黄慧 黄传生 刘志良 杨文萍

儿童伯基特淋巴瘤的预后影响因素初步研究

黄慧 黄传生 刘志良 杨文萍

目的探讨儿童伯基特淋巴瘤(BL)临床病理参数和染色体13q14．3缺失与其预后的关系。方法收集33例术后进行化疗的BL患者临床病理资料，采用免疫组化SP法检测bcl-6、MUMl和P53蛋白的表达，荧光原位杂交(FISH)技术检测染色体13q14．3。结果33例BL临床分期:Ⅰ+Ⅱ期12例、Ⅲ+Ⅳ期16例、无法分期5例;随访时间为4～120个月，其中生存27例、死亡6例(均为Ⅲ或Ⅳ期);临床分期为进展期(P=0．024)和低白蛋白血症(P=0．053)者预后相对较差;bcl-6、MUMl和P53阳性率分别为90．9%(30例)、21．2%(7例)、30．3%(10例)，其表达均与预后无关(P＞0．05)。染色体13q14．3缺失8例，与染色体13q14．3正常者相比，生存期无统计学差异(P=0．137)。结论儿童BL的预后与临床分期与血清白蛋白水平有关，染色体13q14．3缺失和其免疫表型与其预后关系还需进一步研究。

伯基特淋巴瘤;免疫组织化学;荧光原位杂交;预后

(The Practical Journal of Cancer，2015，30:1143～1145)

伯基特淋巴瘤(burkitt lymphoma，BL)是儿童最常见的B细胞淋巴瘤［1］，虽然BL的治愈率逐步提高，但仍有少部分患者复发而死亡［2］。影响BL的预后因素较多，本实验收集33例手术后进行化疗的BL患者临床资料，应用免疫组化和荧光原位杂交(FISH)技术，进行bcl-6、MUMl、P53蛋白和染色体13q14．3检测，初步探讨其与预后的关系。

1 资料与方法

1．1 病例来源

收集江西省儿童医院和江西省肿瘤医院2000年-2013年12月根据形态学结合免疫组化和分子遗传学特征进行诊断的33例术后进行化疗的BL患者的临床病理资料，诊断标准参照2008年WHO淋巴造血系统肿瘤分类标准［3］。采用电话或查阅病例形式进行随访，随访截止时间为2014年8月31日。

1．2 免疫组化

免疫组化染色采用SP法，所用一抗bcl-6、MUMl和P53均购自北京中杉金桥有限公司，操作按照说明书进行，当肿瘤阳性细胞＞30%时判断为阳性［4］。

1．3 荧光原位杂交(FISH)

针对染色体13q14．3的D13S319探针购自美国Vysis公司，操作步骤参考文献［2］，结果判读参考文

献［5］。

1．4 统计学方法

应用SPSS 17．0统计学分析软件，率的比较采用χ2检验，生存曲线分析采用Kaplan-Meier法。

2 结果

2．1 临床资料

33例BL中男性27例、女性6例;年龄2～13岁，平均年龄5．8岁;发病部位:腹腔30例、颈部淋巴结2例、睾丸1例;临床分期:Ⅰ+Ⅱ期12例、Ⅲ+Ⅳ期16例、无法分期5例。随访时间为4～120个月，其中生存27例、死亡6例(均为Ⅲ或Ⅳ期，病例4和5瘤体广泛浸润未完整切除且未做骨髓穿刺)。血清白蛋白＜35 g/L 10例，临床分期为进展期(P=0．024)和低白蛋白血症(P=0．053)者预后相对较差(表2)。6例死亡患者的临床资料见表1。

表1 6例死亡患者的临床资料和免疫表型

2．2 免疫组化和FISH结果

33例BL中bcl-6、MUMl和P53阳性表达率分别为90．9%(30例)、21．2%(7例)、30．3%(10例)，其表达均与预后无关(P=0．078、0．093、1．000)。染色体13q14．3缺失8例(其中死亡患者为病例1、2、6)，与染色体13q14．3正常者相比，生存期无统计学意义(P=0．137)(表2)。

表2 临床病理参数和染色体13q14．3缺失与BL预后的关系/例

3 讨论

BL是1种肿瘤细胞倍增时间短的高度恶性淋巴瘤，为了避免患者进一步恶化，在外科手术后需立即进行化疗。BL对化疗非常敏感，是其主要治疗手段，虽然BL的治愈率达到80%～90%，但仍有10%～20%的患儿复发或死亡［2-3］。目前的治疗方案容易使患儿在化疗早期出现急性肿瘤溶解综合征而导致死亡，即使患者度过了危险期，在规律化疗后停药也可出现复发［6］。影响BL预后的临床因素包括乳酸脱氢酶(LDH)血清水平、临床分期和肿瘤直径等［3］。血清白蛋白水平是反应机体营养状况的重要指标之一，低蛋白血症患者对手术或化疗的耐受性下降，感染的几率也增高，因此低蛋白血症肿瘤患者预后相对较差［7］。本组实验患者临床分期为进展期和低蛋白血症患者预后相对较差，与文献报道的一致。

