吴文君，杜菲菲，刘全旭，宫 婷，高 明

(大连大学医学院，辽宁大连 116622)

复方儿茶止泻霜(CCAO)具有收敛、敛疮、抗菌和消炎等多种功能，临床用于治疗小儿湿热泄泻效果较好。2012年12月，我们通过建立炎症动物模型，对CCAO的抗炎作用进行研究，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 动物、试剂与仪器 清洁级昆明种小鼠90只，18～22 g，雌雄各半;雄性 SD大鼠 24只，180～220 g，均购自大连医科大学实验动物中心。CCAO(低剂量载生药量0.40 g/g基质，高剂量载生药量0.73 g/g基质);空白基质由大连大学医学院中医药研究所制备;复方醋酸地塞米松乳膏购自珠海安生凤凰制药公司;二甲苯购自国药集团化学试剂公司。TU-1810紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器公司)，ZH-YLS-7B足趾容积测量仪(淮北正华生物仪器设备公司)。

1.2 方法

1.2.1 CCAO对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响［1］取小鼠40只，雌雄各半，随机分为阴性对照组，CCAO高、低剂量组，复方醋酸地塞米松软膏阳性对照组各10只。腹部脱毛后涂抹给药2次/d，连续7 d，阴性对照组给予空白基质。末次给药后1 h，于小鼠右耳耳廓正反面各滴二甲苯0.05 mL，左耳不做任何处理，30 min后颈椎脱位法处死，在左、右耳廓相同部位用9 mm打孔器取下耳片，用分析天平准确称取质量，计算肿胀度、肿胀率及抑制率。左右耳质量之差为肿胀度，肿胀率(%)=［(阴性对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度)/阴性对照组平均肿胀度］×100%。抑制率(%)=［(阴性对照组平均肿胀率-给药组平均肿胀率)/阴性对照组平均肿胀率］×100%。

1.2.2 CCAO对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响［2］取小鼠50只，雌雄各半，随机分为空白组，阴性对照组，CCAO高、低剂量组，复方醋酸地塞米松软膏阳性对照组各10只。空白组不做任何处理，其余4组给药方法同上。末次给药1 h后，尾静脉注射1%伊文斯蓝生理盐水溶液0.02 mL/g，随即腹腔注射0.7%醋酸生理盐水溶液0.2 mL/只，30 min后处死，打开腹腔，用6 mL生理盐水洗涤腹腔，吸出洗涤液10 mL，离心取上清，于590 nm测定光密度OD值。

1.2.3 CCAO对蛋清致足肿胀及致炎大鼠胸腺、脾脏质量指数的影响［3］将24只雄性SD大鼠随机分为阴性对照组，CCAO高、低剂量组，复方醋酸地塞米松软膏阳性对照组各6只，给药方法同上。末次给药后1 h，每只大鼠测右足足容积作为给药前值，随后右足掌底皮内注射新鲜蛋清0.05 mL。分别于注射后1、2、3、4 h测大鼠右足容积，以所测容积减去给药前值作为肿胀度。大鼠处死后剪下致炎足，剥皮，剪碎，称质量，于5 mL生理盐水浸泡1 h，将浸泡液离心，取上清 0.1 mL，加入 0.5 mol/L KOH-甲醇溶液3 mL，50℃水浴异构20 min后加甲醇稀释至20 mL，于波长278 nm处测A值，以每克炎性组织相当的A值代表前列腺素E2(PGE2)含量［4］。取胸腺和脾脏称取质量，计算胸腺和脾脏的质量指数，即大鼠胸腺质量/大鼠体质量、大鼠脾脏质量/大鼠体质量。

1.2.4 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件，组间计量资料比较采用t检验，计数资料比较采用χ2检验。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组耳廓肿胀度及肿胀率比较 见表1。

表1 各组耳廓肿胀度及肿胀率比较

2.2 各组腹腔洗涤液光密度OD值比较 空白组，阴性对照组，CCAO高、低剂量组，阳性对照组的腹腔洗涤液光密度 OD 值分别为0.473±0.103、0.466±0.110、0.354 ± 0.072、0.382 ± 0.066、0.338 ± 0.085。CCAO高、低剂量组及阳性对照组与阴性对照组比较P ＜0.05 或 ＜0.01。

