姚造极　江　勇

(福建医科大学附属第一医院急诊科，福建　福州　350004)



盐酸戊乙奎醚对百草枯中毒大鼠血清TGF-β1、HIF-α1表达的影响

姚造极江勇

(福建医科大学附属第一医院急诊科，福建福州350004)

摘要〔〕目的探讨盐酸戊乙奎醚对百草枯中毒大鼠血清及肺组织转化生长因子(TGF)-β1、缺氧诱导因子(HIF)-1α表达的影响。方法选择百枯草中毒大鼠80只，随机分成两组各40只。对照组给予生理盐水灌胃干预。观察组：盐酸戊乙奎醚大鼠尾静脉注射。观察不同时点两组大鼠血清及肺组织TGF-β1、HIF-1α的水平与表达情况。结果观察组大鼠血清TGF-β1、HIF-1α含量都低于对照组(P<0.01)。实验后7、14 d，观察组大鼠的血清及肺组织TGF-β1、HIF-1α水平都低于对照组(P<0.01)。结论盐酸戊乙奎醚通过调节百草枯中毒大鼠血清及肺组织TGF-β1、HIF-1α的表达来减慢肺纤维化的产生、改善大鼠缺氧状况、进一步减轻肺损伤。

关键词〔〕百草枯中毒；盐酸戊乙奎醚；转化生长因子-β1；缺氧诱导因子-1α

百草枯中毒后肺组织受影响最明显，中毒初期以肺泡上皮细胞受损、炎症细胞浸润为主，晚期可能会出现肺纤维化〔1〕。转化生长因子(TGF)-β1、缺氧诱导因子(HIF)-1α等细胞因子在肺纤维化的形成过程中有着重要作用。TGF-β1能够改变细胞外基质成分、促进胶原合成，被普遍认为是纤维化进程的开关因子〔2〕。HIF-1α具有介导哺乳动物细胞低氧反应的核转录因子的作用，可有效调节组织纤维化进程〔3〕。有研究发现〔4〕，盐酸戊乙奎醚对百草枯中毒大鼠肺纤维化具有干预效果。本文探讨盐酸戊乙奎醚对百草枯中毒大鼠血清及肺组织TGF-β1、HIF-1α表达的影响。

1资料与方法

1.1一般资料选择健康雄性SD大鼠80只，随机分成两组各40只。对照组：重量205～249 g，平均(222.9±17.2)g；周龄4～6 w，平均(5.1±0.3)w。观察组：重量208～247 g，平均(225.4±17.8)g；周龄：4～7 w，平均(5.2±0.4)w。两组大鼠重量、周龄比较差异无统计学意义(P>0.05)，有可对比性。

1.2方法两组大鼠均用百草枯(上海谱振生物科技有限公司提供)腹腔注射染毒。TGF-β1、HIF-1α的酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒均由上海常斤生物科技有限公司提供。TGF-β1、HIF-1α免疫组化试剂盒、抗体由圣克鲁斯生物技术公司提供。对照组：大鼠百草枯中毒6 h后，给予生理盐水250 mg/kg灌胃干预。观察组：大鼠百草枯中毒6 h后，盐酸戊乙奎醚(成都力思特制药股份有限公司，国药准字H20051948)大鼠尾静脉注射，0.15 mg/kg，用生理盐水稀释成1 ml，1次/d。

1.3观察指标于实验后的第1、7、14天在大鼠腹腔内注射水合氯醛麻醉大鼠，取腹主动脉血，离心取血清。应用ELISA法测定两组大鼠血清TGF-β1、HIF-1α水平〔5〕，严格按照试剂盒的操作说明进行。开胸获取大鼠两侧肺组织，用10%甲醛液体保存，通过免疫组化染色测定肺组织TGF-β1、HIF-1α表达，严格按照试剂盒的操作说明进行。

