ER、PR、HER2免疫组织化学判断标准低倍镜或高倍镜下细胞核和(或)细胞质、细胞膜上棕黄色颗粒细胞，为阳性细胞，并计算阳性细胞数。ER、PR阳性细胞数＞1%为ER、PR阳性表达。HER2免疫组织化学判断依据：根据2009年版HER2检测指南，HER2阳性定义为：免疫组织化学检测+++或荧光原位杂交(FISH)检测HER2高表达。

1.4 随访所有入选120例病例均接受定期随访(治疗结束后前3年，每3～6个月随访一次；第4～5年，每6～12个月随访一次；5年后，每年随访一次)。随访方式为门诊或者住院复查。随访起点：患者接受手术治疗时间；随访终点：患者死亡、失访以及最后一次随访仍健在。局部、区域复发为患者术后患侧胸壁或区域淋巴结的复发；远处转移以临床或影像学诊断明确。无复发生存(Disease free survival，DFS)为患者接受手术治疗，到出现肿瘤复发、转移的时间；总生存期(Overall survival，OS)为患者接受手术治疗，到死于各种原因的时间，及末次随访仍健在的时间。随访时间终点：2013年1月31日。中位随访51个月(12～90个月)。共随访完整病例108例，失访12例，随访率为90%。随访期间失访、研究截止仍生存者，记为截尾值。

1.5 统计学方法用SPSS13.0软件包进行统计学处理。AIB1蛋白阳性率差异，及其表达与临床病理相关指标的分析用χ2检验；Kaplan-meier法绘制生存曲线，AIB1不同表达组间生存差异用Log-rank法检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 ER、PR、HER2检测结果经过我院病理科2位医师独立、盲法阅片，本研究入选108例乳腺癌患者ER、PR、HER2免疫组织化学结果均明确为阴性，即均为三阴型乳腺癌。

2.2 AIB1在三阴性乳腺癌组织的表达AIB1蛋白阳性染色，其主要位于癌细胞的细胞核及细胞质(图1)。本研究最终入选的108例三阴性乳腺癌患者，AIB1蛋白阳性表达43例(中度阳性+强阳性) (40%)，AIB1蛋白阴性表达共65例(60%)。

2.3 AIB1蛋白表达与三阴性乳腺癌患者临床病理特征的关系临床分期Ⅱ期、Ⅲ期(59例)乳腺癌标本中AIB1蛋白阳性表达23例(39%)，低于临床分期Ⅰ期(49例)的AIB1蛋白阳性表达20例(41%)，但二者之间差异无统计学意义(P＞0.05)。AIB1蛋白表达与三阴性乳腺癌患者的年龄、绝经与否、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期无关(P＞0.05)，与三阴性乳腺癌的复发、转移以及生存相关，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

2.4 AIB1蛋白表达与三阴性乳腺癌患者随访结果的关系至随访截止日期(2013年1月31日)，出现局部、区域复发以及远处转移共28例，死亡17例。其中，AIB1蛋白阳性表达组，复发、转移18例，死亡11例，AIB1蛋白阴性表达组，复发、转移10例，死亡6例；AIB1阳性表达组，DFS 11～42个月，平均26.5个月；AIB1阴性表达组，DFS 12～57个月，平均34.5个月。生存分析显示，AIB1蛋白表达水平与三阴性乳腺癌预后相关，AIB1高表达组，DFS、OS均明显低于低表达组，差异有统计学意义(P＜0.05)，见图2、图3。

图1 AIB1表达

图2 AIB1蛋白不同表达患者OS的比较

图3 AIB1蛋白不同表达患者DFS的比较

表1 AIB1蛋白表达与三阴性乳腺癌临床病理特征的关系（例）

3 讨论

三阴性乳腺癌(TNBC)因ER、PR、HER2均为阴性，临床常规治疗，除化疗外，目前尚缺乏其他显著有效的治疗方法[2]，并且由于部分乳腺癌患者对化疗药物耐药，影响化疗疗效；此外，三阴性乳腺癌具有恶性度高、易复发、转移等不良生物学特点[3]，导致目前三阴性乳腺癌治疗效果较差，预后不良。三阴性乳腺癌与非三阴性乳腺癌相比，远处转移率高[4]。目前国内外针对三阴性乳腺癌的治疗，除了优化化疗外，也尝试一些新的治疗方法：聚二磷酸腺苷核糖聚合酶抑制剂(PARP抑制剂)、血管生成抑制剂(贝伐单抗)、表皮生长因子抑制剂(EGFR抑制剂)等[5]，临床研究证实有一定的疗效，但并不能显著改善三阴性乳腺癌患者的预后。因此，研究三阴性乳腺癌的临床病理特点，积极探索三阴性乳腺癌潜在治疗靶点，对改善三阴性乳腺癌的预后具有积极的临床意义。

