王 波 白生慧

（云南省晋宁县动物检疫和疫病预防控制中心，云南晋宁 650600）

不同稀释液对公猪受精能力的影响

王 波 白生慧

（云南省晋宁县动物检疫和疫病预防控制中心，云南晋宁 650600）

本试验选用BTS、商品BTS、MODENA1和MODENA2四种不同的稀释液，各对5头杜洛克种公猪的精液进行稀释，置17℃精液保存箱中保存，并每天观察精子活力变化。然后利用在17℃精液保存箱中保存24h左右的精液进行人工授精。结果表明：四种不同稀释液所稀释保存的精液，精子活力无明显变化的保存时间，MODENA1O为110.8±12.9h，MODENA2为101.2±14.62h，BTS为99.6±9.21h，商品BTS为90.8±8.05h，四者相互比较，差异不显著（P＞0.05）。而有效保存时间，即精子活力不低于0.7的保存时间，MODENA1为154.2±7.14h，MODENA2为153.6±6.28h，BTS为119.8±2.80h，商品BTS为108.2±4.96h。MODENA1与MODENA2比较，差异不显著（P＞0.05），与BTS、商品BTS相比，差异极显著（P＜0.01）；MODENA2与BTS、商品BTS相比，差异极显著（P＜0.01）；BTS与商品BTS相比，差异不显著（P＞0.05）。在输精后24天内观察不返情率，MODENA1为96.67%（29/30），MODENA2为96.67%（29/30），BTS为97.22%（35/36），商品BTS为94.12%（32/34），四者相互比较，差异不显著（P＞0.05）。

猪精液稀释液；人工授精；不返情率

1 前言

随着养猪业的集约化、工厂化程度的提高，猪人工授精技术的经济效益已被我国养猪界所共识。猪人工授精技术越来越受到重视，应用越来越广泛。与自然交配相比，猪人工授精具有提高优秀公猪利用率、减少疾病传播、提高商品猪整齐度、减少饲养公猪数量、节省开支、克服公母猪体格大小相差悬殊时造成的本交困难等优点。为了进一步阐明人工授精技术的优越性，张守全等对人工授精与自然交配的受胎率和产仔数进行统计分析，发现它们之间差异不显著[3]。因此可以说，用人工授精代替自然交配，对生产不会造成影响。但是，人工授精对技术要求比较高，所以，在推广人工授精时应对人工授精技术员进行技术培训，使其掌握一整套成熟的人工授精技术，为提高受胎率提供技术保障。然而，进行人工授精的前提条件是必须有稀释效果、保存效果和输精效果俱佳的液。在当前，猪精液稀释液配方有很多，使用效果也很不一样。为了提高猪精液稀释、保存效果，本试验通过MODENA1、MODENA2、BTS和商品BTS四种不同稀释液对杜洛克公猪精液稀释效果、保存效果以及输精效果进行观察、比较，从而为猪场选择猪精液稀释液提供一种参考，为更好了推广人工授精技术提供依据。

表1 用于液态保存猪精液的稀释液的成分 单位：克/升

2 材料与方法

2.1 试验材料

2.1.1 试验动物：杜洛克公猪、大长母猪、长大母猪。

2.1.2 人工授精所需主要仪器、工具：显微镜、监视器、密度仪、恒温水浴箱、17℃精液保存箱、干燥箱、恒温板、保温杯、电子天平、一次性食品袋、输精瓶、输精管、纱布等。

2.1.3 猪精液稀释液：MODENA1、MODENA2、BTS和商品BTS稀释液（前本三种自配，后一种由供应商提供），其具体成分及含量详见表1。

2.2 试验方法

2.2.1 精液的采集、处理以及精子活力测定

按要求做好采精前准备，用手握法采精，对采到的精液用刻度仪测定精子密度，称其重量并换算成体积，每克按1毫升计[2]。并对精子进行精子活力观察，活力达0.7以上、畸形率在18%以下可以进行稀释，稀释剂要提前1h溶于水，以便使用时其PH值较恒定[2]，稀释位数的确定按每毫升约0.5亿个有效精子计，稀释液与精液要求等温稀释，两者温差不超过1℃，稀释后要求静置片刻再作精子活力检查，活力无明显变化进行分装。分装后置22～25℃室温1h后再置于17℃精液保存箱中保存[3]。以后每天上午、下午各检查一次，检查前先将精液摇匀，然后取一滴于载玻片上，盖上盖玻片，并放至37℃恒温板上预热，然后镜检观察精子活力变化。

