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冠心病又称冠状动脉性心脏病，是由于动脉粥样硬化病变造成的白色斑块，而这些斑块渐渐增多造成动脉腔狭窄，使患者的血流受阻，导致心脏缺血，产生心绞痛的一种疾病。随着社会经济的发展以及社会老龄化的来临，冠心病渐渐成为影响人们健康的危险因素，该病的主要诱因是冠状动脉粥样硬化，但是动脉粥样硬化的原因尚未完全清晰［1］。目前医学上对于该病的研究尚在继续，大多医学专家认为它是一种由多因素引起的疾病。而载脂蛋白B基因3'VNTP的多态性在一定程度上和脂质的代谢、心血管等疾病有着较大可能的联系，脂质代谢的变异目前已被证实是造成动脉粥样硬化的因素，而载脂蛋白B基因3'VNTP的多态性很可能是导致冠心病的因素。本文通过检测两组对象的载脂蛋白B基因的3'VNTP等位基因，研究它的多样性与冠心病之间的关系，现将结果报道如下。

资料与方法

1.一般资料:选取的我院2009年1月至2011年6月收治的80例冠心病患者中，男50例，女30例，平均年龄为(50.5±13.3);健康组经体检发现均没有冠心病患者，其中，男60例，女40例，平均年龄为(46.5±10.4)。所选的所有对象没有血缘关系，也无糖尿病、肝病等疾病。

2.方法

(1)标本的采集:采集标本前嘱咐所有受检人员需在空腹的情况下采取静脉血液，血液量为1.5ml到3ml，用2%的络合剂乙二胺四乙酸(EDTA)进行抗凝，采用3%的明胶将白细胞分离出来，经SDS破膜以及乙醇沉淀等多个步骤来将DNA提取出来［2］。

(2)PCR技术:PCR的特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物，PCR由变性－－退火(复性)－－延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至90℃ ～95℃一定时间后，使经过PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链与引物结合;②模板DNA与引物的退火:模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃～60℃，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板－－引物结合物在DNA聚合酶的作用下，于70℃ ～75℃，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性－－退火－－延伸三过程［3］。

(3)对3'VNTP等位基因的判定:在样品的缓冲液中加进10毫升的扩增产物，然后用12%聚丙烯酰胺凝胶电泳观测扩增的结果。通过图片软件判别结果，依据每条DNA段落在凝胶内的泳动距离，以串联重复序列的拷贝数=(片段长度－151bp)/15bp公式计算出等位基因的碱基对数，凭借偶数命名等位基因的原则就能够得到各类基因型。

3.统计学方法:所有数据均采用SPSS12.0数据处理系统，计数资料采取X2检验，数据比较差异具有统计学意义(P＜0.05)。

结 果

1.冠心病组与健康组在临床资料上的比较，见表1。两组调查对象在甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL－C)、脂蛋白a(LP(a))方面具有明显的差异，且冠心病组的TG、Lp(a)明显高于健康组，而在HDL－C上低于健康组。两组在ApoB上没有表现出明显的差异。其中，对低密度脂蛋白(LDL)的处理公式为:LDL=TC－HDL－TG/5。

表1 两组在TC、HDL－C、TG等方面的比较

2.两组载脂蛋白B基因3'VNTP的多态性:经检测发现两组对象的等位基因在分布频率方面体现了呈现双峰型的特点，现在主要根据 HVE32、HVE34、HVE38来对等位基因进行亚组对比研究，结果显示B基因在健康组的出现率低于冠心病组。详见表2(仅是部分数据)。

表2 冠心病组与健康组载脂蛋白B基因3'VNTP等位基因频率分布情况

讨 论

1.载脂蛋白B是低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白的组成要素，和动脉粥样硬化有着极为重要的联系，另一方面动脉粥样硬化是冠心病的主要诱因［4］。同时由于地区的差异，载脂蛋白B基因3'VNTP等位基因分布频率也存在区别。就目前看来，根据许多学者对载脂蛋白B基因的多态性的研究显示，APOB基因的多态性和冠心病的发生有着极为紧密的关系，通过本文对ApoB的基因3'VNTP的分析看，大等位基因的分布频率在冠心病组与健康组间有着明显的差别，说明大等位基因跟ApoB基因的表达调换了，导致血脂代谢出现了紊乱的现象。此次研究说明了大等位基因在一定程度上参与了导致冠心病发生的过程，但是大等位基因是不是一定引起冠心病的发生，还需要进一步研究。

1 张乐，曾艺，杨期东，等.载脂蛋白B基因3'VNTP多态性与长沙地区脑血管病的关系研究［J］.实用预防医学，2005，1(12):57－59.

2 张宏伟，许虹，向辉华，等.湖北恩施土家族地区人群载脂蛋白B基因3'VNTP与患冠心病相关性的临床分析［J］.甘肃医学，2010，4(29):364 －366.

3 顾云，王绿娅，吴桂贤，等.冠心病和脑梗塞患者载脂蛋白B基因多态性研究［J］.中华心血管病杂志，2001，27(1):13 －16.

4 杜珙，薛红，吴刚，等.血浆载脂蛋白B基因3'端可变数目串联重复序列的结构研究［J］.中华医学遗传学杂志，2006，3(23):335－338.