黄国栋，谢艺琴，杨碧新，黄 锋

(龙川县中医院内科，广东 龙川 517000)

慢性乙型肝炎患者血清TGF-B1水平及其与肝纤维化的相关性研究

黄国栋，谢艺琴，杨碧新，黄 锋

(龙川县中医院内科，广东 龙川 517000)

目的 探讨血清转化生长因子-B1(TGF-B1)在慢性乙型肝炎患者中的水平及其与肝纤维化的关系。方法65例慢性乙型肝炎患者根据肝纤维化程度分为轻度肝纤维化组(29例)，重度肝纤维化组(19例)和肝硬化组(17例)，选取25例健康体检人员纳入对照组，检测各组受试者的血清TGF-B1及透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、层黏蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)水平并进行统计学分析。结果两两比较，血清TGF-B1及肝纤维化指标HA、PC-Ⅲ、LN、C-Ⅳ在对照组、轻度和重度肝纤维化组、肝硬化组依次上升，差异均有统计学意义(P＜0.05)；TGF-B1水平与血清HA、PC-Ⅲ、LN、C-Ⅳ水平之间均存在正相关性(P均＜0.05)。结论血清TGF-B1水平与肝纤维化发生、发展密切相关，可作为临床判断肝纤维化程度的血清学指标。

转化生长因子B1；乙型肝炎病毒；肝纤维化；肝硬化

肝纤维化是各种病因引起的慢性肝病在向肝硬化进展过程中的一个阶段[1]，如果进一步发展到肝小叶结构改建及假小叶形成时则称为肝硬化。近年来研究表明，转化生长因子B1(TGF-B1)在肝纤维化的发病过程中具有重要作用[2]，但目前关于血清TGF-B1与慢性乙型肝炎后肝纤维化的临床研究尚不多见。因此，本研究通过检测慢性乙型肝炎患者血清TGF-B1水平及肝纤维化指标，探讨血清TGF-B1与慢性乙型肝炎肝纤维化的相关性，以期为慢性乙型肝炎肝纤维化早期诊治提供理论基础。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择我院传染科于2010年1月至2014年8月期间诊治的65例慢性乙型肝炎患者，其中男性38例，女性27例，年龄26～65岁，平均(48.3±6.8)岁，HbeAg均为阳性并接受肝活检检查，符合2000年中华医学会西安会议修订的《病毒性肝炎防治方案》中慢性乙型肝炎诊[3]及《肝纤维化中西医结合诊疗指南》肝纤维化诊断标准[4]。排除标准：①其他病毒感染引起的肝功能异常及肝癌；②合并肝硬化腹水，内分泌、血液系统疾病及心、肾功能衰竭者；③妊娠、哺乳期妇女。同时选取在我院体检中心体检的健康成人25例纳入对照组，其中慢性肝炎患者与对照组患者的年龄、性别比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 研究方法 对照组于入组日、慢性乙型肝炎患者于入院后次日晨抽取空腹静脉血5 ml，2 000 r/min离心15 min，取上层血清置于-70℃备检，采用ELISA法检测血清TGF-B1及透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、层黏蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)，试剂盒分别由美国ADL公司天津分公司及北京北方生物技术研究所提供，操作步骤严格按说明书执行。患者择期在B超引导下行肝穿刺病理活检，穿刺组织长度均在1.8 cm以上，常规予以甲醛固定、脱水、石蜡包埋、连续切片、HE染色、网织染色，由同一位病理医生在光镜下确定肝纤维化分级。将0～2级、3～4级、5～6级者分别纳入轻度肝纤维化组(29例)、重度肝纤维化组(19例)和肝硬化组(17例)。

1.3 统计学方法 应用SPSS17.0统计学软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差(±s)表示，均数的比较采用t检验，相关性采用Spearman相关分析，率的比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组受试者血清TGF-B1及肝纤维化指标比较 血清TGF-B1及肝纤维化指标HA、PC-Ⅲ、LN、C-Ⅳ在对照组、轻度和重度肝纤维化组、肝硬化组依次上升，经两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 各组受试者血清TGF-B1及肝纤维化指标比较(±s)

表1 各组受试者血清TGF-B1及肝纤维化指标比较(±s)

注：a、b、c分别表示与对照组、轻度肝纤维化组比较、重度肝纤维化组比较，P＜0.05。

对照组(n=25)轻度肝纤维化组(n=29)重度肝纤维化组(n=19)肝硬化组(n=17) 336.3±121.2 529.3±189.4a614.6±221.5ab921.64±1.52abc40.3±11.4 226.7±27.5a408.6±38.1ab674.2±61.8abc21.1±6.4 127.6±21.8a231.8±30.6ab342.4±22.4abc20.6±5.7 67.4±12.8a154.9±22.1ab186.5±38.7abc37.6±9.8 94.3±13.7a175.7±22.1ab248.6±24.1abc

