樊月圆，廖国周，张红兵，苏子峰，王桂瑛，程志斌*，廖启顺，刘绍贵

（1.云南农业大学，昆明 650201；2.云南西南集团，昆明 650224；3.大理学院农学与生物科学学院，云南 大理 671003；4.云南农业职业技术学院，昆明 650031；5.云南省种畜场，昆明 650212）

大量试验研究表明，枯草芽孢杆菌（Bacillus Subtilis）是替代饲用抗生素的畜禽安全饲料添加剂之一[1－8]。针对我国肉鸡养殖业相对落后的云南省存在大量地面平养的实际情况，曾开展日粮添加枯草芽孢杆菌对不同饲养方式（地面平养或笼养）肉鸡生长性能影响的初步研究，结果显示，无论是地面平养还是笼养方式，枯草芽孢杆菌替代抗生素对改善肉鸡的生长性能有良好效果，良好的生长性能取决于肉鸡对饲料营养物质的充分消化吸收与高效代谢利用[9－18]。已有报道证明，在笼养条件下，枯草芽孢杆菌能够补充畜禽肠道多种内源酶不足，从而综合提高畜禽对饲料营养物质的消化与利用[1,5,19－21]。然而，以地面平养为代表的肉鸡传统散养模式，与现代化规模养殖的笼养模式相比，肉鸡的生产性能和健康状况差异很大[13]。因此，在环保养殖与安全饲料及饲料添加剂使用日益被提倡的今天，深入研究枯草芽孢杆菌改善肉鸡、尤其是地面平养肉鸡生长性能的作用机理十分必要，这对当前云南省地面平养肉鸡的生产实际有科学指导意义[22－24]。

1 材料与方法

1.1 试验动物与试验设计

选择1日龄罗斯肉鸡308（ROSS 308）240只，按照饲养方式（地面平养或笼养）和枯草芽孢杆菌的添加不同，分4个处理组，试验设计见表1。每个处理组设6个重复，每个重复10只，公母各半。

表1 试验设计

1.2 试验日粮

参考中国农业部标准《鸡饲养标准（NY/T 33－2004）》并结合云南省肉鸡养殖实际情况配制1～21和22～42日龄肉鸡试验饲粮，基础饲粮组成及营养水平见表2。处理组1和2肉鸡饲粮添加抗生素金霉素，遵守农业部发布的《饲料药物添加剂使用规范》；处理组3和4使用枯草芽孢杆菌（由云南师范大学生命科学学院提供）替代抗生素，添加量为5×1011cfu·kg－1全价饲粮。试验饲粮均不添加饲用植酸酶制剂，65℃低温加工成颗粒饲料。

表2 基础日粮组成及营养水平

1.3 饲养管理

笼养采用3层重叠式肉鸡笼（1.65 m×0.70 m×0.45 m），水泥地面平养为每个重复1个小圈，放置食料桶和饮水桶。所有试验鸡均饲养于同一有窗鸡舍内，专人负责饲养试验。自然光照辅以人工照明，光照时间22 h。按常规免疫程序进行免疫。试验在云南农业大学试验鸡场进行，从2012年5月3日开始，试验期42 d。

1.4 测定指标

测定体重、饲料消耗量，统计死亡肉鸡数量，计算平均日增重、平均日采食量、饲料增重比等生长性能指标[13]。采用Cr2O3指示剂法，在试验肉鸡36～42日龄进行饲料营养物质的表观代谢率研究，具体方法参考丁雪梅等报道[25]。试验肉鸡42日龄早晨空腹称重后，每个重复，随机抽取1只健康肉鸡，进行心脏采血。制备血清后，用全自动生化分析仪（Olympus Au600型）测定血液生化指标。分析测定在云南省动物营养与饲料科学重点实验室完成。

1.5 统计分析

试验数据采用SPSS统计软件进行两因素方差分析和多重比较，结果以“平均值±标准误”表示。

2 试验结果

2.1 枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉鸡生长性能的影响

枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉鸡生长性能的影响见表3。

表3 枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉鸡生长性能的影响

由表3可见，处理组4肉鸡末体重、平均日增重、饲料增重比等指标，显著优于处理组1（P＜0.05），处理组2和3差异不显著（P＞0.05）。试验全期所有处理组肉鸡的采食量无差异（P＞0.05）。枯草芽孢杆菌、饲养方式及其互作显著影响饲料增重比（P＜0.05）。