2.2.2 人工授精

根据母猪的年龄、发情开始时间和持续时间、外观变化等方面确定适时输精。一个发情期输精3次。一般是上午出现站立反应，下午进行第一次输精，或者是下午出现站立反应而在第二天上午进行第一次输精[1]，采用上午、下午、上午或者下午、上午、下午三次输精方式。对于后备母猪来说，在初情期的第一个发情期不要进行配种输精，在第二或第三个发情期再配种输精，因为这样可提高排卵数和平均窝产仔数。据统计，第二个发情期时才配种比第一个发情期配种，平均窝产仔数要多2头左右[5]。人工授精的具体做法是：（1）在输精前对保存24h左右的猪精液进行活力检查，活力达0.7以上者才能用于输精，据调查，使用2头或2头以上不同公猪的精液混合保存，将有利于提高窝首创数和受胎率[7]。（2）输精时，将母猪移至配种栏，并反公猪赶到配种栏前面，用于刺激母猪，一头公猪一般同时面对4～5头母猪，再多的话，则刺激就会变得淡薄了[6]。（3）用干净清水冲洗母猪外阴及尾根周围，用干毛巾擦干。（4）从密封袋中取出无污染的一次性输精管，在其前端涂上润滑油，将输精管45°角向上插入母猪生殖道内，顺时针方向旋转，当感觉有阻力时，继续缓慢旋转，同时前后移动，直至感觉输精管前端被锁定。（5）将输精瓶接到输精管上开始输精，在输精时进行压背刺激母猪，提高输精瓶，让精液依靠子宫收缩产生负压，吸纳至母猪子宫内。（6）输精时间要求3～5min。输完一头母猪后，把输精管后端一小段折起，放进输精瓶中，防止空气进入和精液倒流，让输精管自由滑落。

3 试验结果与分析

3.1 四种不同稀释液对公猪精液保存效果比较

经统计结果表明，用四种不同稀释液保存杜洛克公猪精液，精子活力无明显变化的保存时间，四者相互比较，差异均不显著（P＞0.05），而有效保存时间，即精子活力不低于0.7的保存时间，MODENA1与MODENA2相比，差异不显著（P＞0.05），与BTS、商品BTS相比，差异极显著（P＜0.01）；MODENA2与BTS、商品BTS相比，差异极显著（P＜0.01）；BTS与商品BTS相比，差异不显著（P＞0.05）。详见表2。

表2 四种不同稀释液对公猪精液保存效果比较 单位：h

从表2中可以看出，在精子活力无明显变化时，尽管四者相比无显著差异，但MODENA1的保存时间是最长的，而且在有效保存时间中，MODENA1和 MODENA2尽管无显著差异，但MODENA1的保存时间的绝对值是最大的，因此，只从稀释效果、保存效果来说，MODENA1是较为理想的一种稀释液。

3.2 四种不同稀释液输精效果比较

经统计结果表明，用四种不同的稀释液进行人工授精，在24d内观察不返情率，四者相互比较，差异不显著（P＞0.05）。详见表3。

表3 四种不同稀释液输精效果比较

从表3中可以看出，四种不同稀释液在保存24h左右后进行输精，其24d内的不返情率没有显著差异（P＞0.05）。说明它们在输精效果上无本质差异。

4 讨论与结论

4.1 四种不同稀释液保存效果、输精效果的比较

从表3中可以看出，四种不同稀释液保存的精液在输精24d内，母猪不返情率之间差异不显著。因而可以说，它们的输精效果无本质差异。而从表2中可以看出，MODENA1是有效保存时间最长的一种稀释液，MODENA1和MODENA2各保存的5头公猪精液，有效保存时间都在5天以上，BTS和商品BTS各保存5头公猪精液也都在4d以上，这与Donald G.Levis用MODENA1和BTS在同温下保存公猪精液的结果有所不同。用MODENA1保存A、B两头公猪精液，虽然保存结果相似，但有效保存时间不到3d[4]。这与本试验结果有较大差异；而用BTS保存A、B两头公猪精液，保存公猪A的效果明显不如公猪B，表现出明显的公猪精液对稀释液的选择性[4]，这也与本试验结果有较明显差异。造成这种差异的具体原因还待进一步做试验来考证。

4.2 四种不同稀释液的选择性比较

从表2及表3中可以看出，由于四种步同稀释液在输精效果上无明显差异，因此，从保存效果考虑的话，MODENA1与MODENA2是较好的。但我们从表1的配方中也可以看出，出于MODENA2的无水葡萄糖含量较高，而保存时间的绝对值也无MODENA1大，因此，一般可以不选择MODENA2。对于MODENA1，由于其含有Tris这种生化试剂，从而大大提高了成本，是BTS和商品BTS的2倍左右，而且，从试验过程中也发现了一个不容忽视的问题，那就是MODENA1和MODENA2不能把各成分提前混合，若提前混合，在1～2d的时间内就会发生化学反应而变质，出现凝块，并产生粉红色物质。而BTS和商品BTS即使各成分混合较长时间也无明显变化。因此，在实际生产中，使用MODENA1、MODENA2不如使用BTS、商品BTS方便，尽管后者的保存效果不如前者，但是，如果猪精液稀释后保存时间要求不长的话，使用BTS和商品BTS可以大大降低成本，提高经济效益。

[1] 王祖昆.猪场人工授精技术综述（二）[J].广东养猪业，1999，（6）：34-37.

[2] 张守全.工厂化猪场人工授精技术的应用[J].辽宁畜牧兽医，1999，（12）：5-6.

[3] 张守全.人工授精与本交对引进品种母猪繁殖表现的影响[J].养猪，1999，（4）：14-15.