2.2 TGF-B1水平与血清HA、PC-Ⅲ、LN、C-Ⅳ水平的相关性 TGF-B1水平与血清HA、PC-Ⅲ、LN、C-Ⅳ之间均存在正相关性(r=0.967、0.476、0.418、0.412，P＜0.05)。

3 讨论

慢性乙型肝炎已成为我国一个重要的公共卫生问题，尤其是本病可进一步发展为肝硬化，严重影响患者生活质量[5]。肝纤维化则是发展过程中的一个必经阶段，其他肝脏疾病发展为肝硬化也要经历肝纤维化这一病理改变。肝纤维化指各种损伤作用于肝脏，引起肝组织内细胞外基质成分增生过度，以及在肝脏组织异常沉积，进而影响到肝脏结构功能，使其发生异常的病理变化。肝纤维化发展到第4期即增生的结缔组织包绕再生结节并分割残存肝小叶并形成假小叶，此时虽已达到早期肝硬化，但此阶段的病理过程是可逆的[6]，不过由于患者缺乏临床症状往往造成病情延误。因此，肝纤维化的早期诊断与治疗是慢性乙型肝炎诊治过程中的重要问题。

目前认为肝星状细胞(HSC)的异常增殖、活化在肝纤维化形成的过程中具有关键作用。在各种致病因素的作用下，静止期的HSC可以被激活，引起HSC增殖、合成和分泌细胞外基质成分增加，并使其降解减少，在上述作用下，细胞外基质成分不断增加、积聚而导致了肝纤维化的发生[7]。TGF-B1是一种最重要的促HSC活化因子[8]，肝炎病毒可通过免疫病理损伤(直接或间接)引起Kupffer细胞的大量激活、浸润，增加其TGF-B1的分泌，分泌增多的TGF-B1又可刺激贮脂细胞和其他间质细胞分泌TGF-B1，从而形成恶性循环[9]。TGF-B1可刺激HSC转化为肌成纤维细胞，从而增加ECM的合成，同时可上调Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及HA、LN的表达，降低基质金属蛋白酶合成及抑制促进纤溶酶原激活物的表达，降低ECM的降解，促使纤维化发生发展[10-11]。肝穿刺活检是肝纤维诊断的“金标准”，但是肝穿刺具有一定的创伤，而肝纤维化指标HA、PC-Ⅲ、LN、C-Ⅳ对于肝纤维化的诊断及程度判断目前已在临床获得广泛应用[12]。本研究结果显示，在慢性乙型肝炎纤维化各期患者血清TGF-B1及肝纤维化指标HA、PC-Ⅲ、LN、C-Ⅳ均较对照组升高，且其水平随肝纤维化程度的逐级加重而逐级升高，并且TGF-B1与肝纤维化指标呈正相关性，进一步证实TGF-B1是一种在肝纤维化发生、发展的具有重要作用细胞因子，对于慢性乙型肝炎患者测定血清TGF-B1水平有助早期肝纤维化的诊断及肝纤维化程度的判断。

综上所述，血清TGF-B1水平与肝纤维化发生、发展密切相关，可作为临床判断肝纤维化程度的血清学指标。

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[12]胡兴荣,崔显念,胡启托.血清肝纤维化指标与慢性肝炎肝纤维化程度的相关性[J].世界华人消化杂志,2010,18(14):1501-1503.

Study of serum TGF-B1levels in patients with chronic hepatitis B virus infection and its correlation with hepatic fibrosis.

HUNAG Guo-dong,XIE Yi-qin,YANG Bi-xin,HUANG Feng.
Department of Internal Medicine, Longchuan County Hospital of Traditional Chinese Medicine,Longchuan 517000,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo investigate the serum transforming growth factor-B1(TGF-B1)levels in patients with chronic hepatitis B virus infection and its correlation with hepatic fibrosis.MethodsSixty-five patients with chronic hepatitis B were divided into mild hepatic fibrosis group(29 cases),severe hepatic fibrosis group(19 cases) and hepatic cirrhosis group(17 cases),and 25 healthy volunteers were included into the control group.The serum TGF-B1and hyaluronic acid(HA),Ⅲprocollagen(PC-Ⅲ),laminin(LN),Ⅳcollagen(C-Ⅳ)levels were detected in all the patients.ResultsThe serum TGF-B1and HA,PC-Ⅲ,LN,C-Ⅳlevels were increased successively in the control group,mild hepatic fibrosis group,severe hepatic fibrosis group and hepatic cirrhosis group,and the differences were statistically significant(P＜0.05).There was positive correlations between serum TGF-B1levels and hepatic fibrosis indexes including HA,PC-Ⅲ,LN,C-Ⅳ(P＜0.05).ConclusionThe serum TGF-B1is closely related to the hepatic fibrosis in chronic hepatitis B process.It can be used as serological indicators for judging hepatic fibrosis.

Transforming growth factor B1;Hepatitis B virus;hepatic fibrosis;Hepatic cirrhosis

R512.6+2

A

1003—6350（2015）13—1890—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.13.0681

2015-01-08)

龙川县2013年度科技计划项目(编号：LC201308)

黄国栋。E-mail：guodongh@126.com