刘胜林

(天津市西青医院检验科，天津 300380)

同型半胱氨酸(Hcy)又称高半胱氨酸(HHcy)，由Vincent du Vigneaud于1931年首次从膀胱结石中分离出来，是一种含硫氨基酸。它不属于组成蛋白质的20种氨基酸，本身不参与蛋白质合成，也没有特异的3个DNA碱基对其进行编码，在体内不能合成，它是由蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中产生的重要中间产物，只能来源于蛋氨酸的分解代谢。1969年Mc Cuny首次提出高水平的同型半胱氨酸浓度是引起血管病变的原因[1]，从此逐渐引起研究者注意。近年研究发现，心脑血管疾病患者血浆Hcy水平明显增高，并且与病变程度及远期预后、生存率、病死率有关[2-5]。本次研究旨在应用全自动生化分析仪(循环酶法)对各种心脑血管疾病患者和健康对照组进行血浆Hcy浓度测定，然后就检测结果进行统计学处理，从而探讨在基层医院实验室应用循环酶法测定血浆Hcy作为心脑血管疾病发生独立危险因素的临床应用价值。

1 材料与方法

1.1研究对象 健康对照组为天津市西青医院2011年6月-2013年6月门诊健康查体者100例，男女各50例，年龄35～60岁，近期未服用任何药物，且未患有影响血浆Hcy结果的疾病。心脑血管疾病组为同期本院收治的住院患者100例，近期未服用任何药物，且未患有影响血浆Hcy结果的其它疾病，年龄40～60岁，其中男60例，女40例，均经临床与心电图及CT确诊。心脑血管疾病和健康体检两组在年龄、性别等方面差异无统计学意义。

1.2原理 利用小分子捕获技术(SMT)的S-腺苷Hcy(SAH)水解酶的方法[7]。在三-乙-羧乙基膦(TCEP)作用下，氧化型Hcy被转化为游离型Hcy，后者通过与共价底物S-腺苷甲硫氨酸反应，生成蛋氨酸和SAH。SAH被SAH水解酶水解成腺苷和Hcy，Hcy经循环反应放大信号，同时产生腺苷，腺苷立即水解成氨和次黄嘌呤，氨在谷氨酸脱氢酶的作用下使NADH转化为NAD，样本中的Hcy含量与NADH转化速率呈正比。

1.3研究方法 清晨抽取空腹静脉血3 ml，置于密闭干燥管中，1 h内常规离心分离血清待检。采用Hcy循环酶法检测试剂盒。在全自动生化分析仪上进行检测，具体操作严格按说明书进行。

1.4仪器和试剂 采用西门子ADVIA-1800全自动生化分析仪测定。同型半胱氨酸试剂盒和胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)的检测试剂盒均购自上海科华诊断有限公司。具体检测过程严格按照试剂说明书进行。

1.5Hcy正常值范围 通常认为成人空腹血清总Hcy水平正常值为0～15 μmol/L，理想值<10 μmol/L，高于15 μmol/L被认为是高同型半胱氨酸血症。

2 结 果

2.1两组血浆Hcy水平及高Hcy血症的比较 心脑血管疾病组血浆Hcy为(27.80±15.14)μmol/L，对照组为(12.10±4.41)μmol/L，前者血浆Hcy水平明显高于后者，二者比较差异有统计学意义(P<0.01)。心脑血管疾病组高Hcy血症的发生率是83%，也高于对照组的24%，差异具有统汁学意义(P<0.01)。见表1。

2.2两组人群其它有关生化指标比较 心脑血管疾病组与对照组相比TC、TG、LDL增高，HDL下降，均有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表1 两组血浆Hcy水平及高Hcy率的比较

表2 两组人群其它有关生化指标比较(mmom/L)

