张忠健

(黑龙江省肇东市畜牧兽医局,黑龙江肇东 151100)

牛羊副结核病的流行、诊断及防制

张忠健

(黑龙江省肇东市畜牧兽医局,黑龙江肇东 151100)

副结核病也叫副结核性肠炎,是由副结核分枝杆菌所致的主要是牛的一种慢性传染病。其显著特征是间歇性或持续性的顽固性腹泻和渐进性消瘦,以及增生性肠炎导致的肠黏膜呈脑回状增厚。

副结核病;诊断;防制

1 流行病学

病畜和带菌畜是主要传染源。本病主要经消化道感染，但也可经胎盘感染。副结核分枝杆菌主要引起牛（尤其是乳牛）发病，幼年牛最易感。除牛外，绵羊、山羊、骆驼、鹿、猪、马、驴等动物也可患病。本病潜伏期甚长，可达6～12个月或更长，故表面上呈散发性，实际上是一种地方流行性。此病多见于母牛，公牛和阉牛少见，高产牛的症状较低产牛严重。

2 临诊症状

早期症状为间断性腹泻，以后变为经常性的顽固性拉稀，粪便稀薄恶臭，带有黏液和气泡。病初精神、食欲无显著变化，以后食量逐渐减少，消瘦，常喜睡卧，泌乳量减少，最后完全停止。颌下及垂皮出现水肿。体温多无明显变化，一般经3～4个月，最后因心力衰竭而死。绵羊和山羊感染后症状同牛基本相似，发病率1～10%。

3 病理变化

主要病变见于空肠、回肠和结肠前段。肠壁增厚，形成弯曲坚实的皱褶，黏膜呈黄白色或灰黄色，黏膜上带有黏液，浆膜下淋巴管和肠系膜淋巴管肿大，常呈索状。肠系膜淋巴结肿大、质软，切面湿润，有黄白色坏死灶。

4 实验室检验

家畜副结核病检疫常用的检验方法有病原学检查、皮内变态反应和补体结合反应。病原学检查主要是取病料镜检和从病料中分离培养物，用于疫病的确诊。皮内变态反应用于无临诊症状的家畜检疫。

4.1 病原学检查

（1）采集病料。收集混有黏液、血液、黏膜的粪便，也可用刮匙从病畜直肠深部（约30cm）刮取少量带有黏液的粪便，盛于小瓶。或将上述材料直接制成涂片数张，自然干燥，用防水纸包扎送检。病死畜可选明显病变肠段，用自来水冲去肠内粪便，采取病肠邻近的肠淋巴结和回盲瓣，装入塑料袋中，冰冻送检。

（2）细菌镜检。取粪样或直肠刮取物（混有黏液、血液），加4～5倍蒸馏水，充分混匀，用4层纱布过滤，滤液用5000转/min离心30min，取沉淀制成涂片2～4张。也可用粪样或直肠刮取物直接涂片，火焰固定，用萋-尼氏抗酸染色法染色，显微镜观察。副结核杆菌呈红色球杆状，成丛成团，背景成蓝色。

（3）细菌培养鉴定

A.病料处理。取粪样1～2g，加入生理盐水40ml充分混匀，用4层纱布过滤，收集滤液加入等体积的含有10%草酸和0.02%孔雀绿水溶液，混匀，放入37℃水浴中30min，3500～5000转/min离心30min，取沉淀物。或者取病变肠段，剪开，冲洗掉肠内容物，于玻璃板上摊开，用载玻片或手术刀刮取黏膜10～20g放于灭菌的带有铜纱网的乳钵中研磨，边研边添加0.5%胰酶水溶液40ml，制成悬液；用1摩尔/升氢氧化钠调pH至9.0，放在烧杯中，室温下在磁力搅拌器上搅拌1h，再以5000转/min离心30min，取沉淀物。或者取肠淋巴结10～20g，剔除脂肪后剪碎，按前面的操作方法研磨、离心、取沉淀物。

B.培养。将沉淀物涂片镜检，并将每份病料接种3～5管马铃薯汤培养基，第二天将露在试管外的棉塞剪去，用蜡封管口，37℃培养。一般经1～2个月出现肉眼可见的、针尖大的灰黄色隆起、不透明、边缘不太整齐的细小菌落，镜检可见细小抗酸杆菌。未长出菌落的培养管，须培养到6个月，若仍未见菌落生长，方可弃去。

C.鉴定。分离出的细菌培养物，分别接种1管加有分枝杆菌素和1管不加分枝杆菌素的Dubos培养基上，37℃温箱中培养20～30d。若是副结核分枝杆菌，则在加入分枝杆菌素的培养基上长生，而后一种培养基则无菌生长。

4.2 皮内变态反应

（1）材料准备：提纯副结核菌素或禽型提纯结核菌素（购自兽医生物药品厂）、游标卡尺、注射器等。

（2）检验方法：在牛颈左侧中部上1/3处剪毛，直径约10～15cm2，用卡尺测量皮肤皱褶的厚度并记录。剪毛处如有硬结创伤或化脓等情况，应另选部位或在颈部对侧进行试验。羊在尾根皱褶部、颈部或肩胛部剪毛，测量皮肤皱褶厚度并记录。

用灭菌生理盐水或注射用水将提纯副结核菌素稀释为0.5mg/ ml，禽型提纯结核菌素稀释为25000国际单位/ml。皮内注射剂量为0.1ml。注射部位应出现小包，若无小包，应另选部位或在对侧重新注射。注射后72h观察反应，检查注射部位有无热、肿、痛等炎性反应，用卡尺测量注射部位皮肤皱褶厚度，从该测量数据减去注射前的测量数据，即为皮厚差。

（3）结果判定：①阳性反应：局部有炎性反应，皮厚差≥4mm。②可疑反应：局部炎性反应不明显，皮厚差2.1～3.9mm，判为可疑感染动物。于3个月后，于对侧颈部相应部位再进行一次试验，若仍为可疑即判为阳性。②阴性反应：局部无炎症反应，皮厚差≤2mm。

（4）注意事项：①进口动物检疫时皮厚差＞2mm应判为阳性。②羊在尾根皱褶部无任何反应的判为阴性；有反应的，不论皮厚差大小和炎性反应轻重，均判为阳性。

5 防制措施

本病尚无有效药物治疗，预防本病重在加强饲养管理，严格检疫，可预防注射副结核菌苗，使牛群获得免疫。

[1] 何昭阳，陈奖励.副结核病的诊断与防制[J].中国兽医杂志，1991，（3）：52-54.