2.2 枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉鸡饲料营养表观代谢率的影响

枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉鸡饲料营养表观代谢率的影响见表4。

表4 枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉鸡饲料营养表观代谢率的影响

由表4可见，枯草芽孢杆菌、饲养方式及其互作显著影响肉鸡对饲料粗蛋白质的表观代谢率（P＜0.05），处理组4优于处理组2（P＜0.05）；处理组2优于处理组1和3。枯草芽孢杆菌显著影响饲料磷的表观代谢率（P＜0.05），处理组4肉鸡对饲料磷的表观代谢率数值最大。饲养方式显著影响代谢能的表观利用率（P＜0.05），处理组2和4笼养肉鸡显著优于处理组1和3地面平养肉鸡（P＞0.05）。

2.3 枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉鸡血清生化指标的影响

枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉鸡血清生化指标的影响见表5。由表5可见，枯草芽孢杆菌显著影响肉鸡血清尿酸和血糖的浓度（P＜0.05），处理组2和4肉鸡血清尿酸浓度显著低于处理组1（P＜0.05）；血糖浓度指标，处理组4肉鸡显著低于处理组1和3（P＜0.05）。枯草芽孢杆菌、饲养方式及其互作显著影响肉鸡血清白蛋白的浓度（P＜0.05），处理组4优于处理组1，处理组2和3差异不显著（P＞0.05）。

表5 枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉鸡血清生化指标的影响

3 讨论

3.1 枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉鸡生长性能的影响

在试验全期所有处理组肉鸡的采食量无显著差异基础上，枯草芽孢杆菌、饲养方式及其互作显著影响肉鸡的饲料增重比。总体而言，采食添加枯草芽孢杆菌饲粮的处理组3和4肉鸡饲料增重比，优于饲用抗生素组的处理组1和2肉鸡；其中，以笼养方式的处理组4肉鸡饲料增重比最佳。说明无论是地面平养还是笼养方式，枯草芽孢杆菌替代抗生素对改善肉鸡的生长性能有良好效果。此外，由于本次试验在昆明地区5～6月气温适宜（17～25℃）的时候进行，且本试验饲养密度较前期试验饲养密度低，因此总体上本次试验的饲料增重比和死亡率指标均优于前期试验[13]。

3.2 枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉鸡饲料营养利用率的影响

肉鸡良好的生长性能取决于对饲料营养物质的充分消化、吸收与利用，采用Cr2O3指示剂法测定的营养物质表观代谢率能够客观反映肉鸡对饲粮的消化与利用状况[25－27]。本试验采用了玉米－豆粕型饲粮，排除了基础饲料原料对本试验的干扰。本试验结果显示，枯草芽孢杆菌、饲养方式及其互作显著影响饲料粗蛋白质的利用率。总体而言，使用枯草芽孢杆菌饲粮的处理组3和4肉鸡对饲料粗蛋白质的利用率高于饲用抗生素组的处理组1和2的肉鸡；以笼养方式的处理组2和4的肉鸡对饲料粗蛋白质的利用率高于地面平养组的处理组1和3的肉鸡；尤其是处理组4肉鸡的粗蛋白质利用率最高。这些结果与表3肉鸡生长性能的结果基本一致，充分说明饲粮添加枯草芽孢杆菌有利于提高肉鸡对饲料蛋白质的利用率，从而改善肉鸡的生长性能，且在笼养肉鸡上的使用效果显著优于地面平养肉鸡。研究结果也印证了过去关于枯草芽孢杆菌具有补充或维持动物肠道多种消化酶，提高营养利用率，改善畜禽生长性能的机理[1,5,19－21]。在所有试验饲料没有添加植酸酶的条件下，处理组4肉鸡对饲料磷的表观代谢率数值最大，说明饲粮添加枯草芽孢杆菌具有改善肉鸡对饲料磷利用率的作用。这印证了过去关于枯草芽孢杆菌具有分泌植酸酶的功能，对畜禽提高饲料磷利用率，降低养殖环境污染有积极意义[1,5,8]。也提示饲粮中使用枯草芽孢杆菌可以适当降低日粮无机磷的添加量，但降低幅度有待于进一步试验探讨。

此外，本次试验没有发现枯草芽孢杆菌对饲料代谢能、粗脂肪、粗纤维利用率的改善效果，其原因可能与本次试验的饲粮营养水平一致以及低纤维、高消化率的优质基础饲料原料（玉米、豆粕、鱼粉）选择有关。

