毕丽荣,杨 明,王悦增,茅淑砚

(1.吉林大学白求恩第一医院病理科;2.吉林大学白求恩第一医院乳腺外科;3.吉林大学病理生物学教育部重点实验室,吉林长春 130021）

环氧合酶(Cyclooxygenase,COX）是催化花生四烯酸转化为前列腺素的重要限速酶,它有2种同工酶:COX-1和COX-2。COX-1在大多数组织中均有表达,参与机体正常的生理功能,如保护胃黏膜,控制血小板聚集等;COX-2静息时并不表达,但在细胞因子、生长因子、癌基因等刺激因子的作用下可被诱导表达。近年来研究表明,COX-2在多种肿瘤组织中过度表达,通过多种机制参与肿瘤的发生、发展和转移[1]。我们应用免疫组化的方法检测了乳腺癌组织中COX-2的表达,并探讨其与临床病理指标的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2007年8月-2009年5月在吉林大学第一医院行乳腺癌改良根治术,并经病理证实的肿瘤石蜡标本46例,均为浸润性癌,术前均未行化疗或放疗及内分泌治疗。同时取距癌旁2cm患者正常乳腺组织10例,乳腺良性病变10例作为对照。本组病例均为女性,年龄23岁-69岁,平均年龄48.5岁。病理类型:浸润性导管癌35例,浸润性小叶癌3例,其他类型浸润性癌8例。肿瘤分期:Ⅰ期8例、Ⅱ期30例、Ⅲ期8例。雌激素受体(ER）阴性18例、ER阳性28例。孕激素受体(PR）21例、PR阳性25例。HER-2阳性14例,HER-2阴性32例。所有病例均无非甾体类抗炎药和糖皮质激素长期用药史。

1.2 方法

组织经10%的甲醛固定,常规石蜡包埋,组织切片厚4 μ m,免疫组织化学检测所用兔抗人COX-2单克隆抗体及SP通用试剂盒均购自福州迈新生物制品有限公司,工作浓度为1∶100。采用免疫组化SP法,高温修复抗原,操作严格按照试剂盒说明进行,并用PBS代替一抗作为阴性对照。用已知肺癌阳性标本作阳性对照。

1.3 COX-2的评定标准

COX-2的免疫组化染色以细胞浆内出现棕黄色颗粒为阳性表达。COX-2采用半定量记分法,根据切片阳性细胞率和阳性细胞着色强度分别记分,胞浆内或(和）核膜呈棕黄色者为阳性,无细胞染色记0分,＜10%为1分,10%-50%为2分,50%-80%为3分,＞80%为4分;着色强度:阴性为0分,弱阳性为1分,阳性为 2分,强阳性为3分,以上两项之乘积小于6分为阴性表达,6-12分为阳性表达。

1.4 统计学处理

应用SPSS13.0统计软件进行 χ2检验,以P＜0.05为有统计学意义。

2 结果

2.1 COX-2的表达情况COX-2免疫组化染色主要定位于细胞浆,(见图1）本组46例乳腺癌标本中29例呈COX-2阳性表达,阳性表达率为63%;10例良性病变中有1例阳性表达,阳性表达率为10%,10例癌旁正常组织中有1例呈阳性表达。乳腺癌组织和良性病变以及癌旁组织中COX-2表达率相比均有显著性差异(P＜0.01）。(见表1）,而良性病变和癌旁组织之间无差异。

图1 COX-2主要在胞浆表达(200×）

表1 COX-2在乳腺癌、乳腺良性病变及癌旁组织的表达

2.2 COX-2表达与乳腺癌临床病理指标之间的关系COX-2在乳腺癌组织中的表达与年龄、肿瘤大小、ER、PR等无关,与HER-2阳性和淋巴结转移有关(p＜0.01）。(见表2）

表2 COX-2表达与乳腺癌临床病理指标的关系

3 讨论

本组研究46例乳腺癌标本中,有29例呈COX-2阳性表达,阳性表达率为63%(29/46）。10例癌旁组织中,1例呈阳性表达,表达率为10%(1/10）,10例良性病变中阳性表达率也为10%,癌组织和癌旁及良性病变中的表达有显著性差异(P＜0.01）,而癌旁组织和良性病变之间没有差异。与文献报道[2-5]结果相似。这一结果提示了COX-2参与乳腺癌的发生、发展,也可以间接作为判断良恶性的指标之一。Shim等[6]研究表明,COX-2在DCIS中高表达,并提示COX-2是乳腺癌早期事件,在乳腺癌的早期即发挥作用。目前认为COX-2促进乳腺癌发生和发展的机制有:促进肿瘤细胞增殖,抑制肿瘤细胞凋亡,促进肿瘤新生血管形成等[7,8]。由于COX-3在乳腺癌的原位癌和浸润癌阶段都过表达,明显高于周围正常组织和良性病变,因此其可以作为肿瘤治疗的靶点之一,在乳腺癌的各个阶段应用抑制剂都有可能抑制肿瘤的生长和侵袭,改善患者的预后。

目前HER-2已被公认为与乳腺癌发生发展密切相关的原癌基因,参与调控细胞生长、增殖及分化,其产物过度表达常提示肿瘤恶性程度高,临床预后差[9]。本组病例的结果显示,COX-2的表达和HER-2表达明显相关(＜0.05）,与文献报道[2,3,5]结果相似,提示COX-2有可能和HER-2一样成为判断预后的指标之一。

淋巴结转移状况是判断乳腺癌预后的最重要的指标。Ristimaki等[10]对1576例浸润性乳腺癌标本研究后证实,COX-2的表达与腋淋巴结转移呈正相关。本研究显示COX-2在乳腺癌组织中的表达与肿瘤大小,ER、PR等无关,而与HER-2阳性表达以及与淋巴结转移有关,特别是与淋巴结转移显著相关:淋巴结阳性组COX-2的阳性表达率为75%,而淋巴结阴性组COX-2的阳性表达率为仅为35.7%,两组差异显著(p＜0.01）,与Ristimaki等的研究结果相同,提示其可以作为判断乳腺癌预后的有用指标。

2002年ASCO会议曾提出将COX-2作为一个新的乳腺癌治疗和预防的靶点[11]。最近已有研究表明[12],COX-2的选择性抑制剂-塞来昔布(Celecoxib）可以提高内分泌治疗的效果。相信随着研究的进展,不论是在乳腺癌的诊断、预后判断,还是在靶向治疗上,COX-2都是一个有用的指标。

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