罗云秀，何安兵，罗仁峰，王群，刘爱华，彭秀兰，童文先，李晓光，田倩，王虎，刘民强

（武汉市五医院肿瘤科，湖北武汉430050）

CIK细胞免疫治疗对消化系统晚期恶性肿瘤患者的生活质量及免疫状态的影响

罗云秀，何安兵，罗仁峰，王群，刘爱华，彭秀兰，童文先，李晓光，田倩，王虎，刘民强

（武汉市五医院肿瘤科，湖北武汉430050）

目的评估细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)治疗晚期消化系统恶性肿瘤对患者生活质量及免疫功能的影响。方法选择2010年1月至2014年12月武汉市五医院肿瘤中心治疗的64例晚期消化系统肿瘤患者，采用自体单采CIK细胞回输治疗，评估治疗前后患者的生活质量(KPS评分、睡眠、疼痛、饮食)、辅助检查(肿瘤标志物、肝功能、肿瘤大小、腹腔积液)及淋巴细胞亚群状况，并观察治疗的毒副作用。结果64例患者CIK细胞治疗后的KPS评分、睡眠、疼痛、饮食、肿瘤标志物水平有改善，与治疗前比较差异均有统计学意义(P＜0.05)；患者的肝功能，肿瘤大小、腹腔积液、淋巴细胞亚群治疗后无明显改善，与治疗前比较差异均无统计学意义(P＞0.05)；11例次出现寒颤发热等不良反应。结论CIK治疗晚期消化系统恶性肿瘤，毒副作用小，可以一定程度的改善患者KPS评分、睡眠、疼痛、饮食及肿瘤标志物水平。肝功能、肿瘤负荷、腹腔积液、免疫功能状态在治疗后无明显获益。

细胞因子诱导杀伤细胞；免疫治疗；消化系统肿瘤；生活质量；免疫功能

消化系统恶性肿瘤是最常见的恶性肿瘤，其发病率及死亡率处于恶性肿瘤的前三位。随着手术、放疗、化疗、靶向治疗等综合治疗手段的有效应用，其生存率取得一定的进步，对于晚期消化系统恶性肿瘤患者，原则以最佳姑息减症治疗为主。随着分子生物及分子免疫技术的发展，肿瘤生物治疗以其毒副作用小、特异性杀伤的作用特点逐渐成为恶性肿瘤治疗的第四种治疗模式，其中，细胞因子杀伤(CIK)生物治疗近年来在国内临床应用广泛，本研究主要观察晚期消化系统恶性肿瘤患者接受CIK细胞治疗后的生活质量和免疫功能状态改善情况。

1 资料与方法

1.1 CIK细胞的制备CIK细胞由深圳中美康士细胞生物有限公司提供，在中美康士生物科技有限公司的生物细胞中心GMP实验室进行诱导培养，换液及输注前均进行无菌检测，检测结果均阴性可静脉输注，细胞活性＞98%。

1.2 病例选择经院伦理委员会批准，选取本院2010年1月至2014年12月住院病例64例。入选标准：经病理、影像等确诊的Ⅳ期消化系统恶性肿瘤患者；KPS≥50分，预计生存时间≥4周；患者有能力履行知情同意并签署知情同意书。排除标准：严重自身免疫性疾病或使用免疫抑制剂者；严重凝血功能异常或有活动性出血者；严重感染未控制或高热患者；1个月内发生心肌梗塞患者；顽固性或持续性癫痫患者；严重过敏体质患者。

1.3 治疗方法CIK细胞在培养第12、13、14天，分别通过输血器直接静脉输注，回输细胞数为(1～3)×109/次。

1.4 生活质量评估及辅助检查客观评价生活质量评估包括患者KPS评分、睡眠、疼痛、进食等情况。睡眠和饮食采用EORTC QLQ-C30单项条目评分；疼痛采用NRS及FACES法进行评分。辅助检查包括肿瘤标志物[癌胚抗原(CEA)、肿瘤抗原125 (CA125)、甲胎蛋白(AFP)、肿瘤抗原199(CA199)]、肝功能、腹腔积液、肿瘤大小等变化情况；根据irRC标准进行影像疗效评价[1]。

1.5 免疫功能评价流式细胞仪检测治疗前后患者的淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8情况，并进行比较。

1.6 统计学方法应用SPSS17.0统计学软件进行数据分析，计量数据以均数±标准差(±s)表示，治疗前后比较采用配对t检验或配对非参数检验，以P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 患者的基本情况64例患者共接受128个疗程(1～14个疗程/人)CIK细胞免疫治疗，其中肝癌患者22例，结肠癌13例，胃癌12例，患者年龄、性别分布见表1。

表1 CIK细胞生物治疗患者基本情况

2.2 输注不良反应及处理CIK细胞输注过程中11例次发生寒颤、高热等不适，输注30 min～2 h发生，持续时间2～6 h，症状自行缓解或给予解热镇痛、抗过敏治疗后缓解。

