曹 静，吕志排，党秋红，郝志伟，李道明

1)郑州大学第三附属医院病理科 郑州 450052 2)郑州大学第一附属医院病理科 郑州 450052

宫颈腺癌组织中C-erbB-2与E-cadherin蛋白的表达*

曹 静1)，吕志排1)，党秋红1)，郝志伟1)，李道明2)#

1)郑州大学第三附属医院病理科 郑州 450052 2)郑州大学第一附属医院病理科 郑州 450052

#通信作者，男，1963年10月生，博士，主任医师，研究方向：肿瘤病理，E-mail：lidaoming@zzu.edu.cn

C-erbB-2；E-cadherin；宫颈腺癌

目的：探讨宫颈腺癌组织中C-erbB-2和E-cadherin蛋白的表达与宫颈腺癌患者临床病理特征的关系。方法：应用免疫组化法检测72例宫颈腺癌组织中C-erbB-2和E-cadherin蛋白的表达情况，分析二者与宫颈腺癌患者临床病理特征的关系。结果：72例宫颈腺癌组织中，C-erbB-2高表达31例(43.1%)，E-cadherin低表达34例(47.2%)。C-erbB-2高表达和E-cadherin低表达与宫颈腺癌的分化程度、FIGO分期及淋巴结转移有关(P<0.05)。宫颈腺癌组织中C-erbB-2与E-cadherin的表达呈负关联(rP=0.600，P<0.001)。结论：C-erbB-2高表达和E-cadherin低表达与宫颈腺癌的发展有关，可作为判断宫颈腺癌生物学行为的重要参考指标。

宫颈腺癌占宫颈肿瘤的10%～15%，近些年其发病率有增长趋势；宫颈腺癌的治疗反应及生物学行为不同于宫颈鳞状细胞癌，且预后较差[1]。C-erbB-2属于酪氨酸激酶受体(receptor tyrosine kinase，RTK)家族，参与肿瘤的发生，并与肿瘤细胞增殖、浸润、转移密切相关[2]。上皮细胞钙黏蛋白E-cadherin是一类介导同质细胞黏附的钙依赖性黏附分子，对维持正常细胞间的黏附力、抑制肿瘤细胞的侵袭有重要作用。有数据[3]显示E-cadherin是肿瘤进展的关键蛋白，E-cadherin低表达常伴随肿瘤细胞的去分化、极性消失，亦与肿瘤发生和浸润有关。有学者[4]认为C-erbB-2过表达可以通过抑制E-cadherin的表达介导肿瘤演进和转移。作者采用免疫组化法检测宫颈腺癌组织中C-erbB-2和E-cadherin蛋白的表达情况，探讨二者在宫颈腺癌的发展、侵袭和转移中的作用及临床价值。

1 材料与方法

1.1 材料 收集2009年1月至2013年12月郑州大学第三附属医院妇产科手术切除的宫颈腺癌组织标本72例，均经病理证实。患者年龄35～76(58.1±9.3)岁，有完整的临床资料且术前均未行放、化疗。依据2009年版FIGO分期标准，Ⅰ期42例(ⅠA期7例、ⅠB期35例)，Ⅱ期16例(ⅡA期10例、ⅡB期6例)，Ⅲ期8例(ⅢA期2例、ⅢB期6例)，Ⅳ期6例(ⅣA期4例、ⅣB期2例)；组织学分级：低分化12例，中分化45例，高分化15例；术后病理证实有淋巴结转移者12例。

1.2 宫颈腺癌组织中C-erbB-2及E-cadherin蛋白表达的检测 兔抗人C-erbB-2单克隆抗体及鼠抗人E-cadherin单克隆抗体购自上海基因科技有限公司，辣根过氧化物酶标记的En Vision试剂盒购自丹麦DaKo公司。采用En Vision法行免疫组化标记，操作步骤按试剂盒说明书进行：3 μm厚石蜡切片经脱蜡、水化及预处理，阻断内源性过氧化物酶，一抗孵育，En Vision孵育，苏木素复染并封片。采用PBS代替一抗作阴性对照，已知阳性片作阳性对照。

1.3 结果判定 C-erbB-2及E-cadherin阳性染色呈棕黄色颗粒，均定位于胞膜。取10个高倍镜视野，分别记录阳性细胞的染色强度及所占百分比。C-erbB-2判定标准：无着色且阳性细胞百分比≤10%或阳性细胞百分比>10%且胞膜呈浅黄色、染色间断，判定为低表达；阳性细胞百分比>10%且胞膜呈棕黄色或棕褐色、染色连续、环绕整个胞膜，判定为高表达。E-cadherin判定标准：无阳性细胞计0分；阳性细胞百分比<25%计1分，25%～计2分，51%～75%计3分，>75%计4分；无色计0分，浅黄色计1分，棕黄色计2分，棕褐色计3分。两项指标评分相乘，0～2分为阴性，3～5分为(+)，6～8分为()，9～12分为()；阴性或(+)判定为低表达，()及()判定为高表达[5]。

1.4 统计学处理 应用SPSS 19.0处理数据。采用χ2检验比较不同临床病理特征人群C-erbB-2及E-cadherin高(低)表达率的差异，采用Pearson列联系数分析宫颈腺癌组织中2种蛋白表达的关系。检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 C-erbB-2及E-cadherin的表达与宫颈腺癌患者临床病理特征的关系 见图1。72例宫颈腺癌中，C-erbB-2高表达31例(43.1%)，E-cadherin低表达34例(47.2%)。宫颈腺癌分化越差、FIGO分期越高或出现淋巴结转移，C-erbB-2高表达率越高，而E-cadherin低表达率越高(表1)。

