徐 菡 乐家新* 兰亚婷 任 爽

BC-5300自动血细胞分析仪是深圳迈瑞公司生产的白细胞五分类血细胞分析仪。该仪器利用电阻抗检测法、流式细胞技术及细胞化学染色技术联合进行全血细胞计数(CBC)、白细胞五分类(Neut、Lym、Mon、Eos、Baso)测量，可提供23项血液学参数，并给出白细胞分类散点图、红细胞和血小板的体积分布直方图。为了解其全血细胞计数及白细胞分类的性能，以便纳入到科室的ISO 15189质量管理体系，更好地应用于临床工作。本研究参照国际血液学标准化委员会(ICSH)和美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)文件[1-2]的有关规定对该仪器血细胞参数进行了初步测试及评价。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

(1)待测仪器：BC-5300自动血细胞分析仪、配套试剂、全血质控物和校准物均由深圳迈瑞公司提供。

(2)比对仪器：XE-2100全自动血细胞分析仪、配套试剂、全血质控物及校准物均由日本SYSMEX公司提供。

1.2 血标本

血标本来自我院住院患者。受检者早晨空腹，用真空抗凝管(BD公司生产，含EDTA-2K 3.6 mg)从肘静脉采血2 ml，混匀后室温(20～24 ℃)放置，于采血后1～4 h(总重复性5 h内)完成检测。

1.3 检测方法

BC-5300每日开机后预热至少30 min，全血质控物测试合格后检测待测标本。

1.4 统计学分析

所有数据用Microsoft Excel软件进行统计学分析，计量资料用x±s表示，比较两种方法的相关性采用线性回归分析。

1.5 质量控制

BC-5300血细胞分析仪由厂家工程师安装调试完毕，按照仪器操作程序，用配套的全血校准物将全血细胞参数校准。每次实验前，先测试全血质控物，结果均在其靶值允许的范围内。比对仪器XE-2100(实验前已校准)每天测量全血质控物，结果均在质控物靶值允许的范围内。

2 评价指标与结果

2.1 总重复性

随机选取临床新鲜抗凝静脉血20份(其中异常标本11份)，随机排列，在BC-5300上按全血模式测定1次，该批样本室温放置2 h及4 h后，再按上述顺序重复测定1次，检测数据根据公式1计算得出各评价参数的总CV%。结果：除PLT为3.17%外，WBC、RBC、HGB和MCV均＜1.7%。

其中: SSQ(组内离均差平方和)=∑(各测定值)2-∑(各样本小计)2/n。n：重复测定次数，u：样本数。

2.2 精密度

包括批内精密度和批间精密度。

(1)批内精密度：选取高、中、低值质控品，分别在全血及预稀释模式下进行测试，每种水平的质控品均测试20次，计算CV%，CV均＜1/4CLIAA’88。见表1。

(2)批间精密度：选取高、中、低值质控品，在全血模式下进行测试，每种水平的质控品每日测试1次，连续测量20 d，计算CV%。结果:3个水平质控品的WBC、RBC、HGB、MCV、PLT的CV分别＜3.0%、1.7%、1.5%、0.8%和4.9%，CV均＜1/3CLIAA’88。

2.3 携带污染率

先取1份高值血细胞样本连续测定3次，随后立即取配套稀释液作为低值血细胞样本连续测定3次，根据公式2计算：

表1 两种模式批内精密度测定结果(%)

结果：2种检测模式 WBC、RBC、HGB和PLT的携带污染率在-0.49%～0.80%之间，均符合＜1%的要求。

2.4 稀释效应

取1份高值血细胞抗凝血样本离心除去部分血浆，WBC、RBC、HGB和PLT值分别为103.9×109/L、7.51×1012/L、267g/L和1113×109/L，以此样本为100%。再用稀释液将该血样本按90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%、20%、10% 和0%进行稀释，然后从低到高测定不同稀释度的血样本，每份重复测定2次取均值，并与各稀释度的期望值(期望值=原始数值×稀释度)进行相关分析。均符合线性回归方程的斜率在1±0.05范围内和相关系数r≥0.975的检测要求见表2。

表2 BC-5300稀释效应

2.5 可比性

(1)BC-5300模式间测定结果的可比性：随机选取40份临床新鲜抗凝静脉血，每份样本分别在BC-5300的全血及预稀释模式各测定2次，取均值统计以观察2种进样模式下CBC各参数的相关性，结果见表3。

表3 BC-5300模式间相关性和偏差比较

(2)BC-5300与XE-2100测定结果的可比性：随机选取181份临床新鲜抗凝静脉血，每份样本分别在BC-5300上以自动进样模式连续检测2次，然后立即在XE-2100上以自动进样模式连续检测2次，各取平均值进行统计，结果见表4。

表4 BC-5300与XE-2100相关性和偏差比较

2.6 白细胞分类

(1)精密度：取1份抗凝血(其中Neut 48.88%、Lym 43.63%、Mon 5.66%、Eos 1.46%和Baso 0.37%)在BC-5300仪器全血模式重复测定11次，取第2～11次的白细胞分类结果计算CV值。五类白细胞(Neut、Lym、Mon、Eos和Baso)重复测定的CV值分别为1.47%、1.08%、7.60%、11.73% 和51.04%。

