孙逸杰，景戈翰，杨　菁，何书平，仝冬晓，王丽雯，司沛茹，金　璐，程晓丽

1)郑州大学基础医学院医学遗传与细胞生物学系 郑州 450001　2)郑州大学临床医学系 郑州 450052　3)郑州市精神病防治医院精神科 郑州 450005　4)郑州大学附属洛阳中心医院妇产医学部实验室 洛阳 471000　5)郑州大学第三附属医院筛查中心 郑州 450052　6)郑州大学第三附属医院检验科 郑州 450052　7)郑州市第四十七中学生物学教研室 郑州 451150



TFAM基因rs10826178与rs4390300两多态位点与精神分裂症的关系*

孙逸杰1,2)，景戈翰1,2)，杨菁1,2)，何书平3)，仝冬晓4)，王丽雯5)，司沛茹6)，金璐1,7)，程晓丽1)#

1)郑州大学基础医学院医学遗传与细胞生物学系 郑州 4500012)郑州大学临床医学系 郑州 4500523)郑州市精神病防治医院精神科 郑州 4500054)郑州大学附属洛阳中心医院妇产医学部实验室 洛阳 4710005)郑州大学第三附属医院筛查中心 郑州 4500526)郑州大学第三附属医院检验科 郑州 4500527)郑州市第四十七中学生物学教研室 郑州 451150

关键词精神分裂症；多态性；mtDNA；TFAM

摘要目的：探讨线粒体转录因子A(TFAM)基因多态性与精神分裂症的关系。方法：采用PCR-RFLP及DNA序列分析技术分别对237例精神分裂症患者及246例健康对照TFAM 基因rs10826178、rs4390300两多态位点进行检测及分析。结果：rs10826178与rs4390300位点等位基因与基因型频率分布在两组之间比较，差异无统计学意义(P均>0.05)。结论：TFAM基因rs4390300、rs10826178的基因型差异可能与精神分裂症的发病无关。

Relationship of TFAM gene′s two polymorphic loci rs10826178 and rs4390300 with schizophrenia

AbstractAim: To research the relationship between mitochondrial transcription factor A(TFAM) gene′s two polymorphic loci and schizophrenia.Methods: The PCR-RFLP analysis and DNA sequencing technology were used to detect polymorphism of rs10826178 and rs4390300 in 237 cases of schizophrenia(patient group) and 246 healthy subjects(control group).Results: The genotype frequencies and allele frequencies of TFAM gene rs10826178 and rs4390300 in the two groups had no differences(P>0.05).Conclusion: TFAM gene rs10826178 and rs4390300 polymorphisms may not be associated with schizophrenia.

神经系统症状是线粒体功能障碍最常见的临床表现。许多研究[1-5]发现线粒体转录因子A(mitochondrial transcription factor A，TFAM)与神经系统疾病有关。TFAM是由核基因编码的线粒体核心转录调控因子，直接调控线粒体DNA(mitochondrial DNA，mtDNA)所编码的各种成分的转录和复制过程。该研究选取TFAM中的rs10826178、rs4390300两个多态位点进行研究，以期评价其多态性与精神分裂症的关系。

1对象与方法

1.1研究对象病例组237例[男135例，女102例，年龄(31.0±9.5)岁]，选自2009年至2013年郑州市精神病防治医院、洛阳市荣康医院的住院患者。患者纳入标准：汉族；同时符合美国精神障碍诊断与统计手册第4版和中国精神疾病分类与诊断标准第3版诊断标准；本人或家属知情同意。排除合并有人格障碍、精神发育迟滞、脑器质性损伤或其他严重疾患者；排除有乙醇依赖及其他精神活性物质滥用史者。对照组：选取同期健康体检的246例汉族、无血缘关系、无各种精神疾病或其他严重疾患者作为对照[男145例，女101例，年龄(30.0±12.8)岁]，年龄、文化程度等与病例组匹配，知情同意。

1.2DNA提取抽取患者和健康体检者外周静脉血 5 mL 用 EDTA抗凝，采用标准酚-氯仿方法[1]提取基因组DNA，双蒸水溶解，-20 ℃保存备用。

1.3PCR扩增两个位点扩增引物见表1。

1.4限制性内切酶酶切酶切反应体系20 μL：10×Buffer 2 μL，限制性内切酶1 μL，PCR产物8~10 μL，灭菌双蒸水补足；37 ℃恒温箱孵育1~2 h。

1.5琼脂糖凝胶分析用25 g/L琼脂糖凝胶、110 V电压电泳20~40 min；凝胶成像系统分析结果。两个位点对应的限制性内切酶及酶切片段长度见表1。

表1　两个位点引物序列及内切酶

1.6统计学处理应用SHEsis遗传分析软件对对照组人群代表性进行Hardy-Weinberg平衡检验；应用SPSS 17.0进行基因型、等位基因及遗传模型分析，检验水准α=0.05。

