宋李玲，李瑞珺，刘倩倩，林新春*

(1.浙江农林大学 亚热带森林培育国家重点实验室培育基地，浙江 临安 311300;2.浙江省临安市林业局，浙江临安311300)

棉花竹(Fargesia fungosa)属禾本科Poaceae竹亚科Bambusoideae箭竹属Fargesia，分布于四川西南部、贵州西部和云南东北部海拔1 800～2 700 m的地区［1］。竹笋营养丰富，可供食用;竿材篾质富韧性，最适宜编织农具、家具，是优良的笋材两用竹种。传统的繁殖方法主要是移竹、埋鞭、竹枝扦插等，不仅劳动强度大、消耗竹种多，且繁殖系数低，而用组织培养进行快繁具有繁殖速度快、系数高、体积小、便于携带等优点［2－3］。利用组织培养技术，已经成功地进行了菲白竹(Sasa fortunei)、勃氏甜龙竹(Dendrocalamus brandisii)、花叶花秆绿竹(Bambusa oldhamii f.variegata)［4－18］等多个属的竹种的快繁研究。但目前国内外尚无有关箭竹属组织培养方面的报道。箭竹属竹种是大熊猫的主食竹种［19］，研究该类竹种的快速繁殖技术可为大熊猫提供食物保障，对其种群的发展具有重要意义。本研究试图通过对棉花竹试管快繁技术的研究，为该竹种的扩繁和产业化生产提供技术支撑，也为箭竹属其他竹种的组织培养提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验材料为采自云南的棉花竹成熟种子。

1.2 试验方法

1.2.1 初代培养 将棉花竹的种子剥去外壳后(图1a)，于自来水下冲洗10～12 h，再用2.5%的NaClO溶液真空抽滤30 min，无菌水冲洗5次，在体视显微镜下剥离种胚，接种于不添加任何激素的MS培养基上。置于暗柜中培养3 d后，再进行光照培养。将诱导出的长势一致的芽(图1b)作为增殖试验的材料。

1.2.2 增殖培养 用于棉花竹增殖培养的基本培养基为MS培养基，分别添加不同质量浓度的NAA(0，1，3 mg/L)和BA(0，1，3，10 mg/L)，共12个处理。选取高度约4 cm的长势一致的丛生芽为试验材料，每3个芽为1丛，1丛/管，13管/处理。培养4周后，观察芽的增殖和生长情况。

1.2.3 生根培养 选取高度约4 cm的长势一致的丛生芽接种于添加了不同质量浓度IBA(0，1，3，10 mg/L)的1/2 MS培养基中，共4个处理，每3个芽为1丛，1丛/管，15管/处理。培养4周后，观察生根数和生长情况。

1.2.4 试管苗移栽 经炼苗后的棉花竹试管苗用温水(30℃)洗净根部残余的培养基后，移栽于泥炭、蛭石、珍珠岩配制比例为1∶1∶1的混合基质中。移栽时需进行套袋，1周后开始剪袋，2～3周后完全脱袋。1个月后统计移栽成活率。

1.2.5 培养条件 培养温度为(25 ±2)℃，光周期为16 h/8 h，光照强度为2 400 lx。

2 结果与分析

2.1 不同质量浓度的BA与NAA组合对棉花竹芽增殖的影响

不同植物激素组合对棉花竹芽的增殖产生不同的影响。从表1可看出，当BA质量浓度不变时，随着NAA质量浓度的增加，芽的增殖系数大体呈下降的趋势;当NAA质量浓度不变时，随着BA质量浓度的增加，芽的增殖系数大致呈上升的趋势。在分别添加3 mg/L和10 mg/L BA的培养基中，棉花竹芽的增殖系数较大，与其他处理差异显著。但在BA浓度为10 mg/L时，棉花竹叶片发黄，少数褐化甚至死亡，对芽的生长不利;在添加3 mg/L BA时，叶片鲜绿，新生芽生长旺盛，不易褐化，且增殖系数达到最大值3.77(图1c)。综合考虑上述各因素，棉花竹的最佳增殖培养基为MS+3 mg/L BA。

表1 不同植物激素组合对棉花竹芽增殖的影响Tab.1 Effect of different hormone combinations on buds multiplication of Fargesia fungosa

2.2 不同质量浓度的IBA对棉花竹生根诱导的影响

用4个不同质量浓度的IBA对棉花竹进行生根诱导，结果(表2)表明:棉花竹生根较容易，在不添加IBA的1/2 MS培养基中生根率已达93%，但根较纤细。随着IBA质量浓度的增加，根的数量逐渐增多。但是，在添加10 mg/L IBA的培养基中诱导出的根粗短、较膨大，为畸形根，且植株发黄，长势较差。在添加3 mg/L IBA的培养基中，生根率达100%，生根系数较大，根较粗壮，植株生长较好(图1d)。综上所述，棉花竹最佳生根培养基为1/2 MS+3 mg/L IBA。

表2 不同质量浓度的IBA对棉花竹生根诱导的影响Tab.2 Effect of different concentrations of IBA on roots induction of Fargesia fungosa

2.3 试管苗移栽

将生根的棉花竹试管苗在强光下炼苗1周，移栽入泥炭、蛭石、珍珠岩配制比例为1∶1∶1的混合基质中，1个月后统计其成活率达98%(图1e)。

图1 棉花竹的离体快速繁殖Fig.1 In vitro rapid propagation of Fargesia fungosa

3 结论与讨论

竹类植物由于其开花周期长且难以预测，使得对其育种及遗传改良工作较难。通过对获得的棉花竹种子进行组织培养，运用试管微繁殖技术，可以对性状优良的无性系进行快速繁殖，这对具有优良性状的种苗在工厂化育苗方面起到重要作用。

通过对棉花竹试管快繁技术的研究，初步得到以下结论:棉花竹丛生芽增殖阶段的最佳培养基为MS+3 mg/L BA;最佳生根培养基为1/2 MS+3 mg/L IBA。研究认为，一定质量浓度的BA可促进芽的增殖，但过高浓度可能会抑制植株生长，甚至褐化致死，这与张铁等［7，14，20］的研究结果一致。

棉花竹生根较容易，在芽诱导阶段即可自发生根，在进行生根处理的第3天均可生根。而其在不添加任何激素的1/2 MS中诱导的根较纤细，不利于移栽成活。在培养基中添加不同质量浓度的IBA时，试管苗生根系数随着其质量浓度的增加而增大。但浓度过高时，产生的根较短且膨大，为畸形根，植株长势较差，这与张有珍等［5］的研究结果相同。

本实验的外植体为棉花竹种子，但多数竹类植物种子的获取相对较难。因而，对以其幼嫩茎尖、幼枝节段为外植体进行快繁的实验有待于进一步研究。

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