邵雪峰

江苏省太仓市第一人民医院泌尿外科，江苏 太仓 215400

精液液化延迟患者精浆KLK2、KLK3、KLK5的变化

邵雪峰

江苏省太仓市第一人民医院泌尿外科，江苏 太仓 215400

目的：研究精浆KLK2、KLK3、KLK5在精液液化过程中所起的作用与意义。方法：选取液化延迟患者43例为液化延迟组，液化正常患者38例为对照组。测定精浆KLK2、KLK3、KLK5水平，两组对比。结果：液化延迟组精浆KLK2、KLK3明显低于对照组，P＜0.05。KLK5略低于对照组，P＝0.067。结论：KLK2、KLK3、KLK5的浓度变化与精液液化时间具有密切相关性，在精液液化过程中起重要生理作用。

精液液化；激肽释放酶；不育

人激肽释放酶（Human kallikrein－related peptidases，KLKs）是一组丝氨酸蛋白酶。精浆KLK2、KLK3、KLK5由前列腺分泌，具有蛋白水解作用，在精液液化过程中起重要作用。本文通过对比精液液化延迟患者与正常患者精浆KLK2、KLK3、KLK5浓度的变化，来研究其在精液液化过程中所起的作用与意义。

1 对象与方法

1.1 病例资料 按WHO规定，新采集的精液标本在室温（25℃）60 min内发生液化，若超过60 min仍未液化，则称为精液液化延迟。在2010年至2012年我院门诊行精液分析的患者中，选取液化延迟患者82例为病例组（液化延迟组），年龄25～37岁，平均（29±7）岁；选取液化正常者64例为对照组，年龄24～35岁，平均（28±5）岁。

1.2 方法 禁欲3～5天，手淫取精，记录液化时间。如精液1.5小时不液化，加入糜蛋白酶促液化。精液液化后按试剂盒步骤，ELISA法检测精浆KLK2、KLK3、KLK5，试剂盒购自上海蓝基生物科技有限公司。

1.3 数据分析 采用SPSS19.0统计软件，数据采用均数±标准差 （±s）表示，两均数比较采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

两组精浆KLK2、KLK3、KLK5检测结果见表1。液化延迟组患者精浆KLK2、KLK3水平明显低于对照组，差异有统计学意义。液化延迟组患者精浆KLK5略低于对照组，但差异不够显著。

表1 两组精浆KLK2、KLK3、KLK5的比较

3 讨论

正常精液是一种混合物，其中60%以上由精囊分泌，20%～30%来自前列腺，附睾液及精子约占10%，少量由尿道球腺分泌。精液液化是由一系列的蛋白水解酶所介导，而这些蛋白水解酶主要由前列腺所分泌［1－2］。当前列腺出现病变，这些蛋白水解酶分泌不足，可导致不育［3－4］。人激肽释放酶 （KLKs）属丝氨酸蛋白酶，是精液中主要的蛋白水解酶。目前发现KLKs共有15个成员，存在于不同组织和生物液体中。精液KLKs由前列腺组织的腺泡和管状上皮细胞合成分泌，大部分的KLKs在人精液中都能检测到，并且通过高度受控的级联蛋白激活机制在精液液化中起重要作用［5］。

KLK3即PSA，已有研究证实，精液液化延迟与精浆KLK3水平降低有关［6－7］，本研究中，精液液化延迟患者精浆KLK3明显低于对照组，结果与之相符。由于精囊腺分泌的凝固蛋白SgⅠ、SgⅡ及纤维蛋白形成团块阻碍精子活动，精液射出后在5到20分钟内凝固。活化的KLK3具有极强的类胰蛋白酶和类酯酶样活性，主要裂解凝固蛋白SgⅠ、SgⅡ等，从而使精液液化。精浆KLK3水平下降可直接导致精液液化延迟。

此外，精液液化延迟组精浆KLK2同样显著低于对照组，KLK5较对照组也有下降，但差异不够显著 （P＝0.067）。KLK2及KLK5也具有一定的蛋白水解作用［8］，并且在KLK3级联激活过程中起到重要作用。起初前列腺分泌的KLK2、3、5与Zn离子可逆性结合而处于失活状态［9］，当其与精囊腺分泌物混合，Zn与Sg蛋白结合而再分布，KLK5自动激活，并介导一系列的级联蛋白水解反应激活KLK3［8］。此外，KLK2也可通过去除7个氨基酸的方式自动激活，继而激活KLK3［10］。目前发现KLK5可通过自身裂解的方式失活，继而使KLK3失活，以此下调KLK3的活性。KLK2也可被KLK5抑制失活。除KLK5之外，目前尚未发现其他促使KLK3失活的途径［11］。