2.3 各组足肿胀率、PGE2含量、胸腺指数和脾脏指数比较 见表2、3。

3 讨论

腹泻的病理基础为肠道在感染或非感染因素刺激下黏膜发炎、水肿、肠分泌及运动功能亢进，出现稀便和便频等症状［4］。CCAO处方来源于《医宗金鉴》龙骨儿茶散，由儿茶、黄柏、五倍子、木香四味中药组成，具有收敛、敛疮、抗菌和消炎功能。复方儿茶水提取液的抗腹泻机制与其抗炎作用有关［6］。CCAO是其提取液的外用制剂，含有儿茶素、表儿茶素、没食子酸、鞣质和小檗碱等抗腹泻成分。现代药理学研究表明，儿茶主要含有儿茶素和表儿茶素，具有明显的抑菌抗炎作用，可治疗多种细菌感染性疾病;五倍子的主要有效成分为鞣质及没食子酸，具有抗菌、抗病毒、收敛、清除自由基和抗氧化作用，所含鞣酸作用于炎症肠道可止泻;黄柏的主要有效成分为小檗碱，具有很强的抗炎止泻作用［7］。

表2 各组足肿胀率及PGE2含量比较()

表2 各组足肿胀率及PGE2含量比较()

注:与阴性对照组比较，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01

组别 n含量阴性对照组 6 1.265 ±0.108 1.490 ±0.105 1.116 ±0.099 0.8241 h 2 h 3 h 4 h PGE2足肿胀率±0.064 0.663 ±0.086 CCAO 高剂量组 6 0.794 ±0.091* 0.994 ±0.080* 0.818 ±0.629* 0.692 ±0.067 0.501 ±0.062＊＊CCAO 低剂量组 6 0.917 ±0.091* 1.046 ±0.096* 0.908 ±0.077 0.752 ±0.059 0.525 ±0.108*阳性对照组 6 0.885 ±0.115＊＊ 0.934±0.121＊＊ 0.717±0.107＊＊ 0.563±0.095* 0.463±0.097＊＊

表3 各组胸腺和脾脏指数比较(%，)

表3 各组胸腺和脾脏指数比较(%，)

注:与阴性对照组比较，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01

组别 n 胸腺指数 脾脏指数阴性对照组6 0.215 ±0.023 0.203 ±0.017 CCAO 高剂量组 6 0.140 ±0.018* 0.138 ±0.018*CCAO 低剂量组 6 0.154 ±0.021* 0.145 ±0.022*阳性对照组 6 0.133 ±0.016＊＊ 0.109 ±0.015＊＊

炎症是机体对损伤因子产生的一种防御反应，其局部反应主要包括红、肿、热、痛及功能障碍。二甲苯致小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠毛细血管通透性增加、蛋清致足肿胀是用于研究炎症的常见动物模型［8］。本实验结果显示，与各模型的阴性组比较，CCAO高低剂量组耳肿胀容积、小鼠腹腔血管通透性、大鼠足肿胀容积和其致炎足中PGE2含量均明显降低。说明CCAO具有抑制二甲苯致耳肿胀、醋酸致毛细血管通透性增加及蛋清致足肿胀的作用。急性炎症发生时局部组织产生大量PGE2，PGE2是强效扩血管物质，并协同其他活性物质参与血管渗漏、水肿等炎症反应［9］。本实验中，大鼠致炎足组织中PGE2含量变化表明，CCAO可能是通过抑制PGE2的合成和释放而发挥抗炎作用，是否同时对其他活性物质也有抑制作用有待进一步研究。此外，胸腺和脾脏均为重要的免疫器官，炎症反应能刺激免疫器官增生。杨宇清等［10］研究表明，儿茶素能下调胸腺、脾脏指数，抑制增强的胸腺T淋巴细胞增殖反应。因此推测，CCAO通过抗炎作用达到保护机体免疫器官的作用，这很可能是其治疗腹泻的机理之一。

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［6］谢世荣，高明，韩再虹，等.复方儿茶水提液的抗腹泻和抗炎效应［J］.中国临床康复，2006，10(35):71.

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［9］朱依谆.药理学［M］.北京:人民卫生出版社，2011:311-314.

［10］杨宇清，魏伟.儿茶素对环磷酰胺诱导小鼠迟发性超敏反应的影响［J］.中国新药杂志，2007，16(23):1940.