曲湘勇 蔡 超 何 俊 魏艳红 毛凌峰袁小平 李学成 孙安权

(1.湖南农业大学动物科学技术学院，长沙 410128;2.长沙扬航农业科技有限公司，长沙 410000;3.奥格生物技术(上海)有限公司，上海 201203)

硒(selenium)是动物必需的微量元素，但硒对雌性动物的影响研究较少。蛋鸡缺硒时卵变形，同时产蛋量下降［1］。Brennana 等［2］认为，硒在家禽繁殖性能上的作用与硒源和补硒时间有关。Renema等［3］试验表明，添加硒提高了蛋鸡的产蛋量。潘翠玲［4］研究发现，添加富硒益生菌从第3周开始可显著提高蛋鸡的产蛋率，且富硒益生菌组显著高于亚硒酸钠组。研究报道，硒的富集不仅可以改善动物的健康状况，而且将会提高动物产品(肉、乳和蛋品等)的价值［5］。Surai等［6］研究表明，有可能通过在鹌鹑饲粮中添加酵母硒生产富硒鹌鹑肉和蛋。目前，鹌鹑饲粮中主要以亚硒酸钠作为硒源，但研究表明其存在吸收率低、过氧化作用及潜在的污染等问题［7］，已有国家禁止在动物饲粮中添加亚硒酸钠。酵母硒(selenium yeast，SY)和纳米硒(nano-selenium，nano-Se)是当前开发的优质有机硒源，与无机硒相比，两者活性高、安全低毒，有望取代无机硒［8-9］。纳米硒的吸收率及其在机体中的沉积量优于酵母硒［10］，但两者在鹌鹑生产中的使用及效果比较还未报道。因此，本试验通过在鹌鹑饲粮中添加不同水平酵母硒和纳米硒来探讨二者对鹌鹑产蛋后期生产性能、蛋品质、蛋中硒含量和血清抗氧化指标的影响，为高效硒源研究与应用提供实践依据和科学理论，同时也为鹌鹑安全补硒及生产富硒鹌鹑蛋提供可行性依据。

1 材料与方法

1.1 试验设计和饲养管理

试验于2013年3—4月在长沙杨航农业科技有限公司鹌鹑养殖场进行，将300只300日龄产蛋鹌鹑随机分成5组，每组6个重复，每个重复10羽。A组为对照组，饲喂基础饲粮，B、C组分别在基础饲粮中添加0.2、0.4 mg/kg酵母硒，D、E组分别在基础饲粮中添加0.2、0.4 mg/kg纳米硒。基础饲粮组成及营养水平见表1。

试验鹌鹑分上、中、下3层阶梯笼养，各重复均匀分布于鹌鹑室舍同列各层，鹌鹑室舍温度为20～25℃，相对湿度65% ～75%。日喂2次(08:00、15:00)，乳头式饮水器，自由饮水，采取早晚补光制度，光照时间为16 h/d，控制好舍内温度和相对湿度，并按照鹌鹑养殖场常规程序进行消毒。预试期7 d，正试期42 d。

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %

1.2 试验材料

试验用有机硒源分为酵母硒(商品名称为拉曼硒，有效成分硒含量2‰，由长沙兴嘉生物技术有限公司提供)和纳米硒［商品名称为喜来硒，有效成分硒含量1‰，由投射电子显微镜观察，平均粒径为50～100 nm，由奥格生物技术有限公司(上海)提供］。各试验组(B、C、D、E组)饲粮硒含量经测定分别为0.306、0.503、0.307、0.505 mg/kg。

1.3 测定指标与方法

1.3.1 生产性能

试验期间每日以重复为单位记录产蛋数、蛋重、日采食量，并计算产蛋率、平均蛋重、料蛋比。

1.3.2 蛋品质

试验第42天每组随机选取12枚鹌鹑蛋，每个重复2枚。使用分析天平测定蛋重，游标卡尺测定蛋形指数、蛋黄指数(蛋黄高度/蛋黄直径)，使用Orka Thchnology公司的 Egg Shell Thickness、Egg Analyzer分别测定蛋壳厚度、蛋黄颜色、蛋白高度和哈氏单位等。另从每组中取6枚鹌鹑蛋，在常温下储存30 d后再次测定哈氏单位。

1.3.3 蛋中硒含量

试验第14、28和42天，分别从每组选取12枚鹌鹑蛋，置于4℃冰箱保存，用于测定蛋中硒含量。参照邓士林等［11］的方法，采用流动注射氢化物发生原子吸收光谱法测定蛋中硒含量。

1.3.4 血清抗氧化指标

试验第42天，分别从每组选取12只鹌鹑颈静脉采血5 mL，缓缓注入试管中，倾斜试管，静置30 min后，于3 000 r/min离心10 min，吸取上清液1.0～1.5 mL，注入 1.5 mL离心管中，置于-20℃冰箱保存，用于血清抗氧化指标检测。谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性，总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)含量使用南京建成生物工程研究所试剂盒测定。

