寇晋萍，方 颖，余 立，王俊秋（北京市药品检验所，北京市 100035）

哌拉西林属青霉素类广谱抗生素，通过干扰细菌细胞壁的合成而起杀菌作用，主要用于铜绿假单胞菌和各种革兰阴性杆菌所致的感染。但哌拉西林易被细菌产生的β-内酰胺酶水解而产生耐药性；舒巴坦除对奈瑟菌科和不动杆菌有抗菌活性外，对其他细菌无抗菌活性，但是舒巴坦对耐药菌株产生的β-内酰胺酶具有不可逆性的抑制作用，因此可防止耐药菌对青霉素类和头孢菌素类抗生素的破坏，与青霉素类和头孢菌素类具有明显的协同作用[1]。注射用哌拉西林钠/舒巴坦钠作为一种能有效降低细菌耐药作用，且具有良好协同作用的复方广谱抗生素制剂，在临床上被广泛应用，但随之而来的是其不良反应日益显现[2]。该品种在北京地区也有若干生产企业产品在售，为有效监控药品质量，保证用药安全，并为临床医师选择药品提供依据，2010年北京市药品监督管理局对注射用哌拉西林钠/舒巴坦钠进行了评价性抽验。本次抽验，从各医疗机构及经营企业共得到4个生产企业的21批次样品，涵盖1.25、1.5、2.5、3.0 g 4种规格。笔者分别按现行法定标准及非标文献[3]方法进行了质量考察，详细如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

LC-20A高效液相色谱（HPLC）系统，包括LC-20AT泵、SIL-20AC自动进样器、CBM-20A控制器、SPD-M 20A检测器、CTO-20A柱温箱及LC-Solution工作站（日本岛津公司）；BP211D电子天平（德国Sartorius公司）。

1.2 试药

哌拉西林标准品（批号：130419-200103，纯度：90.5%）、舒巴坦标准品（批号：130430-200906，纯度：89.7%）均由中国食品药品检定研究院提供；乙腈、甲醇均为色谱纯，四丁基氢氧化铵、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、醋酸、磷酸均为分析纯；注射用哌拉西林钠/舒巴坦钠由国内A、B、C和D企业生产，具体情况详见表1。

表1 样品概况Tab 1 General information of samp les

2 方法与结果

2.1 采用现行标准的检验情况

注射用哌拉西林钠/舒巴坦钠各国药典均未收载，因此没有统一的法定标准。目前国内批准生产的企业有8家，批准文号17个，各自有相应的国家药品标准。本次抽验涉及4个生产企业、5个批准文号，对应使用5个国家药品标准检验，检验标准[4～8]的比较详见表2；各标准设置的检验项目和方法基本一致，限度要求略有差异，经分别检验后，具体结果详见表3（注：所有批次的鉴别（液相色谱、钠盐）及一般检查项目（酸度、溶液的澄清度与颜色、平均装量、可见异物、不溶性微粒、无菌、热原、细菌内毒素等）均符合规定，故在表中未列出；Y4、YG4、Y3、YG3指标准比色编号）。

经检验，所有批次的样品均符合现行质量标准。

2.2 采用非标文献方法的检验情况

哌拉西林为β-内酰胺类抗生素，该类化合物由于结构中含有β-内酰胺环，非常容易开环而形成开环物，造成分子间和分子内的聚合而形成高分子聚合物。研究[9]显示，β-内酰胺类抗生素引发的速发型过敏反应与药物中存在的高分子杂质有密切的关系，其含量的高低与临床不良反应发生率相关性很高。通过对药品中高分子杂质的控制，可以有效减缓速发型变态反应第2阶段的进行，减少临床不良反应的发生[10]。β-内酰胺类抗生素中存在的高分子杂质主要包括外源性高分子杂质（主要为生产过程中引入的蛋白类或肽类大分子物质）和内源性高分子杂质（即聚合物）2大类，外源性的高分子杂质可以通过控制生产原料有效排除，因此控制聚合物这类高分子杂质的含量是降低过敏反应发生率的有效手段。现行检验标准中有关物质的检查方法均不能有效地检测到聚合物这类高分子杂质，因此现采用王成刚等[3]建立的高效分子排阻色谱法考察注射用哌拉西林钠/舒巴坦钠中高分子杂质的含量，测定方法及结果如下：