1.4统计学方法应用SPSS13.0软件进行t检验、χ2检验。

2结果

2.1血清TGF-β1、HIF-1α含量观察组大鼠血清TGF-β1、HIF-1α含量〔(142.77±18.16)pg/ml,(13.36±4.04)pg/ml〕都低于对照组〔(193.18±29.81)pg/ml,(22.32±5.79)pg/ml〕(P<0.01)。

2.2血清TGF-β1水平实验后7、14 d，观察组大鼠的血清TGF-β1、HIF-1α水平都低于对照组(P<0.01)。见表1。

2.3肺组织TGF-β1、HIF-1α的表达实验后7、14 d，观察组大鼠的肺组织TGF-β1表达都低于对照组(P<0.01)。见表1，图1，图2。

组别血清TGF-β1实验后1d实验后7d实验后14d血清HIF-1α实验后1d实验后7d实验后14d对照组170.53±22.89202.83±28.46196.23±25.4410.12±2.5632.57±7.3323.68±5.81观察组169.38±23.40151.76±18.19132.22±14.479.87±2.2020.65±4.7310.29±2.62t/P值0.222/>0.059.563/<0.0113.832/<0.010.468/>0.058.642/<0.013.364/<0.01组别肺组织TGF-β1实验后1d实验后7d实验后14d肺组织HIF-1α实验后1d实验后7d实验后14d对照组0.713±0.1350.916±0.0490.868±0.0430.601±0.0220.843±0.0391.147±0.059观察组0.689±0.1310.641±0.0450.592±0.0270.596±0.0250.623±0.0310.885±0.047t/P值0.807/>0.0526.143/<0.0134.379/<0.010.950/>0.0527.929/<0.0121.967/<0.01

第一作者：姚造极(1974-)，男，主治医师，主要从事急诊医学研究。

图1　两组大鼠肺组织TGF-β1免疫组化(DAB，×200)

图2　两组大鼠肺组织HIF-1α免疫组化(DAB，×200)

3讨论

百草枯是一种联吡啶类除草剂，口服5～10 ml 20%浓度的百草枯即可致人死亡。百草枯中毒后，肺组织中的药物浓度最高，会造成肺泡的水肿与出血以及肺部严重的炎症反应，进而诱发肺纤维化，引起气体交换障碍，导致缺氧而死亡。研究发现，肺纤维化与细胞因子的作用有关〔6〕。TGF-β1水平过高是肺纤维化发生、发展的重要原因之一〔7〕。HIF-1α主要存在于慢性缺氧细胞中，与机体缺氧存在紧密的联系。百草枯中毒后肺组织细胞会表现出低氧的状态〔8〕，是肺组织纤维化产生的重要原因。抑制HIF-1α的表达一方面能够减轻肺组织损伤，也有利于延缓组织纤维化的进程〔9〕。

虽然临床上乌司他丁、依达拉奉、丙泊酚等药物在百草枯中毒后肺损伤保护中发挥出积极显著的作用〔10〕。但是，如何抑制百草枯中毒后肺纤维化的出现以及减缓肺纤维化的发展仍是临床关注的重点。盐酸戊乙奎醚又名长托宁，是一种新型的抗胆碱能药物〔11〕，可以抑制炎性介质与多种细胞因子的释放而防止全身炎症反应的发生〔12〕。本研究表明盐酸戊乙奎醚通过降低百草枯中毒大鼠血清及肺组织TGF-β1、HIF-1α的表达减慢肺纤维化的产生，改善大鼠缺氧状况，进一步减轻肺损伤。

参考文献4

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12徐建英.长托宁肌注加雾化吸入救治百草枯中毒的体会〔J〕.中国社区医师(医学专业)，2012;14(31)：138-9.

〔2015-05-17修回〕

(编辑袁左鸣/滕欣航)

通讯作者：江勇(1969-)，男，主治医师，主要从事急诊医学研究。

基金项目：福建省卫生厅青年科研基金资助项目(No.2003A044)

中图分类号〔〕R595.9〔

文献标识码〕A〔

文章编号〕1005-9202(2015)24-7005-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2015.24.017