刘晓良

网织红细胞参数在多发性骨髓瘤临床诊断中的应用价值

刘晓良

目的探讨网织红细胞参数在多发性骨髓瘤临床诊断中的应用价值。方法选择80例多发性骨髓瘤患者作为观察组，同期选择80例健康志愿供髓者作为对照组。2组都进行血常规、骨髓象、细胞因子、网织红细胞参数检测。结果观察组的中性粒细胞绝对计数与血小板计数明显低于对照组(P＜0．05)。相对于对照组，观察组的骨髓象细胞大小明显不均匀;核分叶过多、形态异常;染色质粗糙，网状排列;巨核细胞出现淋巴样小巨核、单圆核小巨核、多圆核小巨核。与对照组相比，观察组的血清TNF-α和IL-4值明显较高(P＜0．05)。观察组的RET、RET%、IRF、MFR、HFR值都明显高于对照组(P＜0．05)，而LFR值明显低于对照组(P＜0．05)。结论网织红细胞参数在多发性骨髓瘤临床诊断中的应用可以较早预知骨髓造血功能的变化情况，结合其他方法进行判定对制定治疗方案和临床指导用药具有一定的参考作用。

网织红细胞参数;多发性骨髓瘤;骨髓象;细胞因子;血常规

(The Practical Journal of Cancer，2015，30:1129～1131)

多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是发生在浆细胞的恶性克隆性疾病，其能分泌单克隆免疫球蛋白，并且主要表现为大量克隆性浆细胞的增生和积聚［1-2］。多发性骨髓瘤的发病机制至今尚不清楚，目前研究认为机体免疫调节功能紊乱为其主要发病机制，T细胞功能失衡及其分泌的肿瘤坏死因子-α和干扰素介导的通过Fas途径的正常骨髓细胞过度凋亡占主要地位［3-4］。传统上通常采用中性粒细胞、血小板两者来共同监测骨髓相关疾病，但是由于受者骨髓造血功能重度受抑，当患者血小板显著减少或存在出血的危险时，需要输注血小板来加以防治，常常不能准确反应疾病状况［5］。网织红细胞是晚幼红细胞脱核后到完全成熟之间的过渡细胞，是可以反映骨髓造血功能的一个重要指标［6］。以往检测网织红细胞所用的显微镜目测法进行网织红细胞分群，但精确性较差［7］。随着医学技术的发展，网织红细胞的检测有了更大的发展。中荧光强度网织红细胞百分率(MFR)、网织红细胞百分率(RET%)、网织红细胞绝对值(RGT)、未成熟网

织红细胞比率(IRF)、低荧光强度网织红细胞百分率(LFR)、高荧光强度网织红细胞百分率(HFB)6项参数是近年使用全自动血液分析仪后常规的检测项目，其对临床疾病的诊断、治疗和疗效观察有重要作用［8-9］。本文为此具体探讨了网织红细胞参数在多发性骨髓瘤临床诊断中的应用价值，现报告如下。

1 资料与方法

1．1 研究对象

选择2010年1月至2014年5月经病理确诊为多发性骨髓瘤患者80例作为观察组。纳入标准:诊断均符合《血液病诊断及疗效标准》，且骨髓单个核细胞Coombs试验阴性;全部患者病情为Ⅲ期;均未接受过治疗;年龄20～80岁。80例中男性45例，女性35例;临床分型:IgG型50例，IgA型20例，IgD型10例;临床Durie-Samonf分期:ⅢA 45例，Ⅲ35例;年龄21～79岁，平均年龄(67．44±5．33)岁;临床表现:面色苍白、头晕乏力者45例，发热33例，皮肤出血点及紫斑者34例，牙龈出血、鼻衄者16例。同期选择80例健康志愿供髓者作为对照组，男性46例，女性34例;年龄21～79岁，平均年龄(67．65±5．11)岁。2组的性别、年龄对比差异无统计学意义(P＞0．05)。2组都签署了知情同意书，自身都无合并心、肝、肾等严重疾病。

