许丽华 车小群 庞小艳 陈 碧

广东医学院附属医院生殖中心，广东湛江 524000

辅助生殖技术超促排卵中血清促黄体生成素对胚胎移植中妊娠结局的影响

许丽华 车小群 庞小艳 陈 碧

广东医学院附属医院生殖中心，广东湛江 524000

目的 探讨超促排卵中血清促黄体生成素（LH）对胚胎移植的影响。 方法 回顾性分析2013年1月～2014年1月在本中心进行体外受精/单精子注射（IVF/ICSI）118个新鲜周期的患者临床资料，将患者注射绒毛膜促性腺激素（HCG）日测定结果分为A组（LH≥0.5 U/L，75例）和B组（LH<0.5 U/L，43例）。对两组患者的重组人促卵泡激素（rhFSH）用药量、受精率、临床妊娠率、临床流产率进行比较。 结果 A组Gn用药量[（26.89±4.35）支]明显少于 B 组[（30.67±7.68）支]，两组差异有统计学意义（P<0.05）。 A 组的受精率（84.0%）与 B 组（82.7%）比较，差异无统计学意义（P>0.05）。A组的临床妊娠率（54.7%）与B组（53.5%）比较，差异无统计学意义（P>0.05）。A组的临床流产率（6.7%）明显低于B组（11.6%），两组差异有统计学意义（P<0.05）。 结论 在超促排卵中血清LH<0.5 U/L时，rhFSH用药量增加，临床流产率增加，对受精率和临床妊娠率无影响。

促黄体生成素；受精；胚胎移植；临床妊娠率

促黄体生成素（LH）是由垂体产生的一种激素，排卵前的峰值在卵母细胞最终成熟和排卵中起标志性作用，是辅助生殖技术临床决策的重要依据，在女性中有刺激卵巢分泌女性雌激素的作用[1]。LH的产生受下丘脑促性腺释放激素的控制，同时受卵巢的正、负反馈调控。在月经周期LH的释放高峰与卵巢排卵有密切关系，LH高峰一经出现，预示24～36 h卵巢排卵，因此可以在月经周期中监测血清LH峰值，以确定最佳受孕时间[2]。由于早期卵泡颗粒细胞缺乏LH受体表达，因此在早期卵泡LH主要作用于膜细胞，合体雄激素；颗粒细胞则在FSH作用下将雄激素转换成雌激素。在卵泡持续生长过程中，颗粒细胞也会逐渐表达LH受体，此时LH主要是刺激颗粒细胞局部产生各种因子，从而促进颗粒细胞的生长。本研究回顾性分析118例患者的临床资料，以探究卵泡中期内源性LH对胚胎移植中卵巢反应和妊娠结局的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2013年1月～2014年1月在本中心进行体外受精/单精子注射（IVF/ICSI）的 118例患者，年龄24～40 岁，平均（34.45±1.50）岁，不育年限 3～8 年。 将患者按照注射绒毛膜促性腺激素（HCG）日测定结果分为A组和B组，其中A组75例患者，平均年龄（30.3±4.3）岁，LH≥0.5 U/L；B 组 43 例患者，平均年龄（30.2±3.2）岁，LH<0.5 U/L。118例患者符合以下条件：年龄＜40岁，月经周期正常，不孕原因：输卵管因素、子宫内膜异位症、男方因素，采用黄体期长方案。两组患者的一般资料差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

所有患者的超促排卵均采用促性腺激素释放激素激动剂（GnRH-a）长方案，经B超或血清孕酮水平证实已排卵，于黄体中期注射醋酸曲普瑞林[进口药品注册证号：H20100365；规格：0.1mg/支，生产厂家：辉凌（德国）制药有限公司]0.05～0.1 mg，降调节后14 d检查，达到垂头完全降调节（卵泡直径达≤5 mm；子宫内膜≤5 mm；血 E2<50 ng/L、FSH<5 U/L、LH<5 U/L），采用 rhFSH（瑞士 Serono）促排卵，启动剂 150～225 U/L，依据患者的年龄、基础FSH、窦卵泡数个体化。于刺激第7天B超测定卵泡直径并检测血清LH、E2水平，必要时调整rhFSH的剂量。患者卵泡有1个直径达19 mm或者是有2个直径>18 mm时，停止注射醋酸曲普瑞林或rhFSH，予以4000～10 000 IU的hCG注射，取卵、受精、胚胎移植、黄体期的支持按本中心的常规进行。移植后2周检测尿和血hCG，4周行B超，见到孕囊和原始心管搏动为临床妊娠。

