叶保国，闻春艳，王 薇，朱庆三，宋雪松＊

（1.吉林大学第一医院 麻醉科，吉林 长春 130021；2.吉林大学中日联谊医院 病理科，吉林 长春 130033；3.吉林大学第一医院 脊柱外科，吉林 长春 130021）

我国有悠久的大豆栽培历史，大豆产品是我国人民日常生活不可缺少的食品。大豆不仅富含优质蛋白质和油脂，且还含有大量具有生理活性的物质，包括大豆皂甙、大豆磷脂、低聚糖类等［1］；其中对大豆皂甙的研究，近年来有资料表明大豆皂甙能降低血糖、保护心血管系统、抗癌症以及抗衰老作用［2］，但大豆皂甙对糖尿病大鼠作用的研究在国内外尚未见相关报道，本实验旨在观察大豆皂甙对糖尿病大鼠肾脏自由基防御机能的作用，为大豆皂甙广泛应用于临床以及预防保健提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物和主要试剂 190－210 g健康雄性Wistar大鼠45只，由吉林省药品检验所提供（合格证号960101032）；大豆皂甙（SS）由吉林省中医中药研究所提供；实验用大豆皂甙用生理盐水稀释；链脲佐菌素（STZ）购于Sigma公司、SOD、CAT、LPO、GSH－Px试剂盒购于南京建成生物有限公司。

1.2 糖尿病模型制备 在实验分组前，首先制备糖尿病模型，随机取实验动物35只，腹腔注射STZ（用新配制的枸橼酸缓冲液溶解）50 mg／Kg；48小时后采尾血测空腹血糖，浓度大于16.7 mmol／L为模型复制成功［3］，该模型成功30只。

1.3 实验分组及给药 取未造模的10只动物做正常对照组，造模成功的30只动物随机分为糖尿病对照组（15只）、大豆皂甙给药组（15只），大豆皂甙给药组每日灌胃大豆皂甙10 mg／Kg，正常对照组及糖尿病对照组均每日给与等剂量生理盐水，连续给药3个月。在实验过程中糖尿病对照组动物死亡4只、大豆皂甙给药组动物死亡1只。

1.4 实验后的处理 各组均取10只动物取材，实验结束次日清晨处死，称量体重。取肾组织手动匀浆，2 000 g离心，留上清待测；采用 NBT［4］法检测肾组织中超氧化物歧化酶（SOD）含量、滴定法［5］测定CAT含量、TBA［6］法检测肾组织中脂质过氧化物（LPO）含量、DTNB法［7］测定 GSH－Px的含量；测试仪器为南京仪器设备厂722型分光光度计。

1.5 统计学分析 大鼠体重及肾组织的各指标（SOD、CAT、LPO、GSH－Px）均以±s表示，应用SPSS19.0统计软件进行统计学处理，多个样本均数间比较采用方差分析。

2 结果

2.1 大鼠的体重 对照组：大鼠精神状态好、皮毛光滑、体重明显增加、反应灵敏；糖尿病组：大鼠明显消瘦，精神萎靡，毛皮无光泽，反应迟钝。大豆皂甙给药组：大鼠体重、精神状态、毛皮光泽和反应度较对照组差，但明显好于糖尿病组。

2.2 大鼠肾脏超氧化物歧化酶（SOD）含量的检测与对照组比较，糖尿病对照组显著降低（P＜0.01）；大豆皂甙治疗组略微降低无显著差异（P＞0.01），见表1。

2.3 大鼠肾脏过氧化氢酶（CAT）含量的检测 与对照组比较，糖尿病对照组显著降低（P＜0.01）；大豆皂甙治疗组略微降低无显著差异（P＞0.01），见表1。

2.4 大鼠肾脏脂质过氧化物（LPO）含量的检测与对照组比较，糖尿病对照组显著升高（P＜0.01）；大豆皂甙治疗组略微升高无显著差异（P＞0.01），见表1。

2.5 大鼠肾脏谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）含量的检测 与对照组比较，糖尿病对照组显著升高（P＜0.01）；大豆皂甙治疗组略微升高无显著差异（P＞0.01），见表1。

表1 大豆皂甙作用下Wistar大鼠SOD、CAT、LPO和GSH－Px含量的变化（n＝10，±s）Group SOD（U／ml）CAT（U／ml）LPO（nmol·g－1）GSH－Px（U／ml）Control 13.48±0.72 1.44±0.31 284.32±4.17 20.63±1.43 Diabetic model 7.45±0.28＊ 0.83±0.11＊ 487.13±6.49＊ 41.36±2.04＊SS treatment 13.06±0.91△ 1.36±0.25△ 310.13±6.37△ 21.03±1.26△＊P＜0.01，△P＞0.01 compared with control group；

3 讨论

大豆皂甙有降血脂、抗氧化、抑制肿瘤、抗血栓、抗病毒、免疫调节、减肥、调节糖代谢等多种生物活性［8－10］。自由基广泛存在于生物体内，正常条件下对机体起保护作用，消灭体内有害无用的物质，机体内也存在一整套抗氧化系统，消除多余的自由基，自由基可以由体内代谢产生或由外界进入人体内，如果血液中一些“垃圾”和毒素不能及时消除，便会形成自由基，如果环境中的一些有毒物质通过呼吸、皮肤接触而进入人体，也会沉淀成自由基。自由基能破坏机体细胞膜，甚至到切断DNA链，从而加速细胞的衰老，降低机体的免疫功能，甚至起到诱发肿瘤等极坏的作用［11］。目前已经查明能对抗自由基的物质有维生素C、辅酶Q、谷胱甘肽、过氧化氢酶、超氧化物岐化酶（SOD）等。SOD被认为是消除自由基、抗肿瘤、抗衰老、提高机体免疫力、限制炎症等方面最有价值的物质，它是1968年由 Mocord和Fmidovich发现的。超氧化物歧化酶是直接的抗氧化酶，抑制体内脂肪和蛋白质过氧化反应速度提高机体免疫力；过氧化氢酶是过氧化物酶体的标志酶，LPO反应了机体脂质受活性氧／自由基攻击受损的程度［12］。

肾脏有完整的抗氧化酶保护系统，主要有SOD、CAT和GSH－Px等，他们对防御自由基损伤有重要作用。本研究结果表明，大豆皂甙能够提高糖尿病大鼠肾脏SOD和CAT含量，降低LPO和GSH－Px含量，提示大豆皂甙对糖尿病大鼠肾脏自由基防御机能具有一定的保护作用，其具体的调节机制、保护机理是否具有相关性还有待于进一步的研究。

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