1．2 血常规分析

2组都选择全自动血液分析仪进行血常规分析，采取静脉EDTA-K2抗凝血2 ml，低温离心分离血清后，应用XE-2100全自动血液分析仪，2 h内检测完成;检测指标包括中性粒细胞绝对计数和血小板计数。

1．3 骨髓象检测

取同样的血液样本进行血涂片，然后进行瑞氏染色，光学显微镜下先在低倍镜下观察有核细胞增生程度，选择涂片均匀染色良好满意的视野进行有核细胞形态学观察。

1．4 细胞因子测定

取同样的血清样本，测定血清TNF-α、IL-4水平;严格根据试剂盒操作说明进行。

1．5 网织红细胞参数测定

取同样的血液样本，应用XE-2100全自动血液分析仪进行检测，网织红细胞参数包括网织红细胞绝对数(RET)、网织红细胞比率(RET%)、高荧光强度网织红细胞比率(HFR)、中荧光强度网织红细胞比率(MFR)、低荧光强度网织红细胞比率(LFR)、未成熟网织红细胞指数(IRF)等，严格按照说明进行操作。

1．6 统计学方法

选择SPSS 18．0软件进行分析，数据采用均数±标准差表示，采用t检验进行组间比较，P＜0．05表明差异具有统计学意义。

2 结果

2．1 血常规检测结果对比

经过检测，观察组的中性粒细胞绝对计数与血小板计数明显低于对照组(P＜0．05)。见表1。

表1 2组血常规检测结果对比(±s)

表1 2组血常规检测结果对比(±s)

组别中性粒细胞绝对计数(×109/L)血小板(×109/L) 0．33±0．112．21±0．67对照组3．23±0．3423．48±5．44 t观察组27．61525．983 P ＜0．05＜0．05

2．2 骨髓象形态对比

经过检测，相对于对照组，观察组的骨髓象细胞大小明显不均匀;核分叶过多、形态异常;染色质粗糙，网状排列;巨核细胞出现淋巴样小巨核、单圆核小巨核、多圆核小巨核。

2．3 细胞因子测定结果对比

经过测定，与对照组相比，观察组的血清TNF-α和IL-4值明显较高(P＜0．05)。见表2。

表2 2组细胞因子测定结果对比(μg/ml，±s)

表2 2组细胞因子测定结果对比(μg/ml，±s)

IL-4观察组组别TNF-α 4．44±2．382．22±0．45对照组1．23±0．671．10±0．34 t 12．7736．493 P ＜0．05＜0．05

2．4 网织红细胞参数值对比

经过检测与计算，观察组的RET、RET%、IRF、MFR、HFR值都明显高于对照组(P＜0．05)，而LFR值明显低于对照组(P＜0．05)。见表3。

3 讨论

多发性骨髓瘤是一种常见的恶性浆细胞疾病，由于各种因素的影响，大部分患者治疗效果均不理想［10］。目前诊断多发性骨髓瘤主要依赖血常规、骨髓细胞形态学、骨髓病理、细胞遗传学和分子遗传学等检查方法，但仍有相当多疑似病例不能确诊，为此有必要寻找更为客观而特异的诊断和鉴别诊断方法［11］。多发性骨髓瘤在常规生化分析中，多表现为中性粒细胞

绝对计数与血小板计数明显降低，但是并非多发性骨髓瘤所特有，容易造成误诊。

在血象分析中，多发性骨髓瘤的病态改变以核形异常为主要表现，包括淋巴样小巨核细胞、多核、小圆核、巨核细胞及大单圆核小巨核细胞等;并且多数涂片粒细胞胞质颗粒稀少或缺如，可出现异带双核型幼稚粒细胞，偶见嗜碱粒细胞增多现象［12］。研究表明T淋巴细胞异常激活及功能亢进在骨髓瘤发病中有重要作用，CD4+T淋巴细胞是体液免疫、细胞免疫及细胞因子调节的中心，骨髓瘤患者也存在外周血Th细胞亚群比例失衡［13］。