MUM1表达于正常组织中的浆细胞、一小部分发育后期的生发中心细胞和活化的T细胞，在B细胞向浆细胞分化阶段起着重要作用，可以作为生发中心晚期和生发中心后B细胞标记物［8］。BL是起源于生发中心或生发中心后B细胞的侵袭性淋巴瘤［3］，MUM1在BL中阳性率表达的报道不一致，Tumwine等［9］的实验中未发现阳性病例，但Gualco等［10］报道MUM1在儿童和成人BL中的阳性率分别为43%和38%。MUM1作为1种癌基因蛋白，阳性表达者具有更高的侵袭性在多种淋巴瘤中得到证实，如MUM1在3级滤泡性淋巴瘤中阳性率比1～2级明显高，作者推测MUMl阳性滤泡性淋巴瘤特征可能类似于非生发中心

B细胞起源的高度恶性淋巴瘤［11］。在外周T细胞淋巴瘤中MUM1阴性者中位生存期和中位无进展生存期比阳性者长［12］。bcl-6是生发中心B细胞标记物，我们的实验发现MUM1阳性和bcl-6阴性患者预后相对较差，但无统计学差异，其表达意义和机制有待进一步研究。

MDM2-P53-P21WAF1/CIP1信号通路是P53基因通路中的重要通路，P53基因在BL中发生突变可使其促凋亡功能丧失，同时MDM2过表达又可抑制P53蛋白的表达，这些蛋白的异常表达导致BL细胞周期调控紊乱［13］。P53蛋白的表达与弥漫大B细胞淋巴瘤的预后差有关［4，14］，遗憾的是，本组实验未发现P53蛋白表达与BL预后差有关。

染色体13q14．3缺失与预后的关系最先在多发性骨髓瘤和慢性淋巴细胞白血病中发现，之后Nelson等［15］运用FISH方法检测90例BL标本，发现染色体13q缺失率为42%，其中单独染色体13q14．3缺失为14%，染色体13q34缺失率为8%，两者同时缺失率为20%。生存分析显示，染色体13q14．3基因缺失与预后差有关，在死于疾病进展的6例患者中，5例存在染色体13q14．3基因缺失。本组实验8例(24．2%)存在染色体13q14．3缺失，死亡的6例患者中3例存在染色体13q14．3缺失，但与正常者相比，生存期无差异，可能与部分病例随访时间短和样本量较小有关。

我们初步对33例手术后进行化疗的BL患者预后影响因素进行了分析，发现临床分期和血清白蛋白水平是影响患者预后的因素。免疫表型和基因异常与BL的预后有关，在今后的实验中有待进一步发现。

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Study of Prognostic Factors of Burkitt Lymphoma in Children

HUANG Hui，HUANG Chuansheng，LIU Zhiliang，et al．Jiangxi Children＇s Hospital，Nanchang，330006

ObjectiveTo analyze the clinicopathological features and 13q14．3 deletion in burkitt lymphoma(BL)in children and relationship with prognosis．MethodsThe clinicopathological data of 33 patients with BL who received chemotherapy after surgery were retrospectively analyzed．The expression of bcl-6，MUM1 and P53 was detected by immunohistochemistry，and 13q14．3 deletions by fluorescence in situ hybridization(FISH)．ResultsIn 33 cases，12 cases were stageⅠandⅡ，16 cases were stageⅢandⅣ，5 cases were unable to stage．Follow up time was 4～120 months，survival 27 cases，death 6 cases(all in stageⅢandⅣ)．Advanced clinical stage and low serum albumin level were associated with poor diagnosis(P=0．024 and 0．053，respectively)．The positive rates of bcl-6，MUMl and P53 were 90．9%(30 cases)、21．2%(7 cases)、30．3%(10 cases)，and there was no significant correlation with prognosis．13q14．3 deletion were 8 cases，compared with normal cases there had no significant difference in overall survival(P=0．137)．ConclusionClinical stage and serum albumin level are associated with poor diagnosis of BL，its relation with 13q14．3 deletion needs further study．

Burkitt lymphoma;Immunohistochemistry;Fluorescence in situ hybridization;Prognosis(FISH)

10．3969/j．issn．1001-5930．2015．08．011

R733．4

A

1001-5930(2015)08-1143-03

2014-10-16

2015-02-12)

(编辑:吴小红)

江西省卫生厅课题项目(编号:20143177)

330006江西省儿童医院病理科(黄慧，杨文萍); 330029江西省肿瘤医院病理科(黄传生，刘志良)

黄传生