刘家霖，张杰，程功，张国珍，颜丽，张国财＊

（1.东北林业大学，哈尔滨150040；2.吉林省松原乾安林业局，松原131400；3.河北省女子职业技术学院，石家庄 050091）

金针菇〔Flammulina velutipes（Crut.：rF.）Sign.〕又名冬菇、朴菇，担子菌亚门（Basidiomycotina），层菌纲（Hymennomycetes），伞菌目（Agaricales），口蘑科（Tricholoamtaceae），金钱菌属。一般生长于榆树、枫树、杨树、柳树等的枯枝、树桩上［1］。

金针菇具有较高的食、药用价值。含有18种氨基酸，10g干菇中含氨基酸总量达20.9mg，人体必需氨基酸占总量的44%～50%，赖氨酸和精氨酸含量分别达1.024mg和1.231mg，高于一般菇类。由于精氨酸和赖氨酸对促进儿童智力发育十分有益，所以金针菇也被称为“增智菇”［2－3］。

植物纤维；金针菇子实体本含有的酸性和中性植物纤维可吸附胆汁酸盐，调节体内胆固醇代谢，降低血浆中胆固醇的含量，还可促进胃肠蠕动，强化消化系统的功能。

功能蛋白质；金针菇中含有多种功能性蛋白，真菌免疫调节蛋白（FIP）具有抗癌、抗过敏、抗增殖、刺激免疫细胞产生多种细胞因子和免疫调节功能。金针菇中提取到一种叫朴菇素（也叫火菇素）的碱性蛋白质。其对小白鼠艾氏腹水瘤和肉瘤一有很好的抑制作用，

多糖；金针菇菌丝体能产生两种具有很高抗肿瘤活性的多糖，试验表明有较强的抗肿瘤作用。其中的胞内多糖对小鼠肉瘤一的抑制率高达96%，抗肿瘤活性比香菇多糖和云芝都要高。

人们在金针菇的品种选育、深层发酵、保健品开发利用等方面，有了较深入的研究。对激素、生长调节剂在金针菇应用也有了初步探讨［4－7］。但生物磁效应用于金针菇未见报道，用磁处理水拌料栽培食用菌可增产10%～50%，磁处理水能使纤维素酶、脂酶、淀粉酶等酶的活性增加，加速了纤维素、脂肪、淀粉等养分的分解并提高这些养分的利用率。

1 材料和方法

1.1 材料

金针菇菌种：东北林业大学森保学科提供。

主要仪器：可控循环式生物磁化水处理器（本实验室专利产品ZL 2007 2 0117464.6）

1.2 磁处理水拌料栽培金针菇酶活性测定

1.2.1 栽培方法

培养料的基本组成：73%木屑、5%麦麸、1%蔗糖、1%碳酸钙。

磁处理水：0.10T、0.25T、0.40T 的磁处理水（3次）。

用制好的磁处理水按料水之比拌入料中，做到均匀混合，培养料吸水一段时间后，用手紧握料，有1～2滴水从指缝滴出即可。培养料混匀装入500mL罐头瓶中。处理、对照各30个重复，压实擦净后，用非脱脂棉封口并用牛皮纸包扎好，置于121℃高压蒸汽灭菌锅灭菌30min后接种，置25℃恒温箱中下培养。

1.2.2 栽培料粗酶液制备及酶活测定

粗酶液的制备：每隔5天取样一瓶，用100mL pH4.8的0.2M乙酸盐缓冲溶液浸提1h，用4层纱布过滤，滤液经3500r／min离心10min。上清液为粗酶液。

其中愈创木酚氧化酶测定时粗酶液稀释100倍，多酚氧化酶测定时粗酶液稀释20倍。

1.2.2.1 漆酶活力测定［8－9］

先往试管中加入0.1MpH＝4.6的醋酸缓冲液3.4mL，再加入3.36M 的邻联甲苯胺0.5mL，再加入稀释 10 倍 的 粗 酶 液 0.5mL，28℃ 保 温 30min，测600nm处光密度（OD值）以煮沸灭活15min的酶液作对照（3个重复）。

1.2.2.2 多酚氧化物酶活力测定［10－11］

先往试管中加入0.05MpH＝6.0的磷酸盐缓冲液2.0mL，再加入0.1mM 的邻苯二酚2.0mL，再加稀释10倍的粗酶液0.5mL，28℃保温30min，测400nm处光密度（OD值）以煮沸灭活15min的酶液作对照（3个重复）。

