吴芳芳，许 纹，杨乐园

(1.上海建工医院检验科，上海200083;2.上海市第一人民医院宝山分院，上海200940)

尿路感染是临床常见的泌尿系统疾病。及时了解病原菌的分布和耐药性变迁对临床合理使用抗菌药物具有重要的意义[1]。我们通过对尿标本中分离的菌株进行分析，了解尿路感染患者致病菌分布及耐药状况，为临床合理选用抗菌药物提供依据。

材料和方法

一、标本来源

收集2011年1月1日至2012年12月31日上海建工医院尿标本中的临床分离菌株，剔除同一患者相同部位中的重复菌株，重复多次送检取第一次阳性结果进行分析。

二、仪器与试剂

采用ATB细菌鉴定仪进行菌种鉴定和药物敏感性试验，菌种鉴定和药敏试验的试剂条，均购自法国生物梅里埃公司。

三、方法

1.标本的采集和培养 按照《全国临床检验操作规程》(第3版)要求进行。

2.细菌鉴定 采用ATB细菌鉴定仪及配套细菌鉴定试剂条进行菌种鉴定。

3.药物敏感性试验 采用ATB细菌鉴定仪及配套药敏试剂条进行药物敏感试验。判定标准按美国临床实验室标准化协会(CLSI)2012年版的规定[2]。质控菌株为金黄色葡萄球菌(ATCC 29213)、大肠埃希菌(ATCC25922、ATCC35218)、铜绿假单胞菌(ATCC27853)、粪肠球菌(ATCC29212)由上海市临床检验中心提供。

4.超广谱 β内酰胺酶(ESBLs)检测 按CLSI推荐的纸片筛选法和酶抑制剂增强确证试验检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和奇异变形杆菌中产ESBLs菌株。

四、统计学方法

采用WHONET 5.4软件进行统计分析。

结 果

一、病原菌分布

尿标本中共分离致病菌962株，其中革兰阳性菌 261株(27.1%)、革兰阴性菌 701株(72.9%)。以大肠埃希菌分离数最多，为429株(44.6%)，其次为肠球菌属 228 株(23.7%)、肺炎克雷伯菌83株(8.6%)。大肠埃希菌ESBLs阳性率为63.2%，肺炎克雷伯菌ESBLs阳性率为56.6%。见表 1。

表1 962株病原菌分离构成比

二、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药性

未检出对碳青霉烯类药物耐药的大肠埃希菌，肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类药物的耐药率仅为4.8%。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对第3代和第4代头孢菌素的耐药率分别在60%和55%左右;大肠埃希菌对喹诺酮类药物的耐药率为77.9%，肺炎克雷伯菌则为47.0%。见表2。

三、肠球菌对抗菌药物的耐药性

肠球菌属共228株，其中粪肠球菌129株，占革兰阳性菌的49.4%;屎肠球菌76株，占革兰阳性菌的29.1%。耐药情况见表3。

表2 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药率 (%)

表3 肠球菌属细菌对抗菌药物的耐药率 (%)

四、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对抗菌药物的耐药性

铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率为14.1%，对阿米卡星的耐药率仅为3.1%。鲍曼不动杆菌的耐药情况较严重，对常用药物的耐药率均在40%以上。见表4。

表4 铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌的耐药率 (%)

讨 论

随着抗菌药物、免疫抑制剂、激素及介入性诊疗措施的增多，尿路感染发生率明显升高。本研究结果显示，泌尿道感染致病菌为革兰阴性杆菌为主(72.9%)，主要致病菌为大肠埃希菌，占44.6%，与文献报道[3-4]一致。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中 ESBLs阳性率分别为 63.2%和56.6%，与文献报道[4-5]一致。

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对第3代、第4代头孢菌素的耐药率在53.1% ～62.9%之间，对阿米卡星、哌拉西林-他唑巴坦的耐药率较低(均＜10%)。提示头孢菌素已成为严重耐药的药物，临床治疗尿路感染应慎重使用第3代、第4代头孢菌素[5]。本研究结果显示，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对喹诺酮类药物的耐药率分别为77.9%、47.0%，而粪肠球菌、屎肠球菌的耐药率分别为 72.9%和 93.3%，与文献报道[7]一致。这可能与临床经验性治疗首选喹诺酮类药物有关。因此，将喹诺酮类药物作为临床治疗尿路感染的一线药物可能已不太合适。但各种药物主要经肾脏排泄，尿液中药物浓度远远高于细菌的最低抑菌浓度，能否应用奎诺酮类药物治疗泌尿系统感染仍需进一步研究[8]。铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率为14.1%，是除黏菌素外最敏感的药物。鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率为42.3%。

综上所述，尿培养阳性的致病菌以大肠埃希菌、肠球菌菌属和肺炎克雷伯菌最为多见。致病菌对喹诺酮类药物及第3代、第4代头孢菌素耐药现象严重。临床需要密切关注细菌耐药性变化趋势，应根据药敏结果合理使用抗菌药物，减少耐药菌的产生。

[1]杨 青，陈 晓，孔海深，等.Mohnarin2011年度报告:尿标本细菌耐药监测[J].中华医院感染学杂志，2012，22(24):5503-5507.

[2]Clinical and Laboratory Standards Institute.Performance standard for antimicrobial susceptibility testing[S].M100-S22，CLSI，2010.

[3]杨 青，陈 晓，孔海深，等.Mohnarin 2010年度报告:尿标本细菌耐药监测[J].中华医院感染学杂志，2012，22(3):476-480.

[4]郑齐锶，曹小利，周爱平，等.尿路感染大肠埃希菌耐药特点与种系分型和遗传相关性分析[J].检验医学，2013，28(12):1102-1105.

[5]杨 青，陈 晓，孔海深，等.Mohnarin 2011年度报告:尿标本细菌耐药监测[J].中华医院感染学杂志，2012，22(24):5503-5507.

[6]叶剑荣，袁利群.658例尿培养病原菌分布及耐药性分析[J].检验医学与临床，2010，5(7):805-808.

[7]鲍彩丽，范倩燕，吴 迪，等.安图医院尿路感染患者中段尿中分离出的粪肠球菌和屎肠球菌的耐药性分析[J].检验医学，2014，29(1):38-41.

[8]吕 媛，李 耘，崔兰卿.2010年度卫生部全国细菌耐药监测报告:肠杆菌科细菌耐药监测[J].中华医院感染学杂志，2011，21(24):5138-5143.