乳腺癌扩增基因1与前列腺癌、食管癌、结直肠癌等多种恶性肿瘤的不良预后相关[6-7]。AIB1高表达，同样与乳腺癌的发生、发展及不良预后密切相关[8]。有研究提示，AIB1高表达与乳腺癌内分泌治疗疗效相关，AIB1高表达提示内分泌治疗耐药[9]。有学者根据乳腺癌的分子分型，进行分层分析证实，AIB1在ER阴性乳腺癌高表达，与较差的预后相关[10]。但是，针对性的探讨AIB1蛋白在三阴性乳腺癌中的表达，及其与预后的相关性，国内外少有报道。

总之，本文初步明确AIB1蛋白的不同表达水平，与三阴性乳腺癌的复发、转移及预后密切相关：AIB1蛋白高表达乳腺癌患者，无复发生存、总生存均明显低于低表达者(P＜0.05)。下一步，我们将开展相关的基础和临床研究，进一步证实AIB1蛋白表达与三阴性乳腺癌疗效、预后的关系，以期明确AIB1是否可作为三阴性乳腺癌的潜在治疗靶点，并积极探索三阴性乳腺癌的治疗方法，改善三阴性乳腺癌患者的疗效和预后。

[1]Saegusa M,Okayasu I.Changes in expression of estrogen receptors alpha and beta in relation to progesterone receptor and pS2 status in normal and malignant endometrium[J].J Cancer Res,2000,91(5): 510-518.

[2]马林林,邹天宁.三阴乳腺癌的临床病理特征及治疗进展[J].现代肿瘤医学,2013,19(6):1390-1393.

[3]周海丰,范玉宏,武雪亮,等.三阴性乳腺癌和HER-2过表达乳腺癌的临床病理特征比较[J].海南医学,2014,25(6):906-909.

[4]Lin NU,Vanderplas A,Hughes ME,et al.Clinicopathologic features, patterns of recurrence,and survival among women with triple-negative breast cancer in the National Comprehensive Cancer Network [J].Cancer,2012,118(22):5463-5472.

[5]Sikov WM,Berry DA,Perou CM,et al.Impact of the addition of carboplatin and/or bevacizumab to neoadjuvant once-per-week paclitaxel followed by dose-dense doxorubicin and cyclophosphamide on pathologic complete response rates in stageⅡtoⅢtriple-negative breast cancer:CALGB 40603(Alliance)[J].J Clin Oncol,2015,33 (1):13-21.

[6]Xie D,Sham JS,Zeng WF,et al.Correlation of AIB1 overexpression with advanced clinical stage of human colorectal carcinoma[J].Hum Pathol,2005,36(7):777-783.

[7]Iwase H,Omoto Y,Toyama T,et al.Clinical significance of AIB1 expression in human breast cancer[J].Breast Cancer Res Treat,2003, 80(3):339-345.

[8]Burandt E,Jens G,Holst F,et al.Prognostic relevance of AIB1 (NCoA3)amplification and overexpression in breast cancer[J]. Breast Cancer Res Treat,2013,137(3):745-753.

[9]Osborne CK,Bardou V,Hopp TA,et al.Role of the estrogen receptor coactivator AIB1(SRC-3)and HER-2/neu in tamoxifen resistance in breast cancer[J].J Natl Cancer Inst,2003,95(5):353-361.

[10]Lee K,Lee A,Song BJ,et al.Expression of AIB1 protein as a prognostic factor in breast cancer[J].World J Surg Oncol,2011,9(8):139.

Expression of AIB1 protein in patients with triple-negative breast cancer and its clinical significance.

WANG Bo, WEI Jian,GUO Xiao-Jun,LI Quan-yuan,DING Tao,QU Cong-xin,LAN Jiang.Department of Organ Transplantation and Breast Surgery,Dong Feng Hospital,Hubei University of Medicine,Shiyan 442000,Hubei,CHINA

ObjectiveTo investigate the expression of amplified in breast cancer 1(AIB1)protein in patients with triple-negative breast cancer and its correlation with the prognosis of the patients.MethodsImmunohistochemical staining was applied to detect the expression ofAIB1 protein in specimens of 108 patients with triple-negative breast cancer.Based on the clinical pathological data,the correlation between AIB1 expression levels and the prognosis of triple-negative breast cancer were analyzed.ResultsAmong the 108 patients,AIB1 protein was observed positively expressed in 43 patients(40.0%)and negatively expressed in 65 patients(60.0%).The overall survival and relapse-free survival were significantly lower in patients with positive AIB1 expression than those with negative AIB1 expression(P＜0.05).ConclusionPositive AIB1 expression is correlated to poor prognosis of patients with triple-negative breast cancer.Further investigation is essential to determine whether AIB1 might be an effective therapeutic target for triple-negative breast cancer.

Amplified in breast cancer 1(AIB1);Triple-negative breast cancer;Prognosis;Expression

R737.9

A

1003—6350（2016）01—0053—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.01.019

2015-07-14)

王波。E-mail：376046878@qq.com