3.3 枯草芽孢杆菌对地面平养和笼养肉鸡血清生化指标的影响

血液生化指标是反映畜禽体内物质代谢变化和组织机能状态变化的指标物，可以作为机体营养代谢利用、应激、健康状态的综合表征[28－32]。血清总蛋白包括白蛋白与球蛋白，血清白蛋白由肝脏合成，是机体蛋白质营养需求的主要来源，用于修补组织器官和提供能量，还具有维持血浆渗透压及作为其他营养物质的载体等多种功能[29－30]。本试验结果显示，枯草芽孢杆菌、饲养方式及其互作显著影响肉鸡血清白蛋白的浓度，这一结果与肉鸡对饲粮蛋白质的利用率结果相符。处理组4肉鸡的血清白蛋白浓度最高，主要因为在笼养条件下，采食添加枯草芽孢杆菌饲粮的肉鸡摄入更多的饲料蛋白质，且主要用于生长发育，因此处理组4肉鸡生长性能最佳。

尿酸是禽类动物体内氨基酸及核苷酸等含氮化合物代谢的终产物，也是禽类动物排出体内多余氨，维持机体正常机能的重要方式之一[29]。饲粮粗蛋白质水平、饲粮氨基酸平衡状况、动物的生理代谢、健康状况等多种因素，综合影响禽类血清尿酸浓度。一般认为，较低血清尿酸浓度表征禽类对饲料蛋白质和氨基酸的良好代谢利用，有利于禽类的生长发育和健康状况[29]。本试验在饲粮营养水平和饲养条件一致的前提下，处理组4肉鸡的血清尿酸浓度最低，结合处理组4肉鸡对饲料蛋白质最佳的利用率结果，说明枯草芽孢杆菌促进了肉鸡对饲料蛋白质的消化率，减少氮排放，增加机体蛋白质的沉积，从而改善了生长性能。

血清中葡萄糖、甘油三酯和总胆固醇反映了畜禽对饲料糖类、脂质营养物质的利用及其在相关机体组织内的代谢综合情况，这些指标易受到饲粮营养水平（尤其是氨基酸种类、含量）、饲料原料选择（谷物、油脂等能量饲料）、血清激素水平（主要是甲状腺素、胰岛素、胰高血糖素、生长激素、糖皮质激素等）、肝脏脂质相关代谢酶（脂肪酸合成酶、乙酰辅酶A羧化酶、激素敏感性甘油三酯脂酶、肝脂酶、脂蛋白脂酶等）、动物健康状况等多种因素影响[26,29－30]。本试验结果显示，枯草芽孢杆菌显著影响肉鸡血糖浓度，处理组4肉鸡血糖浓度显著低于处理组1和3。推测是由于枯草芽孢杆菌增加了饲料蛋白质和氨基酸的摄入量，血液中较高浓度的蛋白质和（或）氨基酸浓度，激发了甲状腺素和（或）胰岛素分泌。这两种激素均有增加血清蛋白质向机体组织沉积以及适当降低血糖浓度的作用，以符合机体组织正常对营养物质及能量的代谢需求。当然，这一推测有待于进一步试验分析相关的指标。

此外，本试验没有发现枯草芽孢杆菌对饲料粗脂肪利用率和肉鸡血清甘油三酯及胆固醇浓度的影响，这可能与肝脏脂质相关代谢酶的活性有关。

4 小结

本试验证明，无论是传统的肉鸡地面平养方式还是现代的规模化肉鸡笼养方式，添加枯草芽孢杆菌微生态制剂，均可以安全高效的替代饲用抗生素，改善肉鸡生长性能，其作用机理主要是提高饲料蛋白质的消化和代谢利用率。

[1]鲍振国,张文举,胡猛,等.芽孢杆菌的研究进展及其在动物生产中的应用[J].饲料博览,2012（1）:17－20.

[2]周映华,周小玲,吴胜莲,等.不同剂量枯草芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能及腹泻的影响[J].饲料博览,2012（4）:29－31.

[3]赵晨,李静,韩安宁,等.芽孢杆菌制剂对麻鸡生长性能的影响[J].饲料博览,2010（7）:35－36.

[4]杨光宇.枯草芽孢杆菌在畜禽生产中的应用[J].饲料博览,2012（2）:41－43.

[5]侯玉洁,侯小辉,张建刚.芽孢杆菌类微生态制剂在动物生产中的应用[J].饲料博览,2012（3）:37－40.

[6]陆银,郑曦,赵国琦.芽孢杆菌在仔猪生产中的应用[J].饲料博览,2012（4）:9－12.

[7]张红兵,苏子峰,程志斌,等.仔猪断奶过渡料粗蛋白水平和添加枯草芽孢杆菌对仔猪生长性能的影响[J].饲料博览,2011（3）:4－7.

[8]王爱娜,冯雪云.益生菌对猪肠道微生物的调节及其对生产性能的影响[J].饲料博览,2011（10）:18－20.

[9]程志斌,廖启顺,张红兵,等.复合非淀粉多糖酶对肉鸡肉品质的影响[J].西南农业学报,2012,25（2）:691－696.