3 讨 论

众所周知，心脑血管疾病和肿瘤一样，是目前我国发病率及死亡率比较高的疾病。对临床实验室而言， Hcy测定过去曾用氨基酸分析仪测定，比较复杂且不稳定。目前主要应用高压液相色谱技术(HPLC)法、荧光偏振法等[6-7]。近几年出现的新方法——循环酶法[6]，具有快速、准确、方便的优点，经实验证实其结果与高效液相色谱法一致性良好，是基层医院实验室检测血Hcy比较好的方法[6,8-10]。而且由于循环酶法可利用现有设备检测，试剂相对较为经济，是推广Hcy的最佳检测方法。

本次实验结果显示，心脑血管疾病组血浆Hcy水平明显高于对照组(P<0.01)，而且心脑血管疾病患者中高Hcy血症发生概率也远远大于健康体检者(P<0.01)。这表明心脑血管疾病患者血浆Hcy水平及高Hcy血症发生率与健康人群相比有明显差别。而其它生化检测表明，心脑血管疾病患者TC、TG、LDL水平升高，HDL水平下降，说明血脂水平，对心脑血管疾病的发生也具有一定的影响，是疾病发生的危险因素，但是有相当一部分患者血脂水平在正常参考范围内，只有Hcy水平不同程度异常，说明Hcy是心脑血管疾病重要临床指标之一，也可能是心脑血管疾病发生独立危险因素。

多种原因可使Hcy升高：(1)基因多态性：MTHFR基因突变最常见为C667T点突变，CBS基因突变以位于287密码子的844ins68bp和位于307密码子的C919A最常见，结果导致MTHFR和CBS活性减低，产生高同型半胱氨酸血症。(2)疾病与药物：肾功能衰竭、甲状腺功能减退、严重贫血、严重硬皮病、恶性肿瘤等疾病以及应用氨甲喋呤、一氧化氮、抗癫药、利尿药等可致Hcy水平升高。⑶营养因素及饮食习惯：Hcy代谢过程所需的辅因子叶酸、维生素B6、维生素B12缺乏可能影响酶的活性及Hcy的代谢转化。例如饮酒、吸烟、大量饮用咖啡可影响维生素及叶酸吸收，也会引起Hcy浓度升高。⑷性别与年龄：研究发现Hcy随年龄增长而升高，且男性高于女性，女性绝经后高于绝经前。考虑Hcy与雌激素水平变化有关。

临床研究及大规模流行病学调查表明，血浆Hcy水平升高是动脉硬化，动、静脉血栓等疾病重要的独立的危险因素。Uland等[11]对1800例患者的研究表明高Hcy血症与心血管疾病密切相关，早期心血管疾病患者血浆Hcy比健康对照组高30%左右，且增高的程度与血管损伤程度呈正相关。高Hcy组与健康对照组相比，患冠心病的危险性增加23倍。5年后高Hcy组与健康对照组相比急性心肌梗死的危险性增加3倍。另有报道[12]：血浆Hcy水平与脑血管病密切相关，脑卒中患者Hcy水平明显高于健康对照组。一项涉及1200例患者和1200例健康对照组流行病学资料显示[13]，轻中度高Hcy血症可明显增加脑血管病发生的危险性。卢玉振等[14]对50例脑梗死和50例冠心病患者Hcy的研究结果表明，冠状动脉疾病死亡率与患者血浆Hcy水平呈正相关。有资料表明，冠心病患者中血浆Hcy>15 μmol/L时4年随访中死亡率为24.7%，而血浆Hcy<9 μmol/L时死亡率为3.8%；还有报道指出，血浆Hcy每升高4 μmol/L，心肌梗死相对危险性增加1.41倍，血浆Hcy水平每升高5 μmol/L，相当于胆固醇升高5005 μmol/L。以上这些研究表明与血脂(胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白等)等危险因素相比，高同型半胱氨酸对心血管病的危险性要高。由本实验结果可知高血浆Hcy与心脑血管病的发生有一定的关系，与以上不同研究的结果较为一致，可以证明检测Hcy水平对心脑血管疾病的诊断、疗效观察和预后判定具有重要意义，是心脑血管疾病发生的危险因素之一。

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