图1 宫颈腺癌组织中C-erbB-2蛋白高表达(A)、E-cadherin蛋白低表达(B)(En Vision,×200)表1 C-erbB-2及E-cadherin的表达与宫颈腺癌患者临床病理特征的关系 例(%)

2.2 宫颈腺癌组织中C-erbB-2及E-cadherin表达的关系 宫颈腺癌组织中C-erbB-2及E-cadherin的表达呈负关联(rP=0.600,P<0.001)(表2)。

表2 宫颈腺癌组织中C-erbB-2及E-cadherin表达的关系 例

3 讨论

近些年来，宫颈腺性病变的发病率不断升高，严重危害妇女的生命健康。C-erbB-2基因定位于染色体17q21，蛋白产物是一种相对分子质量为185 000的酪氨酸激酶跨膜蛋白[6]。C-erbB-2是一种原癌基因，其蛋白产物是EGFR家族中的重要成员；C-erbB-2在正常宫颈组织中几乎不表达[7]，C-erbB-2的高表达被认为与多种恶性肿瘤如胃癌、乳癌、结直肠癌等的生长、浸润和转移密切相关[8]。有学者[9]认为C-erbB-2与erbB受体相互作用，参与配体调节EGF家族并促进肿瘤的进展。在人类肿瘤中，C-erbB-2的分子改变使激酶极度活跃，从而赋予癌细胞异常的、配体独立的、失控的生长动力。该研究结果显示，宫颈腺癌分化越差，FIGO分期越高或出现淋巴结转移，C-erbB-2的高表达率越高，与上述研究相符，提示C-erbB-2的高表达与宫颈腺癌的发展有关。

E-cadherin是位于染色体16q22的钙黏蛋白基因编码的钙依赖性跨膜糖蛋白。 E-cadherin的C末端必须与α、β、γ-catenin结合形成复合物，才能与肌动蛋白、细胞骨架相连，并形成伪足，使E-cadherin稳定地锚于细胞膜上，发挥细胞黏附功能[10]。E-cadherin参与钙离子依赖性的细胞间黏附能力的调节，对于维持正常组织结构的完整性及极性、抑制肿瘤细胞的侵袭起关键作用。E-cadherin在正常宫颈组织中100%表达[11]，E-cadherin表达失调或缺失时，肿瘤细胞间的相互黏附力下降，彼此松动、分离，从原发灶脱落而发生侵袭和转移[12]。有学者[13]对宫颈鳞状细胞癌组织中E-cadherin的表达情况进行研究，发现E-cadherin表达缺失是宫颈鳞状细胞癌发生的重要分子事件。 此外，E-cadherin在胃癌、前列腺癌等肿瘤中均表现为表达下调[14-15]。该研究结果显示，宫颈腺癌分化越差，FIGO分期越高或出现淋巴结转移，E-cadherin的低表达率越高，与上述研究相符，提示E-cadherin的低表达与宫颈腺癌的发展有关。

Cheng等[16]的研究显示，在人类卵巢癌细胞中，C-erbB-2在EGF诱导的E-cadherin下调中发挥潜在作用并增加肿瘤细胞的侵袭能力，EGF诱导EGFR和C-erbB-2相互作用，并活化C-erbB-2的表达。该研究结果显示，宫颈腺癌组织中C-erbB-2与E-cadherin蛋白的表达呈负关联，与上述研究相符，提示二者共同参与了宫颈腺癌的发展。

综上所述，C-erbB-2高表达和E-cadherin低表达与宫颈腺癌的发展有关。探索C-erbB-2与E-cadherin在宫颈腺癌中的表达及作用，对于寻找药物治疗的新靶点及预后评估具有重要意义。

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Expressions of C-erbB-2 and E-cadherin in cervical adenocarcinoma tissue

CAOJing1),LVZhipai1),DANGQiuhong1),HAOZhiwei1),LIDaoming2)

1)DepartmentofPathology,theThirdAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052 2)DepartmentofPathology,theFirstAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052

C-erbB-2；E-cadherin；cervical adenocarcinoma

Aim: To explore the expressions and clinicopathology significance of E-cadherin and C-erbB-2 in cervical adenocarcinoma tissue. Methods: The expressions of E-cadherin and C-erbB-2 protein in 72 cases diagnosed as cervical adenocarcinoma were detected by immunohistochemical method, and their relations with clinicopathological parameters were analyzed. Results: Out of 72 cervical adenocarcinoma samples, the high level expression of C-erbB-2 was found in 31 cases(43.1%), while the low level expression of E-cadherin was found in 34 cases(47.2%). C-erbB-2 overexpression and E-cadherin reduced expression were related with differentiation degree, FIGO staging and lymph node metastasis of cervical adenocarcinoma(P<0.05). There was negative association between C-erbB-2 and E-cadherin protein expressions in cervical adenocarcinoma tissue(rP=0.600，P<0.001).Conclusion: C-erbB-2 overexpression and E-cadherin reduced expression may play important roles in the development of cervical adenocarcinoma, and could be used for judging its biological behavior.

10.13705/j.issn.1671-6825.2015.04.014

*河南省基础与前沿技术项目 112300410155

R737.33