1.3 观察指标

对两组患者的rhFSH用药量、受精率、临床妊娠率、临床流产率进行比较。临床妊娠率=临床妊娠总数/移植周期数×100%；流产率=流产数/妊娠数×100%。

1.4 统计学处理

所得数据采用SPSS 17.0软件进行统计分析，计量资料用±s表示，采用t检验，计数资料用检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

A组的受精率与B组的受精率差异无统计学意义（P>0.05）；A组的Gn用药量明显少于B组两组差异有统计学意义 （P<0.05）；A组的临床妊娠率明显高于B组，两组差异无统计学意义（P>0.05）；A组的临床流产率明显低于B组，两组差异有统计学意义（P<0.05）（表 1）。

表1 两组患者一般资料和临床情况的比较

3 讨论

目前，大量研究已表明，LH对卵泡发育成熟的完成和卵母细胞发育潜力的获得有重要作用[3]。FSH和LH是调控生理状态下卵泡发育过程中的主要因素。由垂体前叶所分泌的两种促性腺激素FSH和LH分别作用于卵巢卵泡颗粒细胞受体和卵泡膜细胞受体而发挥其生理效应，调控正常卵泡的发育和卵巢类固醇激素的合成，LH是由垂体产生的一种激素，排卵前的峰值在卵母细胞最终成熟和排卵中起标志性作用，是辅助生殖技术临床决策的重要依据，在女性中有刺激卵巢分泌女性雌激素的作用。天然LH在垂体前叶合成，以高于FSH的幅度脉冲式释放[4]。尽管单FSH就可维持卵泡发育，但仍需小剂量LH存在才能获得足够量的类固醇激素生成维持排卵前乃至转化成黄体[5]。卵泡期血中LH的作用主要是为雌激素的合成提供底物雄烯二酮，在卵泡发育的中、晚期LH还刺激主导卵泡颗粒细胞上的孕激素受体的表达，能够促进黄素化和孕激素的产生，以减缓颗粒细胞的增殖，同时孕激素还有增强雄激素的正反馈作用，促进在月经周期LH峰值的形成。LH与卵巢膜细胞上特异性膜受体结合，LH结合的结果是包括腺嘌呤核苷酸环化酶和cAMP的生化途径类固醇合成增加，其作用为刺激膜细胞产生雄激素，触发排卵并支持黄体。LH受体亦可在卵泡发育最后阶段有FSH刺激的颗粒细胞中表达。随着LH分泌的增多，卵泡在其作用下逐渐发育、成熟、雌激素的分泌逐日增多[6]。LH对卵泡发育和卵母细胞质量有重要作用，由于早期卵泡颗粒细胞缺乏LH受体表达，因此在早期卵泡LH主要作用于膜细胞，合体雄激素；颗粒细胞则在FSH作用下将雄激素转换成雌激素。在卵泡持续生长过程中，颗粒细胞也会逐渐表达LH受体，此时LH主要是刺激颗粒细胞局部产生各种因子，从而促进颗粒细胞的生长[7]。

LH过高或过低对卵母细胞均有不良影响，过高的LH可使卵泡膜细胞分泌雄激素增加，这种卵泡内高雄激素的微环境可导致颗粒细胞凋亡、卵泡发育闭锁。过低LH 又使雌激素生成不足[6]。2001 年Balasch提出了“LH 治疗窗”的概念，指出如果血中LH 水平未达到阈值，卵泡发育和内膜增殖所需的雌激素水平产生将会不足[8-9]。只有在适宜范围内，LH 才可维持卵泡内正常水平的雄激素，提高卵泡发育和卵母细胞质量[10-11]。但是LH 阈值及上限各家报道不一。2002 年Humaidan 等报道，在激动剂周期中，LH 介于0.51～1.5 U/L的患者获卵率、受精率、胚胎种植率及妊娠率更好，提示在激动剂长方案中晚卵泡期LH 的阈值可能为0.5 U/L，而其上限可能为1.5 U/L[12-13]。

本研究结果显示， 控制性超促排卵周期中血清LH＜0.5 U/L，可使用rhFSH 剂量增加，与低浓度LH使卵母细胞成熟延迟有关。LH≥0.5 U/L 可缩短rhFSH的使用时间，减轻患者的经济负担，临床流产率更低，临床结局更好。但本研究病例数不多，还需要更大样本量的临床资料进行进一步研究。

[1] 李轶，魏莉娜，熊永崂，等.不同黄体生成素与卵泡刺激素比值的多囊卵巢综合征患者抗苗勒管激素分泌特点及卵泡发育障碍机制[J].中华妇产科杂志，2010，45（8）：131.

