张世琼，傅春玲，刘定荣

(重庆市涪陵中心医院病理科，重庆408000)

有凝固物浆膜腔积液的细胞块制作方法

张世琼，傅春玲，刘定荣

(重庆市涪陵中心医院病理科，重庆408000)

目的探讨有凝固物的浆膜腔积液的细胞块制作方法。方法将带有凝固物的胸、腹水离心，取离心沉淀物制成细胞块，按常规组织标本处理程序，石蜡包埋、切片、HE染色。结果此方法制成的切片细胞形态结构保持完好，核浆染色对比良好，图像清楚，免疫组化染色效果好，原位杂交定位清楚、准确。结论有凝固物的浆膜腔积液制作细胞块操作简便，实用性强，细胞块可用作HE染色及免疫组化染色和原位杂交检查，对浆膜腔积液的正确诊断有较大的帮助。

细胞块；凝固；浆膜腔积液；病理技术

浆膜腔积液脱落细胞学检查是一种简单、特异性较高的检查方法，对疾病的诊断起到了较大作用。实际工作中，常常遇见送检的胸、腹水中有凝固物，此时若行常规离心涂片染色，其阳性率必然降低，影响疾病的正确诊断。此前，对有凝固物的胸腹水，多数情况将之丢弃，致使再次穿剌检查，增加患者痛苦。基于此种情况，笔者收集了2011年5月至2012年4月有凝固物的胸、腹水30例，尝试将送检的胸腹水连同凝固物离心后制成细胞块，行HE染色及免疫组化检查，取得满意的效果，现介绍如下：

1 材料与方法

1.1 材料10%中性福尔马林；乙醇；二甲苯；石蜡；Leica ASP300S脱水机；TD4-Ⅱ台式自动平衡离心机；一次性10 ml塑料离心管；Shandon Finesse 325切片机。

1.2 方法将胸、腹水内的凝固物用镊子轻轻夹出放入一次性塑料离心管中，取剩下的胸腹水底部部分10 ml混入盛有凝固物的塑料离心管内，平衡后放入离心机离心10 min，弃上清液，用镊子轻轻夹出凝固物，将底部沉淀物常规涂片两张行HE染色，再将凝固物放回一次性塑料离心管中，加入10%中性福尔马林液固定至少30 min，用滤纸包裹凝固物放入脱水盒，与组织标本一起入Leica ASP300S脱水机，常规石蜡包埋、切片、HE染色，根据需要做免疫组化染色。

2 结果

对比细胞块切片及常规涂片，细胞块切片HE染色细胞量大，细胞结构清晰，核浆对比良好，染色鲜艳（图1）；常规涂片细胞量较少，结构不清，细胞空泡变性、胞膜破裂、核染色模糊现象较为常见。免疫组化染色，细胞块切片着色清楚，背景干净（图2），且实验过程中试剂耗用量少；常规涂片厚薄不均，染色模糊，背景着色，试剂用量大。

图1 胸水细胞块HE切片可见散在的癌细胞，背景中可见中性粒细胞、淋巴细胞(HE×400)；图2胸水细胞块切片免疫组化染色，TTF1癌细胞核阳性(SP×400)

3 讨论

浆膜腔积液脱落细胞学检查对疾病的正确诊断意义重大，体液细胞块制作技术是对脱落细胞学检查技术的一项重要发展。有凝固物的胸、腹水制作的细胞块，由于体液本身的纤维蛋白支架取代了外源性的细胞支架（如蛋清、脱脂棉等），使其更接近组织块。该细胞块具有以下优点：细胞块切片HE染色接近组织切片HE染色，利于观察；可根据需要再行多次切片及长期保存细胞块；免疫组化染色效果与组织块差异不明显[1]，实验结果可信度高，并且可有针对性地滴加试剂，节约试剂用量；细胞块原位杂交检查定位准确[2]；所需设备简单，操作容易。基于此，我们认为此方法值得推广。如果加大离心管容量，取液量增加至50～100 ml，效果将会更佳。

[1]陈历国,丁显平.粘附分子相关蛋白在浆膜腔积液脱落细胞学中的表达意义[J].海南医学院学报,2010,16(11):1405-1408.

[2]蒋文化,吴毅林,文一智,等.细胞块上检测p16、HPV16用于筛查ASCUS中高度宫颈上皮内瘤变的临床探讨[J].海南医学,2008, 19(9):15-17.

R329.2

B

1003—6350（2013）05—0737—01

10.3969/j.issn.1003-6350.2013.05.0317

2012-09-21)

张世琼。E-mail：cqflzsq@sina.com