郑家三，刘健男，吴凌，张洪友，徐闯，夏成，吕艳庆

（1.黑龙江八一农垦大学动物科技学院，大庆 163319；2.杜尔伯特蒙古族自治县巴彦查干乡畜牧水产服务中心）

随着奶牛饲养数量的日益增多，以及泌乳奶牛繁殖和饲养技术条件的不断提高，奶牛的生产性能也不断的提升，营养代谢病成为泌乳奶牛围产期重要的疾病之一，但VA、VD、VE以及微量元素Se、Zn、Cu缺乏在集约化牛场并未受到广泛的关注，一方面是由于牛场临床条件的限制，另一方面是VA、VD、VE以及微量元素Se、Zn、Cu缺乏常缺少典型临床特征，亚临床缺乏很少出现临床症状，很难引起临床兽医的注意。但VA、VD、VE以及微量元素Se、Zn、Cu是泌乳奶牛生产过程中不可缺少的物质，当奶牛肝脏中VA和VE储备消耗到一定程度时，畜群就不同程度地表现生长停滞、繁殖功能下降、生产力减弱和机体抵抗力降低等问题[1]。维生素D（VD）缺乏，也会导致钙缺乏的发生[2]。微量元素Se、Zn、Cu虽然在奶牛体内的含量很小，但Se、Zn、Cu是必不可少的微量元素。

目前国内对集约化牛场高产奶牛的泌乳奶牛不同阶段的VA、VD、VE以及微量元素Se、Zn、Cu缺乏的情况的调查研究较少，因此开展了集约化牛场泌乳奶牛不同泌乳期VA、VD、VE以及微量元素Se、Zn、Cu缺乏的调查研究，旨在查明这些维生素和微量元素缺乏状况，为今后牛场有效的预防微量元素和维生素缺乏提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

牛场Ⅰ，荷斯坦奶牛，存栏数为1 550头。牛场Ⅱ，荷斯坦奶牛，存栏数为8 000头。两牛场均采取集约化散栏式饲养，TMR全混日粮饲喂。围产期奶牛日粮组成见表1和表2。

表1 牛场I泌乳期奶牛日粮组成及营养水平Table 1 Formula and nutritional ingredients of lactating cow for dairy farm I

表2 牛场Ⅱ泌乳期奶牛日粮组成及营养水平Table 2 Formula and nutritional ingredients of lactating cow for dairy farmⅡ

1.2 血浆检测项目及方法

在两个牛场，按产后泌乳前期（15～20 d）、泌乳盛期（50～60 d）、泌乳中期（120～150 d）、泌乳后期（200～220 d）四个时间段，各选取体重、年龄、胎次相近20头奶牛。试验奶牛清晨空腹尾静脉采集血样10 mL，加肝素（20 μ·mL-1）抗凝，离心（3 500 r·s-1，10 min），分离血浆-80℃冻存。采集每个泌乳时间段的TMR全混日粮，每阶段收集5 kg用于检测。

饲料检测方法：维生素A、维生素D、维生素E检测方法为电感耦合等离子质谱法，Cu、Zn和Se检测方法为原子荧光法。

血浆检测方法：VA、VD、VE的检测方法为ELISA方法，Cu、Zn为分光光度法。

1.3 数据处理

使用spss19.0软件进行单因素方差分析，采用“平均值±标准差”表示数据；表中均同行比较，含不同大写字母表示数据差异极显著（P＜0.01），含不同小写字母表示差异显著（P＜0.05），含相同字母或不含字母表示差异不显著（P＞0.05）。

2 结果与分析

2.1 全混日粮中维生素（VA、VD、VE）与微量元素（Cu、Zn、Se）的水平

表3和4显示两个试验牛场各泌乳阶段饲料维生素和微量元素的水平。

表3 牛场Ⅰ泌乳阶段奶牛日粮维生素和微量元素水平Table 3 Level of vitamin and microelement of lactation cows in dairy farmⅠ

表4 牛场Ⅱ各泌乳阶段维生素和微量元素水平Table 4 Level of vitamin and microelement of lactation cows in dairy farmⅡ

结果表明：日粮中VA、VE、微量元素Se水平，牛场Ⅰ均低于牛场Ⅱ各泌乳期，并且两个牛场VA水平均高于NRC（2001）饲养标准。VD水平，牛场Ⅰ低于牛场Ⅱ的泌乳晚期和泌乳早期，但高于牛场Ⅱ（泌乳中期），并且两个牛场VD水平均高于NRC（2001）饲养标准。微量元素Cu水平，牛场Ⅰ均低于牛场Ⅱ各泌乳期，但牛场Ⅱ各泌乳期均高于NRC（2001）饲养标准，而牛场Ⅰ低于NRC（2001）饲养标准。微量元素Zn水平，牛场Ⅰ均低于牛场Ⅱ各泌乳期，且牛场Ⅰ低于NRC（2001）饲养标准，而牛场Ⅱ各泌乳期均高于NRC（2001）饲养标准。

2.2 试验奶牛血浆中维生素（VA、VD、VE）及微量元素（Zn、Cu、Se）的水平

表5和6显示两个试验牛场各泌乳阶段血浆维生素和微量元素的水平。

表5 试验奶牛血浆中维生素（VA、VD、VE）的水平Table 5 Levels of vitamin A，vitamin D and vitamin E in plasma from experimented cows

