惠娜娜 李继平 王 立 马永强 李建军 周天旺 李青青

（甘肃省农业科学院植物保护研究所，甘肃兰州 730070）

马铃薯粉痂病是由马铃薯粉痂菌（Spongospora subterranean）引起的真菌性病害，世界上许多地区都有发生。我国内蒙古、广东、贵州、江西、浙江、云南等地均有报道，20世纪60年代甘肃省陇南市也发现了马铃薯粉痂病。笔者2008～2011年在渭源县会川试验田收获期马铃薯块茎调查中发现，一般田块马铃薯粉痂病病薯率在5%～20%，重病田病薯率在90%以上。由于马铃薯粉痂病主要是土壤带菌，土壤中病菌的检测和定量成为解决这一病害的首要问题。国外对马铃薯粉痂病菌的检测研究较多，Flett（1983）提出了以番茄幼苗作为诱饵检测土壤中的马铃薯粉痂病菌，随后Merz（1989）、Wale 等（1993）也报道了番茄诱饵法，这种方法非常灵敏，微量的土壤就可检出。国内对马铃薯粉痂病菌检测研究较少，本试验利用番茄幼苗对土壤中马铃薯粉痂病菌情况进行了检测，以期为该病害的防治提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试番茄（Lycopersicon esculentumMill.）品种为阳光908，市售。乳酚油：苯酚结晶（加热融化）20 mL、乳酸20 mL、甘油40 mL、水20 mL。酸性品红：高级纯70%。

1.2 试验设计

试验在甘肃省定西市渭源县会川镇进行，位于甘肃省中部，海拔2 300 m 左右，气候阴湿，昼夜温差大，年平均气温4.7 ℃，年降水量650 mm，无霜期130 d 左右。试验地为半阴坡地，土壤为黑麻垆土，肥力中等。

试验共设4 个处理（表1），每处理3 次重复。

表1 试验设计

1.3 土壤样品的采集

采用五点采样法，于2011年4月上旬在每个试验小区采集0～10 cm 越冬土壤，装入布袋子，编号，将土样带回实验室混匀备用。将采集的土壤倒入钢盘，压平，挑出石子，筛平划对角线，取对角的两部分土，继续筛平，再取对角线的两部分土，重复多次后，混匀筛平称取1 g 干土，其余的土壤装起来放入冰箱备用。

1.4 番茄幼苗诱饵法

1 g 土壤加入到1 000 mL 0.3%的水琼脂中配成土壤液。将培育50 d 的健康番茄幼苗移栽到装有灭菌蛭石的育苗钵中，每株番茄幼苗加10 mL 土壤液，每个处理20 株，室温下培育，7 d浇1 次营养液，30 d 左右检查番茄根系，镜检（Flett，1983）。

2 结果与分析

2.1 马铃薯重茬土壤中的粉痂病菌

利用番茄幼苗检查马铃薯一年茬及空茬（蚕豆茬）0～10 cm 土壤中马铃薯粉痂病菌，结果发现：蚕豆茬土壤培育的番茄苗植株生长正常，根系未见瘤状物，显微镜镜检未发现粉痂病菌休眠孢子囊；一年茬土壤培育的番茄苗植株生长不整齐，植株矮化，根系肿大（图1-a），显微镜下镜检发现粉痂病菌休眠孢子囊（图1-b）。

图1 粉痂病菌侵染番茄根系症状及根系组织中粉痂病菌休眠孢子囊

2.2 马铃薯重茬土壤中的番茄粉痂病病株率

马铃薯一年茬、两年茬、三年茬土壤培育的番茄苗，植株有不同程度的矮化，根系肿大、有瘤状物，番茄粉痂病病株率分别为82.35%、100.00%、100.00%（表2）。

表2 马铃薯重茬土壤中番茄粉痂病病株率

3 结论与讨论

国外对粉痂病菌的研究较多，土壤带菌量的检测方法已经从20世纪90年代的诱饵法到ELISA 法（Harrison et al.，1994；Wallace et al.，1995），到现在的PCR 技术（Bell，1998；Qu et al.，2000；van de Graaf et al.，2003），定量检测土壤中粉痂病菌既快速又精确。国内对马铃薯粉痂病菌的研究较少，主要集中在病害的发生与防治方面（杨艳丽 等，2007；余光海 等，2008）。惠娜娜等（2009）对马铃薯粉痂病病原菌及其在甘肃省会川的发生情况作了报道。本试验以番茄幼苗作为诱饵，检测马铃薯重茬土壤中的粉痂病菌，结果发现土壤中粉痂病菌繁殖体与连作年限有关。但由于番茄幼苗诱饵法只能检测到土壤中粉痂病菌活的游动孢子，对休眠孢子无法检测到，所以还不能完全代表土壤中粉痂病菌繁殖体的数量，对于连作土壤中粉痂病菌的定量检测和总体数量变化有待进一步研究。

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