1.4 数据统计与分析

试验数据由Excel 2003软件初步处理后，用SASS 9.0软件进行GLM分析和Duncan氏法多重比较。数据以平均值±标准差表示，P＜0.05为差异显著，P＜0.01为差异极显著。

2 结果

2.1 酵母硒和纳米硒对鹌鹑产蛋后期生产性能的影响

由表2可知，与对照组相比，E组显著提高了鹌鹑蛋平均蛋重(P＜0.05)，B、C、D组差异不显著(P＞0.05);C、D组显著提高了产蛋率(P＜0.05)，分别提高了 12.38%、16.07%;B、D 组显著降低了料蛋比(P＜0.05)，分别降低了12.07%、34.36%，而C、E组则没有显著差异(P＞0.05)。

2.2 酵母硒和纳米硒对鹌鹑产蛋后期蛋品质的影响

由表3可知，饲粮添加酵母硒和纳米硒对鹌鹑产蛋后期的蛋形指数、蛋壳厚度和蛋黄指数没有显著影响(P＞0.05)。与对照组相比，C、E组极显著提高了蛋黄色泽(P＜0.01)，分别提高了49.81%、71.25%，2种硒源均极显著提高了哈氏单位(P＜0.01)，分别提高了22.22%、20.61%、25.37%、15.74%。与对照组相比，2种硒源对鹌鹑蛋储藏30 d哈氏单位的影响同样极显著高于对照组(P＜0.01)。

表2 酵母硒和纳米硒对鹌鹑蛋产蛋后期生产性能的影响Table 2 Effects of selenium yeast and nano-selenium on performance of quails during the late laying period

表3 酵母硒和纳米硒对鹌鹑产蛋后期蛋品质的影响Table 3 Effects of selenium yeast and nano-selenium on egg quality of quails during the late laying period

2.3 酵母硒和纳米硒对鹌鹑蛋中硒含量的影响

由表4可知，试验第14天，酵母硒组和纳米硒组鹌鹑蛋中硒含量均极显著高于对照组(P＜0.01)，分别提高了38.06%、49.87%、54.45%、75.20%;相同添加水平的纳米硒组高于酵母硒组。试验第28天，酵母硒组与纳米硒组鹌鹑蛋中硒含量均极显著高于对照组(P＜0.01)，分别提高了65.59%、81.24%、43.11%、81.20%;相同添加水平的纳米硒组高于酵母硒组。试验第42天，酵母硒组与纳米硒组均极显著高于对照组(P＜0.01)，分别提高了55.51%、76.12%、30.45%、58.59%，相同添加水平的纳米硒组高于酵母硒组。

表4 酵母硒和纳米硒对鹌鹑蛋中硒含量的影响Table 4 Effects of selenium yeast and nano-selenium on egg selenium content of quails μg/kg

2.4 酵母硒和纳米硒对鹌鹑血清抗氧化指标的影响

由表5可知，饲粮中添加酵母硒或纳米硒可明显改善鹌鹑血清抗氧化指标，极显著提高了T-AOC及 GSH-Px、T-SOD 活性(P ＜0.01)，极显著降低了MDA含量(P＜0.01)。相同添加水平的酵母硒与纳米硒比较，D组GSH-Px活性极显著高于B组(P＜0.01)，E组极显著高于C组(P＜0.01);T-AOC没有显著差异(P＞0.05);E组TSOD活性极显著高于C组(P＜0.01);D组MDA含量极显著低于B组(P＜0.01)。

表5 酵母硒和纳米硒对鹌鹑血清抗氧化指标的影响Table 5 Effects of selenium yeast and nano-selenium on serum antioxidant indices of quails

3 讨论

3.1 酵母硒和纳米硒对鹌鹑产蛋后期生产性能的影响

Payne 等［12］研究表明，饲粮添加0.15、0.30 mg/kg酵母硒对海兰蛋鸡的生产性能没有影响，对蛋鸡没有毒性。何柳青等［13］试验报道，酵母硒添加水平对绿壳产蛋鸡平均蛋重、产蛋率、料蛋比的作用不显著，且略有下降趋势，但赵慧贤等［14］在蛋鸡饲粮中添加0.2 mg/kg酵母硒有提高蛋鸡产蛋率和降低料蛋比的趋势。曾礼华等［15］针对蛋鸡接种疫苗受应激产蛋量下降的情况，将纳米硒和碘配合使用，添加0.45 mg/kg纳米硒和4 mg/kg碘时，获得最佳产蛋性能。本研究表明，0.2 mg/kg纳米硒组对提高鹌鹑的生产性能表现出良好效果，可显著提高产蛋率与平均蛋重，并降低料蛋比，0.4 mg/kg酵母硒组有提高鹌鹑生产性能的趋势，可显著提高产蛋率。

