浙薯13脱毒快繁及移栽技术

2014-02-06赖小芳唐兴国何玲玲王伯诚

浙江农业科学 2014年6期

关键词：种薯蔗糖试管

赖小芳，唐兴国，何玲玲，王伯诚

（浙江省台州市农业科学研究院，浙江临海 317000）

浙薯13脱毒快繁及移栽技术

赖小芳，唐兴国，何玲玲，王伯诚

（浙江省台州市农业科学研究院，浙江临海 317000）

将浙薯13种薯高温催芽后，取茎尖在MS+6-BA 0.05 mg·L-1+NAA 0.02 mg·L-1培养基上分化出芽，经相同培养基继代培养和1/2MS+NAA 0.02 mg·L-1+0.3%AC培养基的生根培养，可快速繁育出大量试管苗。试管苗可直接移到整理好的苗床里，也可先移到格盘里假植一段时间，待完全成活后再移栽到苗床里，2种移栽方法成活率都达95%以上。

浙薯13；脱毒；组培快繁；移栽技术

浙薯13是浙江省农业科学院作核研究所选育的高产高淀粉加工型甘薯新品种，具有食用、淀粉加工和薯脯加工三大用途，属国内首创［1］。台州市于1999年开始引入试种，现有种植面积约4 030 hm2，占全市甘薯总面积的30.1%，居各品种种植面积的第1位。但是经多年连续无性繁殖后，由于多种病原物的反复侵染并在植株体内积累，导致其产量下降，品质变劣，明显出现种质退化现象，严重影响产量和经济效益的提高。为此，作者采用种薯高温催芽与茎尖分生组织培养相结合的方法达到脱毒及快速繁殖的目的。

1 材料与方法

1.1 材料

参试材料为浙薯13健康种薯。

设备仪器有高压灭菌锅，光温培养箱，超净工作台，栽培幼苗的塑料格盘。

药剂有50%多菌灵可湿性粉剂，HgC12，MS及1/2MS培养基，6-BA，NAA，蔗糖，琼脂粉，醋酸（AC），净纯水，金色3号育苗基质，珍珠岩。

1.2 方法

浙薯13健康种薯，用50%多菌灵800倍液浸种消毒10 m in后，放进经高压灭菌锅消毒过的沙子里，事先控制好沙子的湿度，用尼龙薄膜盖好后将沙盆放进光温培养箱，培养温度为39.1℃，光照强度为2 500～3 000 lx，培养16 d后，薯块发芽，可进行外植体接种。取下经过高温脱毒的薯块上的小芽，用纯净水洗去表面的沙土，吸干水分，置于超净工作台上备用。用0.1%的HgC12浸泡8 min，无菌水冲洗4次。将茎尖置于解剖镜下，轻轻剥去叶片，切取长0.3～0.5 mm的茎尖分生组织，接种到MS+6-BA 0.05 mg·L-1+NAA 0.02 mg·L-1培养基上培养茎尖成苗。小苗经过检测，确定为无毒苗后，进入快繁试验阶段。各试验的培养室温度为（23±2）℃，光照强度为2 000 lx，光照时间为10 h·d-1。

1.2.1 植物生长调节剂配比试验

在MS+NAA 0.02 mg·L-1培养基的基础上，分别添加6-BA 0，0.05，0.1，0.5，1.0，1.5，3.0 mg·L-1［2］，共7个处理。添加蔗糖30 g· L-1、琼脂粉5 g·L-1，pH值5.8。当芽苗长到5～6 cm高时，以每茎节为1段进行剪切，接到各试验的培养基上进行培养，每个处理接种10瓶，每瓶接种3株，重复3次。30 d后测量株高、叶片数、根数与根长等。

1.2.2 蔗糖浓度试验

在增殖培养基中添加蔗糖浓度为15，30，45，60，75，90 g·L-1，共6个处理，接种25 d后观察其生长情况。

1.2.3 生根培养基试验

在1/2MS培养基上分别添加NAA浓度为0.02，0.05，0.1，0.5，1.0 mg·L-1，且每个处理添加0.3%AC，以不添加植物生长调节剂为对照，共6个处理。25 d后测量株高、单株叶片数、单株根数和根长。

1.2.4 试管苗定植试验

将经过炼苗的脱毒苗移到事先准备好的防虫网里育苗。设计2种移栽方法，一种是将脱毒苗直接移到整理好的苗床里，另一种是先移到塑料格盘里假植40 d，待完全成活后再移栽到苗床。格盘苗移栽基质为金色3号育苗基质与珍珠岩按体积1∶1的混合基质［3］。

2 结果与分析

2.1 植物生长调节剂配比的影响

从表1可以看出，随着6-BA浓度的增高，培养苗生长逐渐缓慢，在1.0 g·L-1浓度时，叶片开始发黄，根部出现愈伤组织；当浓度增到1.5 g· L-1时，原有叶片枯黄，根部愈伤组织增大；当浓度增到3.0 g·L-1时，叶片枯萎，整个植株只长愈伤组织，有的甚至死亡。0.05 g·L-1浓度的处理比较适宜继代培养，该处理的试管苗植株健壮，叶色浓绿，生长快，培养30 d时平均展开叶片数多，茎粗壮。以后以每茎节为1段进行剪切，放入相同的增殖培养基上进行培养，不断重复此过程，增殖系数可达到6.5。

2.2 蔗糖浓度的影响

表2结果表明，在添加蔗糖15～75 g·L-1内，蔗糖浓度越高，薯苗生长越好，添加75 g·L-1的处理薯苗表现植株健壮，生长快，增殖系数高，添加90 g·L-1的处理比添加75 g·L-1的生长略差。说明浙薯13试管苗适合在较高浓度的蔗糖环境里生长。