西安市第一医院妇产科(西安 710002)

崔亚杰 张培莲



宫颈上皮内瘤变中人乳头瘤病毒基因分型及感染状况研究*

西安市第一医院妇产科(西安 710002)

崔亚杰 张培莲

目的：探讨宫颈上皮内瘤变中人乳头瘤病毒(HPV)基因分型及感染状况，为临床宫颈癌的防治提供理论依据。方法：临床病理诊断为宫颈上皮内瘤变(CIN)石蜡包埋的组织标本150例为研究对象。采用DNA芯片技术,对其HPV 感染状况进行回顾性分析。结果：①HPV阳性筛查率在20～39岁年龄段处于较高水平，其中20～29岁年龄段阳性率最高,为26.92%,宫颈上皮内瘤变好发年龄组为30～59岁之间。②CIN I常见的HPV 基因型为：16、58；CIN II为16、31；CIN III 为16、52。结论：HPV易感与CIN高发为不同年龄组,在不同级别CIN 中HPV基因亚型不同。

HPV感染是宫颈癌及宫颈上皮内瘤变发生的必要因素,当自身免疫力低下或HPV持续感染未得到控制时，可能导致宫颈上皮内瘤变和宫颈癌。由于持续感染状态到发生病变的间隔时间较长，所以尽早筛查发现HPV感染，通过对HPV分型检测,尤其是高危型检测,达到对宫颈上皮内瘤变及宫颈癌预防、早期发现和治疗的目的。本研究对宫颈上皮内瘤变中HPV基因分型及感染状况进行回顾性分析,了解HPV 亚型与宫颈上皮内瘤变(CIN)的相关性。

对象与方法

1 对 象 2010 年1月至2013 年12月期间，我科行TCT并HPV筛查病例共2380例,其中临床病理诊断为宫颈上皮内瘤变的石蜡包埋组织标本150例作为研究对象,包括CINI 30例、CINⅡ60例、CINⅢ 60例。年龄23～71 岁,平均年龄41.06±7.81岁。平均孕次2.28±1.13次。

2 方 法 应用DNA芯片技术。首先通过PCR体外扩增，扩增出23种HPV基因亚型的目标片段,包括8种高危型和5种低危型，然后将扩增产物与分型探针进行DNA反向杂交，根据有无杂交信号判断不同基因亚型的存在。这种DNA芯片技术共检测23种HPV基因亚型包括18种高危型和5种低危型。高危型包括：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、83、MM4；低危型包括：HPV6、11、42、43、44。同时对同一病例的多种HPV亚型感染也可进行诊断。

3 统计学方法 采用SPSS 13.0 软件进行资料分析。采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

结 果

1 各年龄段HPV筛查阳性率及CIN患病情况 见表1。20～29岁年龄段HPV阳性率最高,为26.92%；40～49岁及50～59岁年龄段HPV阳性率分别为13.99%及14.11%，较前明显下降，与20～29岁及30～39岁年龄段阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。但宫颈上皮内瘤变好发年龄组为30～59岁之间，而非HPV阳性率最高的20～29岁年龄段,差别有统计学意义(P<0.05)。在≥60岁年龄组中，HPV阳性率逐渐下降，但发生高度上皮内瘤变(CIN II及CIN III)的机率仍较高。宫颈高度上皮内瘤变好发年龄组为30～59岁之间，以40～49岁年龄段发病率最高，与其他年龄段相比,差别有统计学意义(P<0.05)。

表1 各年龄段HPV筛查阳性率及CIN患病情况

2 HPV 感染的基因型别和宫颈病变的关系 见表2、表3。高危型HPV基因型别在不同级别CIN 中有不同表现：CIN I常见的高危型HPV 型别由多到少依次是：16、58、51、56; CIN II是16、31、33、58、53、68; CIN III 是16、52、31、58、18、51、3、59。高度上皮内瘤变最常见的高危型HPV基因型由多至少依次是：16、58、31、33、52、53、18、51、56。低危型HPV基因型主要是6、11、43、42、6。低危型HPV感染和宫颈病变也存在一定关系,但多为与高危型同时存在的双重或多重感染。

