赫兰学马震卓丁雪峰李建杰



骨折断端血与静脉血提取的富血小板血浆中TGF及PDGF含量比较

赫兰学1马震卓2丁雪峰3李建杰3

【摘要】目的 分析骨折断端血与静脉血提取的富血小板血浆中TGF及PDGF含量。方法 将11只大白兔作为实验对象，取骨折断端血，为实验组，随机抽取7只采取静脉血作为对照组。相同方法提取PRP，比较两组PRP中的PDGF及TGF-β含量。结果 骨折断端血提取的PRP中的TGF与PDGF均高于静脉血提取PRP中的TGF与PDGF浓度。结论 从骨折断端血中提取的PRP中的PDGF及TGF-β含量高于静脉血PRP。

【关键词】兔；骨折愈合；富血小板血浆

为比较骨折断端血与静脉血提取的富血小板血浆中TGF及PDGF含量，本研究选取大白兔展开动物实验，分析如下。

1 研究对象与方法

1.1 研究对象

1.1.1 实验动物 新西兰大白兔。

1.1.2 主要实验试剂 兔PDGF抗体，兔TGF-β抗体，兔PDGF-ELISA试剂盒，兔TGF-β-ELISA试剂盒（美国进口），即用型免疫组织化学SP试剂盒。

1.2 研究方法

1.2.1 实验 选用7～8月龄健康雄性新西兰大白兔11只（3 000±400 g），随机选取7只抽取静脉血做为对照组。

（1）实验方法：固定实验室及设备，同一术者，同一检验员。①对照组（静脉血）：分别从选取的7只兔耳缘静脉中抽取静脉血标本3 ml，离心分离富血小板血浆。分离方法：离心力200 g，第一次离心10 min，之后移液注射器抽去分界面2 mm以下红细胞，再次相同离心力相同时间离心后，抽去上3/4液体，所剩余为PRP。②实验组（断端血）：将11只实验兔静脉麻醉后，在兔右股骨髁上制造闭合性骨折。骨折1 h候后，麻醉状态下手术暴露股骨髁上骨折断端，采用枸橼酸钠做为抗凝剂，收集并留取骨折断端积血3 ml，同法离心，提取PRP。（2）术后处理：对两组PRP标本应用ELISA试剂盒分别检测兔血小板衍生生长因子（PDGF）及兔转化生长因子β（TGF-β）。

1.2.2 数据处理 采用SPSS 17.0统计软件包分析数据，以（±s）表示计量资料并行t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

骨折断端血提取的PRP中的TGF与PDGF含量（0.248 773± 0.035 300）、（0.288 518±0.023 600），均高于静脉血提取PRP中的（0.154 614±0.020 440）、（0.138 814±0.010 386）（P＜0.05）。

3 讨论

TGF-β是一种趋化因子，可以刺激前成骨细胞及成骨细胞的分裂增殖，同时抑制破骨细胞增殖，进而抑制骨吸收。在骨折早期，血小板脱颗粒，释放大量的TGF-β，诱导成骨细胞活化增殖，使骨膜增生，促进膜内成骨，加速成骨细胞产生I型胶原，分泌骨联结素，合成骨桥蛋白，在此过程中TGF-β发挥了强大的趋化作用［1］。TGF-β可以增强间充质干细胞迁移、扩散与分化，化学趋化骨细胞，促使产生细胞外基质，加速形成软骨，软骨化骨后形成骨痂组织，增加骨组织强度［2］。

PDGF可以促使成骨细胞分泌较多护骨素（OPG），OPG可以减少破骨细胞生成，从而抑制骨吸收，使骨量增加［3］。PDGF在组织中可以促细胞有丝分裂，还具有化学趋化性，可以刺激成纤维细胞、成骨细胞及血管内皮细胞等的有丝分裂、迁移，增殖，从而促进组织蛋白合成，加快修复创伤［4］。

PRP有较高浓度的血小板和多种生长因子，在临床工作中用来促进创面及创口愈合，促进骨修复等［5］。骨折断端血肿由动、静脉血及骨髓血组成，血肿激化，部分血小板脱颗粒。生长因子从纤维蛋白结构中释放，通过化学键同血小板结合，从而使生长因子延长作用的时间［6］。秦立武等［7］应用PRP治疗股骨颈骨折，通过向早中期闭合复位空心钉内固定的股骨颈骨折端注射PRP，诱导骨折断端新血管生成，使骨折断端血运重建加速，从而促进骨折愈合，降低骨折不愈合及股骨头缺血坏死等风险的。王善正等［8］通过研究证明，兔骨髓间充质干细胞在富血小板血浆的诱导下可以向成软骨细胞方向分化。

实验通过对比静脉血提取PRP与骨折断端血提取的PRP中能促进骨生长的生长因子（TGF、PDGF）含量研究，证明了利用骨折断端血提取PRP如果回植骨折断端，可获得更多的生长因子，更有利用骨折愈合，促进骨早期修复。

参考文献

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［4］ 付维力，李棋，李箭.富血小板血浆制备技术及其组分的研究进展［J］.中国修复重建外科杂志，2014（12）：1560-1564．

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［8］ 王善正，王宸，芮云峰.自体激活富血小板血浆干预兔骨髓间充质干细胞体外成软骨分化的研究［J］．中国组织工程研究，2013 （1）： 1-8．

Comparison of TGF and PDGF Levels in Platelet Rich Plasma Extracted From the Blood and Venous Blood of Fracture

HAO Lanxue1MA Zhenzhuo2DING Xuefeng3LI Jianjie31 Spinal Surgery，Central Hospital of Jilin City，Jilin Jilin 132001，China，2 Radiology Department，General Hospital of Jilin Chemical Group Company，Jilin Jilin 132021，China，3 Clinical Laboratory，General Hospital of Jilin Chemical Group Company，Jilin Jilin 132021，China

【Abstract】Objective To analysis of fracture end and venous blood from the blood platelet rich plasma TGF and PDGF content.Methods 11 big white rabbit as experimental object，take the blood of fracture end，as the experimental group，7 venous blood was taken as the control group randomly.The same method to extract the PRP，compare two groups of PDGF and TGF-beta content in PRP.Results The extraction of TGF PRP of fracture end blood and PDGF were higher than in venous blood extract concentration of PRP TGF and PDGF.Conclusion Extracted from the fracture end blood PRP PDGF and TGF-beta content is higher than that of venous blood in PRP．

【Key words】Rabbit，Fracture healing，Platelet rich plasma

【中图分类号】R683

【文献标识码】A

【文章编号】1674-9316（2016）07-0065-02

doi：10．3969/j．issn．1674-9316．2016．07．050

作者单位：1 吉林市中心医院脊柱外科，吉林 吉林 132001 ；2 吉化集团公司总医院放射科，吉林 吉林 132021 3 吉化集团公司总医院检验科，吉林 吉林 132021