基础免疫学研究表明，由于Th2型细胞因子IL-4可以使Th1细胞向Th2方向转化。骨髓瘤的恢复期虽然Th2细胞有所下降，但IL4却依然增高，且此时Th1型细胞因子已显著降低［14］。同时当前研究显示骨髓瘤的发病由于Th1细胞增多、功能亢进及Th2细胞代偿不足，使整个免疫格局向Th1型偏移所致［15］。与对照组相比，本文观察组的血清TNF-α和IL-4值明显较高(P＜0．05)。因此，未知抗原诱发Th0细胞向Th1细胞偏移分化，而Th2细胞代偿不足导致Th1/Th2细胞比例失衡，最终使下游效应因子和效应细胞TNF-α和IL-4显著升高，造成骨髓造血功能衰竭。

网织红细胞的细胞质内含有残存的核糖核酸，经过特殊染色可呈现出特殊的网状结构。用特定的碱性荧光染料与网织红细胞内的RNA结合后，通过流式细胞技术测定网织红细胞的荧光强度，荧光强度越强，说明RNA含量越多，网织红细胞也就越不成熟［16］。根据荧光强度的大小，可以将网织红细胞分为高荧光强度网织红细胞(HFR)、中荧光强度网织红细胞(MFR)、低荧光强度网织红细胞(LFR)等部分。网织红细胞及其参数在判断骨髓造血功能状态、铁代谢状态等中日益成为重要的敏感指标，全自动网织红细胞分析仪不仅改善了传统项目网织红细胞比例、绝对数的实验精密度，而且还能检测未成熟网织红细胞参数，并在此基础上得出未成熟网织红细胞参数［17］。其中用RET%、RET观察贫血的性质是否为增生性;网织红细胞分群的LFR、MFR、HFR可对骨髓造血状况进行分析和监测;IRF是了解骨髓反应状态的指标;MFR、HFR属幼稚型网织红细胞，其比例增高说明骨髓造血功能旺盛，从而能更好地评价骨髓造血功能。本文观察组的RET、RET%、IRF、MFR、HFR值都明显高于对照组(P＜0．05)，而LFR值明显低于对照组(P＜0．05)。表明网织红细胞的这些参数指标可用于多发性骨髓瘤的诊断及疗效观察、放化疗后骨髓抑制及恢复的观察等。

总之，网织红细胞参数在多发性骨髓瘤临床诊断中的应用可以较早预知骨髓造血功能的变化情况，结合其他方法进行判定对制定治疗方案和临床指导用药具有一定的参考作用。

表3 2组网织红细胞参数值对比(±s)

表3 2组网织红细胞参数值对比(±s)

RET/%IRF/%LFR/%MFR/%HFR/%观察组1．62±0．340．09±0．0312．87±5．3388．39±6．091组别RET/(g·L-1) 0．33±3．201．73±0．35对照组1．03±0．440．06±0．023．32±1．3396．63±5．443．18±1．220．44±0．12 t 5．9833．9848．0935．3316．9838．001 P ＜0．05＜0．05＜0．05＜0．05＜0．05＜0．05

［1］李佳，周越，王轩，等．多发性骨髓瘤危险因素及早期诊断指标的研究〔J〕．中国实验诊断学，2013，17 (2):328-330．

［2］Rangaswamy M，Prabhu，Nandini NM，et al．Bone marrow examination in pancytopenia〔J〕．J Indian Med Assoc，2012，110(8):560-562．

［3］赵立铭．网织红细胞及其荧光强度的测定在临床诊疗中的作用〔J〕．现代检验医学杂志，2007，22(5):61-62．

［4］王小钦，林果为．重新认识网织红细胞参数的临床价值〔J〕．中华血液学杂志，2014，35(1):1-3．

［5］Grazziutti ML，Dong L，Miceli MH，et al．Recovery from neutropenia can be predicted by the immature reticulocyte fraction several days before neutrophil recovery in autologous stem cell transplant recipients〔J〕．Bone Marrow Transplant，2006，37(4):403-409．