2结果

2.1Hardy-Weinberg平衡检验对照组rs4390300和rs10826178位点经Hardy-Weinberg遗传平衡检验，基因型频率分布均达到遗传平衡(χ2=2.409、0.143，

P均>0.05)，即对照人群具有良好的代表性。

2.2多态性分析rs4390300与rs10826178位点3种基因型电泳结果见图1、图2。

图1　rs4390300位点3种基因型电泳图

M:Marker; 1:AA 基因型(127/276 bp); 2:AG基因型(127/276/403 bp); 3:GG基因型(403 bp); 4:PCR产物(403 bp); 5:空白对照。

图2　rs10826178位点3种基因型电泳图

M:Marker;1:AA基因型(103/375 bp); 2:AG基因型(103/375/478 bp);3:GG基因型(478 bp); 4:PCR产物(478 bp); 5:空白对照。

2.3等位基因频率分布结果见表2。

表2　等位基因频率分布　例(%)

2.4基因型频率在不同遗传模式下的分布rs4390300及rs10826178位点在加性、显性及隐性遗传模式下，病例组和对照组基因型频率分布比较，差异无统计学意义(表3)。

表3　不同遗传模式下的基因型频率分布　例(%)

2.5测序结果见图3、图4。

图3　rs4390300测序图

图4　rs10826178测序图

A：AA基因型；B：AG基因型；C：GG基因型。

3讨论

TFAM基因位于10q21，全长约14 000 bp，有7个外显子和6个内含子。TFAM能够通过与mtDNA上特定序列识别结合，促进mtDNA的复制和编码基因的转录。TFAM被证实在mtDNA结构的维护、损伤修复等方面也起重要作用[1-6]。

Taherzadeh-Fard等[7]发现TFAM基因rs4390300、 rs10826178位点对亨廷顿病患者的mtDNA 有一定影响；Belin等[8]发现TFAM基因另两个多态性位点与阿尔茨海默病和帕金森病的发生相关；Hayashi等[9]发现TFAM基因与mtDNA损伤引起的人类老年记忆丧失有关；Shitara等[10]也发现TFAM与脑神经维护、脑神经损伤及修复直接相关。该研究对TFAM基因的rs10826178与rs4390300两个多态位点进行了检测分析，结果发现rs10826178与rs4390300两个多态位点病例组与对照组等位基因频率分布差异无统计学意义；两个多态位点在3种不同遗传模式下病例组与对照组基因型频率分布差异亦无统计学意义。因此初步认为TFAM基因rs10826178与rs4390300两个多态位点与中国汉族人群精神分裂症发病机制无关，与以往报道[11]结果类似。

由于基因表达的组织特异性和人类脑神经系统研究的限制性，目前还不能确定TFAM在高耗能脑神经细胞损伤疾病的发生发展中具体起何作用，相关机制的阐明有待更多、更广泛、更深入的研究。

参考文献

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[11]雷阳，齐中华，牟文松，等.FGF20基因单核苷酸多态性与帕金森病的相关性分析[J].解放军医学杂志，2014，39(2)：129

*国家自然科学基金项目81502333；辽宁省教育厅科学研究一般项目2014418；沈阳市卫生局青年基金项目辽科发[2013]31号;沈阳医

学院青年科学基金项目20132041；沈阳医学院科学研究基金项目20151002

SUNYijie1,2),JINGGehan1,2),YANGJing1,2),HEShuping3),TONGDongxiao4),WANGLiwen5),SIPeiru6),JINLu1,7),CHENGXiaoli1)

1)DepartmentofMedicalGeneticsandCellBiology,CollegeofBasicMedicalSciences,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou4500012)DepartmentofClinicalMedicine,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052

3)DepartmentofPsychiatry,ZhengzhouMentalHealthHospital,Zhengzhou4500054)LaboratoryofGynaecologyandObstetricsMedicine,theAffiliatedLuoyangCentralHospital,ZhengzhouUniversity,Luoyang4710005)ScreeningCenter,theThirdAffiliatedHospital,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052

6)ClinicalLaboratory,theThirdAffiliatedHospital,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou4500527)DepartmentofBiology,No.47MiddleSchoolofZhengzhou,Zhengzhou451150

Key wordsschizophrenia；polymorphism；mtDNA；TFAM

doi：10.13705/j.issn.1671-6825.2015.06.012

中图分类号R749.3

通信作者#，女，1963年4月生，本科，副教授，研究方向：遗传病分子生物学发病机制，E-mail:chengxiaoli@zzu.edu.cn