讨 论

近年来,随着对宫颈癌病因学研究的不断发展,研究已证实宫颈癌的发生、发展与高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV) 感染有密切关系[1]。多数女性在感染高危型HPV 后机体的自动清除机制可清除病毒感染，只有约 1%～3%的患者HPV 感染呈持续状态[2]。刘征丽等[3]利用荧光偏振检测技术检测西安地区确诊的宫颈癌和CIN患者中高危型HPV感染阳性率为60.7%。 资料显示目前已经发现的HPV亚型有100 多种，现临床及实验研究均采用Munoz 高危型HPV和低危型HPV的流行病学分类方法：高危型HPV包括HPV 16、18、31 等,低危型HPV包括HPV 6、11、40、42 等。低危型HPV多在尖锐湿疣及低度CIN病变中检出,高危型HPV多在高度CIN和宫颈癌中检出。使用基因芯片技术可对HPV DNA进行分型诊断,可检测23种HPV基因亚型,包括18种高危型和5种低危型,还可判断多重感染。本研究利用基因芯片技术对低度及高度宫颈上皮内瘤变的HPV感染亚型进行检测，结果显示HPV基因型别在不同级别CIN 中有不同表现：CIN I常见的HPV 型别由多到少依次是：16、58、51、56；CIN II是16、31、33、58、53、68；CIN III 是16、52、31、58、18、51、3、59。高度CIN最常见的HPV 基因型由多至少依次是：16、58、31、33、52、53、18、51、56。低危型主要是6、11、43、42、6。低危型HPV基因型别和宫颈病变也存在一定关系,但多为与高危型同时存在的双重或多重感染。而且低危型HPV感染多见于CINI和CINII、CINIII最常见高危型HPV感染,提示高危型HPV感染与CIN的发展及宫颈癌发生关系更为密切。

表2 高危型HPV感染的基因型别和CIN的关系(n)

表3 低危型HPV感染的基因型别和CIN的关系(n)

研究发现年轻的性活跃妇女HPV 感染率最高,达20%～40%,所以年龄是HPV 感染的重要危险因素之一,就具有正常性行为的妇女而言,宫颈至少感染一种HPV 的终生累积概率可高达70%。如此高的HPV感染率,只有极少数发生CIN或宫颈癌,是由于大部分妇女感染HPV后,多在8～10个月内自然消退,其中只有少数≥35 岁妇女无法自动清除HPV,表现为持续感染状态。这类妇女发生CIN的风险明显升高,如果未经干预阻断，HPV持续感染，CIN 可能在20 年左右进展为宫颈癌。在我们的研究中：HPV阳性筛查率在20～39岁年龄段处于较高水平,其中20～29岁年龄段阳性率最高,为26.92%,与目前的研究结果相同,提示HPV感染与性行为相关，高阳性率见于性活跃期。40～49岁及50～59岁年龄段HPV阳性率分别为13.99%及14.11%,较前明显下降,与20～29岁及30～39岁年龄段阳性率,比较差别具有统计学意义。但宫颈上皮内瘤变好发年龄组为30～59岁之间,而非HPV阳性率最高的20～29岁年龄段,差别具有统计学意义。在≥60岁年龄组中，HPV阳性率逐渐下降，但发生高度上皮内瘤变(CIN II及CIN III)的机率仍较高,考虑与HPV持续感染相关。宫颈高度上皮内瘤变好发年龄组为30～59岁之间，以40～49岁年龄段发病率最高,与其他年龄段相比,差别具有统计学意义。资料显示：经过积极的宫颈癌筛查,全国宫颈癌的死亡率明显下降,幅度为63.64%，宫颈癌的发病率和死亡率都得到了一定程度的控制[4]。所以对≥30 岁以上的女性应每3 年做一次HPV及宫颈细胞学的筛查,以尽早发现HPV,尤其是高危型HPV感染及宫颈细胞学异常,定期监测,及时治疗,预防因HPV持续感染导致CIN及宫颈癌的发生。

[1] Ghittoni R,Accardi R,Hasan U,etal.The biological properties of E6 and E7 oncoproteins from human papillomaviruses[J].Virus Genes,2010,40(1)：1-13.

[2] Meijer CJ,Snijders PJ.Cervical cancer in 2013：Screening comes of age and treatment progress continues[J].Nat Rev Cli n Oncol,2014,11(2)：77-78.

[3] 刘征丽,张 菊，张 潍,等.等荧光偏振检测西北地区宫颈病变组织中HPV感染分型的研究[J].陕西医学杂志,2015，44(2)：164-166.

[4] 庞秋霞,符兆英.宫颈癌的预防措施及研究进展[J].中国妇幼保健,2013,28(23)：3866-3868.

(收稿：2015-03-10)

*陕西省社会发展科技攻关项目(2015SF185)

宫颈上皮内瘤样病变 乳头状瘤病毒感染 基因型

R737.33

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2015.10.013