[10]程志斌,廖国周,樊月圆,等.复合非淀粉多糖酶对肉鸡的肌肉品质影响的研究[J].畜牧与兽医,2012,44（3）:30－34.

[11]苏子峰,张红兵,樊月圆,等.丝兰提取物与枯草芽孢杆菌对肉鸡生长性能及鸡舍有害气体的影响[J].饲料博览,2012（6）:1－5.

[12]程志斌,张红兵,苏子峰,吴政明.非淀粉多糖酶制剂对肉鸡肉用性能的影响[J].安徽农业科学,2011（18）:11 119－11 121.

[13]廖国周,苏子峰,张红兵,等.枯草芽孢杆菌饲料添加剂对笼养和地面平养肉鸡生长性能的影响[J].饲料博览,2011（10）:1－4.

[14]程志斌,张红兵,黄遵锡,等.几种商业非淀粉多糖酶制剂对肉鸡肠道及内容物消化酶的影响[J].家畜生态学报,2011,32（2）:64－68.

[15]苏子峰,陈爱民,张红兵,等.复合非淀粉多糖酶与植酸酶组合使用对肉鸡生长性能和氮、磷消化率的影响[J].饲料博览,2012（3）:1－4.

[16]程志斌,张红兵,苏子峰,等.非淀粉多糖酶对肉鸡肠道消化酶的影响[J].云南农业大学学报（自然科学）,2011,26（6）:781－785.

[17]Cheng Z B,Li D F,Xing J J,et al.Oral administration of spermine advances intestinal maturation in sucking piglets[J].Animal Sci⁃ence,2006,82（5）:621－626.

[18]程志斌,苏子峰,张红兵,等.复合非淀粉多糖酶制剂对肉鸡生长性能及肠道酶活性的影响[J].饲料工业,2011,32（16）:26－30.

[19]徐海燕,张志焱,曹银生,等.枯草芽孢杆菌所产细菌素的理化性质及抑菌谱的研究[J].饲料博览,2010（4）:29－32.

[20]张庆丽,张志刚,胡志松.酶制剂与益生素组合作用原理的研究[J].饲料博览,2011（10）:43－45.

[21]林谦,戴求仲,蒋桂韬,等.益生素与其他饲料添加剂配伍使用研究进展[J].饲料博览,2011（1）:46－49.

[22]程志斌,李晓珍,廖启顺,等.畜禽环保型饲料开发的必要性[J].饲料博览,2011（1）:15－17.

[23]程志斌,李晓珍,苏子峰,等.解读农业部公告（第1224号）《饲料添加剂安全使用规范》[J].饲料工业,2011（3）:59－63.

[24]程志斌,李晓珍,廖启顺,等.畜禽环保型饲料的研发思路[J].饲料研究,2011（3）:78－80.

[25]丁雪梅,张克英,王亮,等.三聚氰胺在肉鸡体内的消化代谢及其对饲粮养分利用率和流通速率的影响[J].动物营养学报,2011,23（8）:1 394－1 401.

[26]Kalmendal R,Tauson R.Effects of a xylanase and protease,indi⁃vidually or in combination,and an ionophore coccidiostat on per⁃formance,nutrient utilization,and intestinal morphology in broiler chickens fed a wheat－soybean meal－based diet[J].Poultry Sci⁃ence,2012,91（6）:1 387－1 393.

[27]张红兵,黄遵锡,程志斌,等.几种商业非淀粉多糖酶制剂对肉鸡消化器官的研究[J].饲料博览,2011（2）:5－7.

[28]Cheng Z B,Li D F,Ge C R,et al.Polyamines in sow colostrum and milk at different stages of lactation[J].Animal Science,2006,82（1）:95－99.

[29]Woyengo T A,Slominski B A,Jones R O.Growth performance and nutrient utilization of broiler chickens fed diets supplemented with phytase alone or in combination with citric acid and multicar⁃bohydrase[J].Poultry Science,2010,89（10）:2 221－2 229.

[30]姚浪群,萨仁娜,佟建明,等.安普霉素对仔猪内分泌的调控作用及血液生化指标的影响[J].动物营养学报,2003,15（2）:58－64.

[31]张红兵,苏子峰,程志斌,等.日粮添加霉菌毒素吸附剂对肉鸡生长性能影响的研究[J].饲料博览,2011（6）:1－4.

[32]Junbo L,Defa L,Yin Y L,et al.Performance,nutrient digestibili⁃ty and intestinal disaccharidase activity of weaner/grower pigs giv⁃en diets containing extruded Chinese stored brown rice with exog⁃enous enzyme supplements[J].Aniaml Science Abstract,2004,79:429－438.