1.2.2.3 愈创木酚氧化酶活力测定按文献［12］的方法进行

2 结果与分析

磁处理水拌料栽培金针菇过程中的金针菇胞外酶；漆酶、多酚氧化物酶、愈创木酚氧化酶的活性变化，测得数据及图表如下。

2.1 漆酶活性

表1 栽培阶段金针菇漆酶活性

图1 栽培阶段金针菇漆酶活性变化趋势

从表1、图1可知：0.25T处理组的漆酶活性要最高可达8.9U，比0.10T 处理组提高了4.49%，比0.40T处 理 组 提 高 了 13.48%，比 对 照 提 高 了11.25%。0.25T、0.10T处理组在13天便达到活性顶点。0.40T处理组和对照组到15天才达到活性顶点。

2.2 多酚氧化物酶活性

表2 栽培阶段金针菇多酚氧化物酶活性

图2 栽培阶段多酚氧化物酶活性变化趋势

从表2、图2可知：0.25T处理组的多酚氧化物酶活性要最高可达14.4U，比0.10T处理组提高了6.25%，比0.40T处理组提高了11.11%，比对照提高了9.03%。0.25T、0.10T处理组在11天之前达到活性顶点。0.40T处理组、比对照13天之前达到活性顶点。

2.3 愈创木酚氧化酶活性

表3 栽培阶段金针菇愈创木酚氧化酶活性

图3 栽培阶段愈创木酚氧化活性变化趋势

从表3、图3可知：0.25T处理组的愈创木酚氧化酶活性最高可达16.0U，比0.10T处理组提高了10.63%，比0.40T处理组提高了20.00%，比对照提高了17.50%。0.25T、0.10T处理组在11天之前达到活性顶点。0.40T处理组、对照组13天之前达到活性顶点。

3 结论与讨论

3.1 本试验金针菇液体菌种的3（A、B、C）个配方，分别用0.10T、0.25T、0.40T的3个磁场强度、3次切割磁场的磁处理水（以下磁处理水均为3次切割磁场）制备金针菇液体菌种（玉米粉2%、蛋白胨1%、KH2PO40.3%、MgSO40.05%、可溶性淀粉3%）。在28℃、180r／min条件下进行摇床培养。0.25T3次切割磁场的磁处理水可以应用于生产实践。

3.2 用0.25T磁处理水拌料培养料栽培，可以使漆酶多酚氧化物酶愈创木酚氧化酶活性提高于。漆酶、多酚氧化物酶是分解木质素的酶，栽培阶段较高漆酶、多酚氧化物酶活性可以使培养料中的木质素得到充分利用，可以提高生物转化率，提前结实。

3.3 利用磁处理水制备液体培养基，究竟是源于小分子团水的哪些活性才对金针菇液体菌种产生影响，以及怎样促进金针菇生理生化方面的变化。这种影响有待于进一步的研究。

3.4 磁处理水能使某些胞外酶等的活性增加，是否激活新的酶更有待进一步验证。

3.5 如何制备磁处理水，使之磁效应更加显著是我们今后重点探索的内容。

［1］ 张雪岳.食用菌学［M］.重庆：重庆大学出版社，1984.

［2］ 魏华，谢俊杰，吴凌伟，等，金针菇的营养保健作用［J］.食用菌学报，1995，2（1）：59－64.

［3］ www.tjagri.net／zjxt／jinzhengu／link｝shiy／syindex.htm.

［4］ 何立敏.赤霉素（GA3）对金针菇产量的影响［J］.河池师专学报（理科），1994，14（3）：104－105，19.

［5］ 张占甲，陈坤明，李仲芳.激素与营养液配施对金针菇生育的影响［J］.食用菌，1994 16（2）：3－5.

［6］ 刘胜贵.植物生长调节剂对金针菇生长发育的影响［J］.怀化师专学报，1998 17（2）：44－46.

［7］ 赵士杰，李树林.植物生长调节剂对金针菇菌丝生长的影响［J］.内蒙古农牧学院学报，1995，16（2）：111－114.

［8］ 马立芝.杏鲍菇液体菌种培养及贮藏工艺的研究［D］.北京：中国农业大学，2005.

［9］ 马立芝.杏鲍菇液体菌种培养条件的研究［J］.食用菌，2005（3）：19－21.

［10］ 曾荣鉴.碳源和氮源对平菇菌丝胞外酶的诱导作用［J］.食用菌，1992（1）：17－18.

［11］ 潘迎捷，陈明杰，汪昭月，等.香菇菌丝生长中多酚氧化酶的动态变化［J］.食用菌，1990（3）：4－6.

［12］ 潘裕添，林志超，林娇芬，等.糙皮侧耳裂殖过程中几种碳源胞外酶系活性变化规律的研究［J］.漳州师范学院学报（自然科学版），2005（4）：73－77.