2.3 免疫功能改善情况接受CIK细胞治疗后患者淋巴细胞亚群较治疗前均有所升高，但差异均无统计学意义(P＞0.05)，见表2。

表2 CIK细胞生物治疗前后淋巴细胞亚群情况(%,±s)

表2 CIK细胞生物治疗前后淋巴细胞亚群情况(%,±s)

时间CD3+CD3+CD4+CD3+CD8+CD3+CD4+/CD4+CD8+治疗前治疗后t值P值55.0±12 58.8±12 -0.652 0.52 17.7±10.1 20.8±10.2 0.542 0.54 17.9±9.1% 19.7±9.5 -0.425 0.67 1.9±2.5 2.1±2.1 -0.067 0.94

2.4 CIK输注对生活质量和辅助检查的影响CIK治疗后患者的生活质量(KPS、睡眠、疼痛、饮食)均有改善，特别是治疗前KPS≥70分、轻度疼痛、肿瘤负荷较小的患者改善尤为明显，治疗前后比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。肿瘤标志物在治疗后下降，与治疗前比较差异有统计学意义(P＜0.05)。影像学疗效评价显示0例完全缓解/部分缓解，45例稳定，19例出现肿瘤进展。腹围测量提示腹腔积液有进展趋势。肝功能、影像评价、腹腔积液治疗前后比较差异无统计学意义(P＞0.05)，见表3。

表3 CIK细胞生物治疗前后生活质量评分和辅助检查比较(分，±s)

表3 CIK细胞生物治疗前后生活质量评分和辅助检查比较(分，±s)

时间治疗前治疗后检验值P值KPS 57.97±4.06 61.09±3.62 -5.351 0.000睡眠1.97±0.78 1.67±0.71 4.524 0.000疼痛2.64±1.92 2.36±1.89 4.339 0.000饮食2.38±0.97 2.16±0.90 2.9 0.005肿瘤标志物148.08±457.20 145.88±458.79 -3.942 0.000肝功能27.38±36.64 27.11±35.79 -1.625 0.104影像14.44±5.17 14.6±35.31 -1.706 0.088腹腔积液83.45±7.41 83.55±7.36 -0.852 0.390

3 讨论

CIK细胞制备方法简单，受物理化学因素的影响小，抗肿瘤作用确切，在国内广泛应用于预防或减少肿瘤患者术后复发与转移[2]，与放化疗联合应用成为进展期恶性肿瘤患者综合治疗的一部分[3-4]，也应用于无法接受手术、放化疗的晚期姑息治疗患者[5-6]。对于这些肿瘤晚期患者，一般状况差、各器官机能减退，难以耐受姑息性放化疗，CIK细胞生物治疗安全、副反应少、抗瘤谱广，可改善上述患者生活质量及生存时间[7]。

CIK细胞抗肿瘤机制明确，对于肿瘤细胞数量低于10×106以下的患者，能促进肿瘤细胞凋亡、免疫功能重建和康复，并可通过抑制循环肿瘤细胞数量来减少肿瘤肿瘤复发及转移机会[8]。CIK细胞还可能通过释放颗粒酶/穿孔素等毒性颗粒，导致肿瘤细胞裂解对肿瘤残存病灶产生杀伤作用[9]，并增加淋巴细胞亚群比率和提高NK细胞活性，刺激机体T细胞增殖而增强患者免疫监视作用间接杀伤肿瘤细胞[10]。对于胃肠道肿瘤，CIK细胞通过抑制胃肠道CD4+CD25+Treg细胞而提高机体免疫功能是治疗肠癌术后肿瘤复发和转移的重要机制[11]。此外，体外培养的CIK细胞可以分泌多种细胞因子，如细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)等，可对肿瘤细胞产生直接抑制作用并通过调节机体免疫系统反应而间接杀伤肿瘤细胞[12]。

相对于放化疗所致消化系统及骨髓造血系统方面的较严重的毒副作用，CIK细胞治疗仅出现寒颤、高热等类流感样反应，而且研究认为中等以上程度发热是治疗有效的表现[13]。Meta分析显示CIK细胞治疗可改善患者的KPS评分、睡眠、肿瘤标志物CEA、AFP、CA199、CA724、淋巴细胞亚群[14-15]，这对于晚期恶性肿瘤患者尤为重要。本项研究显示部分患者CIK治疗后肿瘤标志物水平、KPS评分、睡眠、饮食、疼痛评分较治疗前有一定程度的改善，与上述文献报道一致[14]，但本项研究结果显示淋巴细胞亚群在治疗后无明显增高、肿瘤负荷和腹腔积液治疗后有加重趋势，分析认为，这与本组研究对象肿瘤负荷过大、分期晚、基线状态差有关[15]。

综上所述，应用CIK细胞治疗不能接受手术、放化疗的晚期消化系统恶性肿瘤患者，可改善患者的睡眠、进食、KPS评分、疼痛情况及肿瘤标志物水平，进而提高患者生活质量，在改善患者的肝功能、肿瘤负荷、腹腔积液、免疫功能状态方面无明显获益。

[1]Wolchok JD,Hoos A,O'Day S,et al.Guidelines for the evaluation of immune therapy activity in solid tumors:immune-related response criteria[J].Clin Cancer Res,2009,15(23):7412-7420.