[2] 陈雷宁，全松，李红，等.重组卵泡刺激素预充注射笔在控制性超促排卵中的临床应用[J].南方医科大学学报，2009，29（1）：100-104.

[3] Balasch J，Fobregues F.Pregnancy after administration of highdosa recombinant human LH alone to support final stagesof follicular maturation in a woman with long -standinghypogonadotrophic hypogonadism[J].Reprod Biomed Online，2003，6（4）：427-431.

[4] 叶虹.高黄体生成素水平与早发黄体生成素峰的概念[J].生殖医学杂志，2010，19（3）：15.

[5] 何冰，成俊萍，黄莉，等.促黄体生成素在卵泡发育及辅助生殖促排卵中的作用[J].中国临床新医学，2012，5（7）：656-659.

[6] 陈雪梅.不同药物预处理多囊卵巢综合征并不孕患者的疗效及副反应分析[J].实用医学杂志，2011，27（15）：125-124.

[7] 路英丽，李蓉，乔杰，等.短方案超促排卵后卵泡晚期黄体生成激素对体外受精结局影响的研究[J].中国实用妇科与产科杂志，2008，24（5）：363-365.

[8] Balasch J，Vidal E，Penarrubia J，et al.Suppression of LHduring ovarian stmulation：analysing threshold values andeffects on ovarian respense and the outcome of assisted reproductionin down-regulated women stomulated with recombiantFSH[J].Hum Reprod，2001，16（8）：1636.

[9] Guimera M，Morales-Ruiz M，Jimenez W，et al.LH/HCG stimulationof VECF and adrenomedullin production by follicularfluid macrophages and luteinized granulose cells [J].Reprod Biomed Online，2009，18（6）：743-749.

[10] 陈玲琴. 促性腺激素释放激素拮抗剂联合卵巢温和刺激在辅助生殖领域的应用价值探讨[J].现代妇产科进展，2012，21（10）：812-814.

[11] 宋文妍，孙莹璞，金海霞，等.成熟卵母细胞玻璃化冷冻时机及解冻方法对辅助生殖结局的影响[J].中华妇产科杂志，2010，45（8）：578-582.

[12] 汤江静，邵敬於，段涛，等.辅助生殖技术中卵母细胞线粒体功能对胚胎发育的影响[J].国际生殖健康计划生育杂志，2013，9（6）：464-467.

[13] 庄广伦.必须重视辅助生殖技术可能风险的防治[J].国际生殖健康/计划生育杂志，2011，30（4）：263-264.

Impact of assisted reproductive technology of super ovulation in serum luteinizing hormone effects on pregnancy outcome in embryo transplantation

XU Li-hua CHE Xiao-qun PANG Xiao-yan CHEN Bi
Reproductive Center of the Affiliated Hospital of Guangdong Medical College,Zhanjiang 524000,China

ObjectiveTo explore the effect of super ovulation in serum luteinizing hormone(LH)on the embryo transplantation.Methods Retrospectively analysis was performed on the clinical data of patients with 118 fresh cycle of IVF/ICSI in our center from January of 2013 to January of 2014.Patients were divided into group A (LH≥0.5 U/L,75 cases)and group B(LH<0.5 U/L,43 cases)according to the determination results after the injection of human chorionic gonadotropin (HCG).The rhFSH dosage,fertilization rate,clinical pregnancy rate,abortion rate of two groups were compared.ResultsThe Gn dosage of patients in group A[(26.89±4.35)doses]was lower than that of group B[(30.67±7.68)doses],the difference was statistically significant between two groups(P<0.05).The fertilization rate of group A(84.0%)and group B(82.7%)had no statistical significance(P>0.05).The clinical pregnancy rate of two groups had no statistical significance (54.7%vs 53.5%,P>0.05).The clinical abortion rate of patients in group A (6.7%)was lower than that in group B(11.6%),the difference was statistically significant(P<0.05).ConclusionThe LH concentration of serum in the super ovulation less than 0.5 U/L can increase the rhFSH dosage and clinical abortion,and has no effect on the fertilization rate and clinical pregnancy rate.

Luteinizing hormone;Fertilization;Embryo transfer;Pregnancy rate

R711

B

1674-4721（2014）04（c）-0184-03

2014-03-17 本文编辑：林利利）