［6］劳碧松．网织红细胞参数在慢性肾脏病贫血患者中的检测意义〔J〕．中国实验诊断学，2014，18(2):277-278．

［7］张亚军．网织红细胞检测在急、慢性再生障碍性贫血中的分型及诊断意义〔J〕．陕西医学杂志，2014，9(11): 1238-1239．

［8］Pedraza-López M，Ferro-Flores G，Arteaga de Murphy C，et al．Cytotoxic and genotoxic effect of the〔166Dy〕Dy/166Ho-EDTMP in vivo generator system in mice〔J〕．Nucl Med Biol，2004，31(8):1079-1085．［9］谢辉，王敬真，沙琨．网织红细胞参数在多发性骨髓瘤化疗中的临床应用〔J〕．临床医学，2014，34(3):6-7．

［10］Romanenko NA，Bessmel＇tsev SS，Berkos MV，et al．Prognostic value of a number of blood laboratory parameters in the use of erythropoiesis-stimulating agents in anemic patients with lymphoproliferative diseases〔J〕．Ter Arkh，2013，85(8):81-86．

［11］常正义，马迎教，潘云，等．缺氧缺血性脑病新生儿血气和红细胞参数检测的意义〔J〕．江苏医药，2014，40 (2):175-177．

［12］陈瑞芬，黄丽芳，曾厚生，等．网织红细胞参数在恶性肿瘤化疗前后的变化及临床意义〔J〕．国际医药卫生导报，2014，20(8):1145-1147．

［13］Bianchi G，Richardson PG，Anderson KC．Best treatment strategies in high-risk multiple myeloma:navigating a gray area〔J〕．J Clin Oncol，2014，32(20):2125-2132．

［14］梁艳梅．血液网织红细胞的多参数分析在贫血患者临床鉴别诊断中的价值〔J〕．中国实用医刊，2013，40(8):99-100．

［15］Lee MJ，Park SH，Kim MJ，et al．A four-week repeated study of intravenous toxicity of recombinant human interleukin-2 in Sprague-Dawley rats〔J〕．Regul Toxicol Pharmacol，2012，64(2):253-262．

［16］杨平，贾娟，李桂才，等．温度及存放时间对网织红细胞计数的影响及实验室各参数参考值的建立〔J〕．职业与健康，2013，29(11):1335-1337．

［17］魏国庆，顾松琴．网织红细胞参数检测在缺铁性贫血诊断、治疗中的临床应用〔J〕．中国老年学杂志，2013，33 (21):5444-5445．

The Application Value of Reticulocyte Parameters in Clinical Diagnosis of Multiple Myeloma

LIU Xiaoliang．The Center Hospital of Shangluo，Shangluo，726000

ObjectiveTo investigate the application value of reticulocyte parameters in clinical diagnosis of multiple myeloma．Methods80 multiple myeloma patients was the observation group，and 80 healthy patients was the control group．Blood routine，bone marrow，cytokines，reticulocyte parameters of the 2 groups were detected．ResultsThe absolute neutrophil count and platelet count in the observation group were significantly lower than those of the control group(P＜0．05)．Compared with the control group，bone marrow cell size was uneven;nuclear sub leaves was excessive，morphological was abnormal;chromatin coarse mesh arrangement;megakaryocytes appear lymphoid small megakaryocytes，single nuclei small megakaryocytes，multiround nucleus small megakaryocytes in the observation group．Compared with the control group，the serum TNF-α and IL-4 level in the observation group were significantly higher(P＜0．05)．The RET，RET%，IRF，MFR，HFR value in the observation group were significantly higher than those of the control group(P＜0．05)，the LFR value in the observation group was significantly lower than that of the control group(P＜0．05)．ConclusionThe reticulocyte parameters in clinical diagnosis of multiple myeloma can predict early changes in bone marrow function，combined with other methods it has a certain reference for determining clinical treatment and medication guide．

Reticulocyte parameters;Multiple myeloma;Bone marrow;Cytokines;Blood routine

10．3969/j．issn．1001-5930．2015．08．007

R733．3

A

1001-5930(2015)08-1129-03

2014-12-04

2015-07-02)

(编辑:甘艳)

726000陕西省商洛市中心医院