由表5显示，牛场Ⅰ各泌乳时期血浆VA水平差异均不显著。牛场Ⅱ泌乳中期与其他泌乳期相比差异显著（P＜0.05）。各泌乳时期血浆的VA水平均高于血浆VA的正常值（250 μg·L-1）；牛场Ⅰ各泌乳时期血浆VD水平差异均不显著均（P＞0.05），牛场Ⅱ各泌乳期差异均不显著（P＞0.05），且各泌乳时期的VD水平均高于血浆VD正常值（5 ng·mL-1）；牛场Ⅰ和牛场Ⅱ泌乳后期奶牛血浆VE水平与泌乳前期、盛期、中期相比差异显著（P＜0.05）。且均低于血浆VE正常值（2 mg·L-1）。

表6 试验奶牛血浆中微量元素（Cu、Zn）的水平Table 6 Level of Cu and Zn in plasma from experimented cows

表6显示，微量元素Cu的水平，牛场Ⅰ各泌乳时期相比，泌乳前期显著高于泌乳后期（P＜0.05），泌乳盛期显著低于泌乳中期（P＜0.05），泌乳中期显著高于泌乳后期（P＜0.05）。牛场Ⅱ各泌乳期相比差异不显著（P＞0.05）。微量元素Zn的水平，牛场Ⅰ各泌乳时期相比，泌乳盛期显著低于泌乳中期和泌乳后期（P＜0.05）。牛场Ⅱ泌乳中期显著高于其他泌乳期（P＜0.05），泌乳后期显著高于泌乳盛期（P＜0.05）。

3 分析与讨论

3.1 泌乳奶牛维生素（VA、VD、VE）缺乏的发生状况

血浆中VA水平是显示动物VA营养状况的良好指标[3]，目前，血浆中VA水平尚无统一的判定标准，有研究报道，奶牛血浆中VA的水平低于200 μg·L-1，即可确诊VA缺乏[4-7]。NRC（2001）饲养标准中，饲料中VA的需要量为110 IU·kg-1BW（33 μg·kg-1BW）[8]。试验两个牛场日粮中VA水平均高于NRC（2001）饲养标准，且两牛场各泌乳期血浆VA水平均高于血浆VA正常水平，但牛场Ⅱ各泌乳期日粮VA含量均高于牛场Ⅰ，这可能与牛场Ⅱ日粮中VA的含量比牛场Ⅰ高有关，虽然两个牛场随着泌乳期的延长，呈现不同的变化趋势，但是总体水平都在正常范围内。说明两集约化牛场日粮VA的需要量均能满足泌乳奶牛的正常生理需要，甚至是超过了泌乳奶牛的需要量。

研究表明，正常奶牛血浆中25-（OH）-D3的浓度为20～50 ng·mL-1，如低于5 ng·mL-1可视为VD缺乏[9]。试验中两牛场试验奶牛VD含量均在正常值范围内，牛场Ⅰ产后各泌乳期饲喂日粮相同，使整个泌乳期的VD水平变化不大，牛场Ⅱ从泌乳中期开始VD水平呈上升趋势，并且高于牛场Ⅰ，这可能与牛场Ⅱ中日粮中VD的含量高有关，两个牛场的饲料中VD水平都高于NRC（2001）饲养标准[9]。结果表明两集约化牛场泌乳奶牛日粮VD的需要量均能满足泌乳奶牛的正常生理需要。

有研究报道，围产期奶牛血浆α-生育酚的含量应达到3.0～4.0 mg·L-1[8，10，11]；若低于此值，可认为存在缺乏症。试验中，两牛场均出现VE缺乏，并且随着泌乳期的延长，均出现不同程度的下降，且有相似的趋势。NRC（2001）饲养标准中，泌乳奶牛总VE推荐量为2.6 IU·kg-1BW（1.736 8 mg·kg-1BW）[8]。两个牛场日粮中的VE的含量均能达到NRC（2001）的饲养标准。有研究报道，大量添加的VE在瘤胃中被破坏，而且破坏程度随着饲料精料水平的增加而增加[13]。两牛场中日粮中精料均占很大比例，这可能是导致VE缺乏的一个重要原因[8]。

3.2 泌乳奶牛微量元素（Cu、Zn）缺乏的发生状况

王聪等[13]报道，奶牛血浆中铜的浓度从14.06～15.63 μmol·L-1降至10.93 μmol·L-1时，则称为低铜血症（亚临床型缺铜症）。NRC（2001）的饲养标准Cu的最低需要量为10 mg·kg-1[8]。试验中，牛场Ⅰ日粮中Cu含量低于NRC饲养标准，牛场Ⅱ中各泌乳期日粮均高于NRC饲养标准。并且两牛场均发生不同程度的Cu缺乏，牛场Ⅰ奶牛Cu缺乏的主要原因是日粮中Cu缺乏导致，牛场Ⅱ日粮Cu含量达到NRC（2001）饲养标准，但也出现了不同程度Cu缺乏，引起奶牛Cu缺乏的原因可能是由于奶牛从饲料中摄入的Cu含量不足导致的，或者是奶牛机体对Cu的利用率降低所致，也有报道指出，虽然饲料中有足够的Cu，但饲料中同时含有过多的钼和硫时，也会影响Cu的吸收。试验中说明，两个集约化牛场存在不同程度的Cu缺乏，这可能是由于日粮组成、饲养管理的原因导致，应该改善日粮组成，提高饲养管理，从而满足泌乳奶牛的机体需要。

动物机体本身没有贮存锌的能力，因此需要从日粮中采食锌来维持机体的健康与养分平衡[14]。NRC（2001）报道，血浆Zn正常浓度在0.7～1.3 μg·mL-1（10.77～20 μmol·L-1），若低于0.4 μg·mL-1时，则认为Zn缺乏[8]。试验中，两牛场血浆中Zn含量均高于上述血浆Zn的正常值，且饲料中Zn含量能到泌乳奶牛的营养需要，试验表明，两牛场日粮中及泌乳奶牛Zn的水平均能达到要求，并满足泌乳奶牛的生产需要。

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