[2]Li XD,Xu B,Wu J,et al.Review of Chinese clinical trials on CIK cell treatment for malignancies[J].Clin Transl Oncol,2012,14:102-108.

[3]马楠,马东初,丁震宇,等.化疗联合DC-CIK治疗老年晚期非小细胞肺癌的疗效评价[J].解放军医药杂志,2015,27(1):37-40.

[4]石亮荣,蒋敬庭,吴骏.CIK细胞辅助治疗Ⅲ期胃癌[J].肿瘤基础与临床,2012,25(3):240-243.

[5]王志华,陆宝石,焦义恒,等.自体CIK细胞治疗晚期消化系统恶性肿瘤的临床疗效评估[J].中国医药导报,2013,10(21):86-89.

[6]王德欣,郭璐.中晚期肝癌患者细胞因子诱导的杀伤细胞治疗的疗效观察[J/CD].中华临床医师杂志(电子版),2015,9(4):563-567.

[7]罗利琼,王继红,霍丹,等.CIK细胞治疗恶性实体瘤的临床疗效评价[J].中国医药指南,2013,11(8):34-36.

[8]马磊,伍思培,邓旭斌,等.D-CIK治疗抑制进展期乳腺癌中循环肿瘤细胞的初步研究[J].海南医学,2014,25(13):1884-1886.

[9]Marten A,Ziske C,Schǒttker B,et a1.Interactions between dendritic cells and cytokine.induced killer cells lead to an activation of both populations[J].J Immunother,2001,24(6):502-510.

[10]Bour-Jordan H,Bluestone JA.Regulating the regulators:costimulatory signalscontrol the homeostasis and function of regulatory T cells, Immunol[J].Rev,2009,229:41-66.

[11]李敏,邓海峰,陆明洋,等.CIK治疗前后肿瘤患者外周血CD4+CD25+调节型T细胞变化研究[J].中国实验诊断学,2011,15(6): 1051-1053.

[12]Kornacker M,Moldenhauer G,Herbst M,et a1.Cytokine-induced killer cells against autologous CLL directcytotoxic effects and induction of immune accessory molecules by interferon-gamma[J].Int J Cancer,2006,(6):1377-1382.

[13]Hada H,Arima T,Nagashima H,et al.Hepatitis B virus DNA in human hepatocellular carcinoma:is the integration of hepatitis B virus DNA really carcinogenic?[J].Gastroenterol Japan,1986,21(6): 594-600.

[14]Ran Chen A,Xin Deng A,Haochen Wu.Combined immunotherapy with dendritic cells and cytokine-induced killer cells for malignant tumors:A systematic review and meta-analysis[J].International Immunopharmacology,2014,22:451-464.

[15]Ma Y,Zhang Z,Tang L.Cytokine-induced killer cells in the treatment of patients with solid carcinomas:a systematic review and pooled analysis[J].Cytotherapy,2012,14:483-493.

Effect of CIK immunotherapy on quality of life and immune function in patients with advanced gastrointestinalcancer for CIK cell.

LUO Yun-xiu,HE An-bing,LUO Ren-feng,WANG Qun,LIU Ai-hua,PENG Xiu-lan,TONG Wen-xian,LI Xiao-guang,TIAN Qian,WANG Hu,LIU Min-qiang.Department of Oncology,Wuhan Fifth Hospital,Wuhan 430050,Hubei,CHINA

ObjectiveTo assess the effects of cytkine induced killer(CIK)immunotherapy on quality of life and immune function in patients with advanced gastrointestinal cancer.MethodsSixty-four patients with advanced gastrointestinal cancer in Wuhan Fifth Hospital from January 2010 to December 2014 were treated with CIK immunotherapy.The quality of life(Karnofsky,sleeping,pain,diet),auxiliary examinations(tumor marker,liver function,tumor size, ascites),and status of leukomonocyte subgroup were evaluated before and after CIK treantment.Side effects were observed during treatment.ResultsIn the 64 patients,Karnofsky,sleeping,pain,diet and tumor marker levels were all improved significantly after CIK treantment,compared with those before CIK treatment(P＜0.05).There was no statistically significant difference between before and after CIK treatment in liver function,tumor size,ascites and leukomonocyte subgroup(P＞0.05).Eleven patients suffered from adverse reactions of fever and chill.ConclusionCIK immunotherapy can improve Karnofsky,sleep,pain,diet,and tumor marker levels for patients of advanced gastrointestinal cancer, with no serious side effects.No significant benefit has been obtained after CIK treatment in liver function,tumor size,ascites and immune function.

Cytkine induced killer(CIK);Immunotherapy;Gastrointestinal tumor;Quality of life;Immune function

R735

A

1003—6350（2016）01—0019—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.01.007

2015-06-22)

吴阶平医学基金会资助项目(编号：320.6750.12174)

罗云秀。E-mail：ruoshuiluo@163.com