3.2 酵母硒和纳米硒对鹌鹑产蛋后期蛋品质的影响

本试验结果表明，酵母硒对鹌鹑蛋的蛋形指数没有显著影响，随着纳米硒添加水平提高有降低的趋势。Henrieta 等［16］、何柳青等［17］报道，酵母硒对提高蛋壳厚度并没有显著影响。本试验结果表明，试验组蛋壳厚度与对照组无显著差异，蛋黄色泽随硒的添加水平提高而升高，0.4 mg/kg纳米硒组效果最好。这可能因蛋黄的颜色来源于胡萝卜素，而纳米硒和酵母硒已证明具有良好的抗氧化性［18-19］，可清除动物机体内的多种自由基，使鹌鹑蛋中的胡萝卜素氧化减少，提高了鹌鹑蛋黄色泽、哈氏单位，且储藏30 d后，酵母硒和纳米硒组均能适当保鲜，并随着2种硒源的添加水平提高其效果增加。

3.3 酵母硒和纳米硒对鹌鹑蛋中硒含量的影响

当前，国内外学者对富硒禽蛋的开发主要集中于鸡蛋，已证明鸡蛋蛋中的硒含量可以控制［20］。Nadezda等［21］研究发现，富硒鸡蛋可满足人体50%的硒需求量。Utterback等［22］研究报道，饲粮中添加0.3 mg/kg酵母硒都可显著增加鸡蛋中硒含量。Panye等［12］研究报道，蛋鸡饲粮中添加0.15、0.30、0.60 mg/kg 酵母硒，试验第28 天测得蛋中硒含量分别为 0.366、0.495、0.670 mg/kg。潘翠玲［4］研究报道，在蛋鸡饲粮中添加0.2、0.5、1.0 mg/kg酵母硒或亚硒酸钠，试验第28天时的蛋中硒含量均显著高于试验第7、14和21天时相应硒添加水平组的蛋中硒含量。李静等［23］在蛋鸡饲粮中添加0.50 mg/kg酵母硒，试验第2周蛋中硒含量达到峰值。纳米硒在蛋鸡中应用较少，Zhou等［24］试验发现，肉鸡饲粮中添加0.3 mg/kg的纳米硒可显著提高鸡肉组织中的硒含量，并且可改善鸡肉的肉质。本试验结果表明，试验第14、28、42天，纳米硒提高鹌鹑蛋中的硒含量的作用基本上随着添加水平和时间的增加而增强，纳米硒较酵母硒可稳定增加蛋中硒含量，且高于酵母硒。第42天时，酵母硒下降的原因可能因为产蛋后期的鹌鹑本身机能开始下降，从而影响到硒的吸收。纳米硒对提高鹌鹑蛋中硒含量效果优于酵母硒，可能因它吸收的机制有关。Liao等［25］、Zha等［26］、江龙［27］研究表明，纳米硒具有独特的性能，其与动物机体细胞膜具有更高效的相互作用界面，使黏膜通透性增加，促进动物的吸收。并由于在纳米硒颗粒在肠道中形成了纳米乳剂，可改进肠道对硒的吸收［28］。由于本试验在鹌鹑产蛋后期进行，鹌鹑的生理机能开始下降，没有对比产蛋高峰期时蛋中硒含量，整个鹌鹑产蛋过程中蛋中硒含量的规律还有待深入研究。

3.4 酵母硒和纳米硒对鹌鹑血清抗氧化指标的影响

田金可等［29］报道，饲粮中酵母硒可显著提高肉鸡血清GSH-Px活性。胥保华［30］研究发现，高剂量的纳米硒能显著提高血清GSH-Px活性，增强机体组织清除自由基、脂质过氧化物的能力，使体内自由基水平和MDA含量降低。纳米硒所表现出的抗氧化能力强于酵母硒的机理尽管不是很清楚，但分析认为可能与纳米硒独特的吸收机制、低毒、表面效应大有关。Huang等［19］通过体外试验发现，纳米硒具有直接清除体内自由基的功能，如1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、超氧阴离子、单线态氧和一氧化氮(NO)，还可使DNA免于氧化。而Wang等［31］试验报道，纳米硒可提高大鼠GSH-Px和硫氧还蛋白还原酶(TrxR)活性，且毒性低于硒代蛋氨酸，可作为抗氧化剂使用。本试验结果表明，饲粮中添加纳米硒或酵母硒可改善鹌鹑产蛋后期的抗氧化功能，促进机体抗氧化酶促体系的发生，且纳米硒的抗氧化效果优于酵母硒。

4 结论

①饲粮中添加0.2～0.4 mg/kg纳米硒或酵母硒可显著提高鹌鹑产蛋后期产蛋性能。饲粮中添加酵母硒或纳米硒对鹌鹑蛋品质影响不大，但两者皆极显著提高了鹌鹑蛋哈氏单位，并可增加鹌鹑蛋储存时间。

②饲粮中添加酵母硒或纳米硒可极显著提高鹌鹑蛋中硒含量，并随着添加水平和时间的增加而增强，纳米硒较酵母硒可稳定增加蛋中硒含量，且高于酵母硒。

③饲粮中添加纳米硒或酵母硒可显著改善鹌鹑产蛋后期的抗氧化功能，纳米硒的抗氧化效果优于酵母硒。

④为保证产蛋后期鹌鹑蛋的优质高效生产，建议饲粮中添加0.2 mg/kg的纳米硒为宜。

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