(2)可靠性：取202例临床新鲜抗凝静脉血在BC-5300仪器上测定，每份样本重复测2次取均值。同时每份血推3张符合质控要求的血片，瑞氏染色后其中2张血片(另1张备用)由2位有经验的技师在体尾交界处按“白细胞分类计数参考方法”[3]进行白细胞分类，分为Neut、Lym、Mon、Eos、Baso及各类异常细胞，每张血片油镜分类计数200个白细胞，共计400个白细胞取均值，再与BC-5300仪器的白细胞分类值进行比较。其中136例人工镜检白细胞形态正常的样本，BC-5300仪器与人工镜检白细胞分类的结果比较见表5。其余66例人工白细胞分类异常的血样本中，大部分为血液系统疾病、肿瘤放化疗、严重感染和外科大手术后出现异常细胞的病例。这些样本在BC-5300仪器上测定，53例白细胞散点图有较明显变化或报警提示。剩下的13例中，异常细胞的比例较低，其白细胞散点图变化不太明显，仪器也未报警。在202份血样中发现11例仪器假阳性报警(核左移和幼稚粒细胞)，人工白细胞分类未见幼稚粒细胞，但可见中性粒细胞有中毒颗粒、空泡变性或Dohle小体等中毒性改变及核固缩和碎裂等退行性变化。

3 讨论

本次实验所得到的数据显示：BC-5300仪器全血和预稀释模式测定各参数的批内和批间精密度良好，除低值血小板CV值在3.98%～4.84%外，其他CBC参数的CV值均＜3%。总重复性CV值在要求范围内，除血小板＜3.2%，其它CBC参数均＜1.7%。携带污染率低，2种模式测定的CBC参数的携带污染率均＜1%，符合检测要求。在常见的正常及病理范围线性良好，所测CBC参数各稀释度的实测值与期望值之间密切相关(r＞0.998)。两种进样模式间检测的结果相关性好，参数r2值均＞0.98；与XE-2100(自动进样)检测的血细胞结果对比分析，两者具有高度相关性，CBC各参数r2值均＞0.99，显示该仪器CBC计数性能良好。

表5 BC-5300与人工白细胞分类相关性测试结果(n=136)

白细胞分类：Neut、Lym、Mon、Eos和Baso重复测定的CV值分别为1.47%、1.08%、7.60%、11.73%和51.04%。136份人工镜检白细胞形态正常的样本，BC-5300仪器与人工镜检白细胞分类的结果比较(r值)，Neut、Lym和Eos分类结果的一致性良好(r=0.9663，r=0.9595，r=0.9178)，Mon次之(r=0.9014)，Baso的分类结果相关性欠佳(r=0.5065)。出现上述现象的主要原因可能与外周血中Baso数量少、且在血片中分布不均有关[4]。对血液病样本出现一定比例的原幼细胞、中或晚幼粒细胞和异型淋巴细胞，BC-5300仪器上白细胞散点图可有较明显变化或报警提示。对血样中仅有少量的异常细胞或中性粒细胞出现中毒性改变时，该仪器可出现假阴性或假阳性报警。由于用于研究的病理标本的数量和种类有限，有些临床病理标本尚未涉及到，有待下一步继续研究。

尽管血细胞分析仪白细胞分类的检测已由过去单纯的电阻抗原理发展到光散射、细胞化学染色、荧光染色、高频传导和鞘流技术等联合应用，有些仪器还能够对分析标本中的原始细胞、未成熟粒细胞、核左移和异型淋巴细胞等进行报警提示，极大提高了工作效率。但迄今为止，血细胞分析仪在形态学检查仍只能作为一种过筛手段，当遇到可疑情况，尤其是病理标本的检测，仍需进行人工显微镜复查[5-7]。因此，这类仪器的白细胞分类也只能起“过筛”作用。不仅当白细胞数量异常、散点图或直方图异常；有异常细胞报警提示；分类结果明显异常或不分类及某些特殊标本，而且当红细胞和血小板的直方图异常或有异常报

警提示等情况时，都应进行人工镜检复核，以保证检测结果的准确性[8-9]。同时还要注意标本保存条件和仪器工作状态对血细胞检测结果的影响[9-10]。因此，各实验室应根据所用的血细胞分析仪性能特点、医院规模、病种差异和常规工作的质量管理要求等，制定适用的“血细胞分析后血涂片复检规则”，对异常标本进行血涂片染色人工复检，使之既能防止漏掉异常细胞，又能适应实验室常规工作的需要[10-11]。这是目前血细胞分析仪合理使用需要研究的重要课题之一。

通过对BC-5300自动血细胞分析仪的系统评价，表明其检测速度较快，提供的参数较多，与其他血细胞分析仪的检测结果可比性较强、相关性较好。该仪器操作简便，具有较高的数据处理和储存能力；而且有双向传输等功能。因此，该仪器不仅适用中小基层医院的检验科室，也能满足较大医院检验科室的需求，是一款较理想的自动五分类血细胞分析仪。

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