综上所述，KLK3在精液液化过程中起到重要作用，KLK3的活化与KLK2、KLK5的关系密切。本研究中精液液化延迟组KLK2、3、5较对照组均下降，可能的原因为前列腺功能低下、腺管堵塞，或其他一些病理因素，导致KLKs合成分泌量下降、级联激活过程受到影响。因此，精浆KLK2、3、5的检测具有重要意义，可作为诊治男性不育、精液液化延迟的重要参考指标。

［1］Robert，M.and Gagnon，C..Semenogelin I：a coagulumforming，multifunctional seminal vesicle protein.Cell.Mol.Life Sci.1999，55，944－960.

［2］Lwaleed，B.A.，Greenfield，R.，Stewart，A.，Birch，B.，and Cooper，A.J..Seminal clotting and fibrinolytic balance：a possiblephysiological role in themale reproductive system.Thromb.Haemost.2004，92，752－766.

［3］Mandal，A.and Bhattacharyya，A.K..Relationshipbetween the coagulation－liquefaction property of humanejaculates and their volume，sperm count and motility.Clin.Reprod.Fertil.1987，5，367－371.

［4］Mandal，A.and Bhattacharyya，A.K..Biochemical parametersof slowly liquefying human ejaculates.Arch.Androl.1988，20，141－145.

［5］Emami，N.and Diamandis，E.P..New insights into thefunctionalmechanisms and clinical applications of the kallikrein－related peptidase family.Mol. Oncol.2007，1，269－287.

［6］杨国宗，朱培元，胡毓安，等.不育病人精浆前列腺特异性抗原的检测及意义［J］.中华男科学，2003，9（8）：596－598.

［7］N Emami，A Scorilas，A Soosaipillai，etal.Association between kallikreinrelated peptidases（KLKs）and macroscopic indicators of semen analysis：their relation to sperm motility［J］.Biol.Chem.，2009，390.921－929.

［8］M.Brattsand，K.Stefansson，C.Lundh，Y.Haasum，T.Egelrud，Aproteolytic cascade of kallikreins in the stratum corneum，J.Invest.Dermatol.2005，124 198－203.

［9］G.M.Yousef，E.P.Diamandis，The new human tissue kallikrein genefamily：structure，function，and association to disease，Endocr.Rev.2001，22：184－204.

［10］T.K.Takayama，B.A.McMullen，P.S.Nelson，M.Matsumura，K. Fujikawa，Characterization of hK4（prostase），a prostate specificserine protease：activation of the precursor of prostate specific antigen（PSA）and single－chain urokinase－type plasminogen activator anddegradation of prostatic acid phosphatase，Biochemistry 2001，40：15341－15348.

［11］I.P.Michael，G.Pampalakis，S.D.Mikolajczyk，J.Malm，G.Sotiropoulou，E.P.Diamandis，Human tissue kallikrein 5 is a member of aproteolytic cascade pathway involved in seminal clot liquefaction andpotentially in prostate cancer progression，J.Biol.Chem.2006，281：12743－12750.

Variation of semen KLK 2，KLK 3，KLK5 in patients of delayed semen liquefaction

SHAO Xue－feng
Department of Urology，The first people’s hospital of Taicang

Objective：To research the effect and relationship of semen KLK2，KLK3，KLK5 during semen liquefaction.Methods：semen KLK2，KLK3，KLK5 were checked and compared between 43 delayed liquefaction patients and 38 healthy men as control group.Results：semen KLK2 and KLK3 were decreased significantly in delayed liquefaction patients，P＜0.05.Semen KLK5 was lower in delay liquefaction patients than the control group，P＝0.067.Conclusion：KLK2，KLK3，KLK5 play important roles in semen liquefaction.

semen liquefaction，kallikrein－related peptidases，infertility

R698.2

A

1007－8517（2013）10－0079－02

2013.04.12）