表2 注射用哌拉西林钠/舒巴坦钠各检验标准比较Tab 2 Comparison of the specification standard of Piperacillin sodium/sulbactam sodium for injection

表3 不同生产企业样品的质量考察结果Tab 3 Evaluation results of the products from different manufacturers

2.2.1 色谱条件。色谱柱：TSK-GEL G2000SWXL（30 cm×7.8mm，5µm）；流动相：0.01mol·L－1醋酸铵（用稀氨溶液调节pH值至7.0）-乙腈＝90∶10，流速：0.6m L·m in－1；检测波长：254 nm。

2.2.2 测定方法及结果。精密称取本品适量，加水溶解制成每1m L中含哌拉西林1mg的溶液，作为供试品溶液；另精密称取哌拉西林标准品适量，加甲醇适量使溶解，加水稀释制成每1m L中约含10µg的溶液，作为对照溶液。精密量取对照溶液20µL，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20%～25%，立即精密量取供试品溶液与对照溶液各20µL，分别注入液相色谱仪，记录色谱，按外标法以峰面积计算，保留时间小于哌拉西林的各高分子杂质总量以哌拉西林计。所有样品的测定结果详见表4。

从表4可见，不同生产企业产品中高分子杂质含量测定结果具有明显差异。

3 讨论

（1）2010年北京地区市售的复方抗生素制剂注射用哌拉西林钠/舒巴坦钠，经考察所有批次样品均符合现行标准规定，不同企业产品质量略有差异，主要表现在以下几个方面：①性状不同：不同的生产工艺造成产品的性状不同，主要分为直接无菌分装生产的粉末状固体和溶解后冷冻干燥制成的疏松块状物。②水分差异：各生产企业工艺控制的程度以及包装不同，造成药品水分含量的差异。③有关物质含量差异：与生产工艺有关，根据样品性状与有关物质含量之间的对应关系，可以看出冷冻干燥的制备工艺使成品中杂质含量水平较低，似更适合本品的生产。④无水物含量：由于各生产企业产品中哌拉西林和舒巴坦的比例不同（生产企业A二者比例为2∶1，其他各生产企业二者比例为4∶1），因此每1mg中的含量水平不同。

表4 不同生产企业样品中高分子杂质含量测定结果比较Tab 4 Results of content determ ination of high molecular im purities in products from differentmanufacturers

（2）我国现行法定检验标准中均未控制哌拉西林中高分子杂质的含量，而此次在21批产品中均检出了高分子杂质，含量在0.42%～2.66%之间，不同生产企业的样品存在明显差异。根据前述，高分子杂质是引起不良反应中过敏反应的主要原因。通过10 000例临床试验[10]结果显示，同类抗生素的高分子杂质含量低于某一限度时（青霉素V钾＜0.2%、阿莫西林＜0.1%、氟氯西林＜1.5%等），对于青霉素过敏史患者的过敏反应发生率处于较低水平，为0.2%～0.7%。注射用哌拉西林钠/舒巴坦钠的不良反应发生率日渐上升，据统计[2]，其中有1/3的不良反应为过敏反应，因此更应该严格控制样品中易引起过敏反应的高分子杂质含量。建议在检验标准中增加哌拉西林高分子杂质含量检查项。

[1]孙明杰，吕华冲，王 霆.注射用哌拉西林钠/舒巴坦钠（2∶1）[J].中国新药杂志，2007，16（13）：1 061.

[2]董 涛.32例注射用哌拉西林舒巴坦钠（2∶1）不良反应分析[J].中国医药导报，2009，6（29）：121.

[3]王成刚，刘海涛，王俊秋，等.不同生产企业注射用哌拉西林钠/舒巴坦钠的质量考察[J].中国临床药理学杂志，2010，26（11）：839.

[4]国家食品药品监督管理局.国家食品药品监督管理局标准（试行）YBH21102005[S].2005.

[5]国家食品药品监督管理局.国家食品药品监督管理局标准（试行）YBH21472005[S].2005.

[6]国家食品药品监督管理局.国家食品药品监督管理局标准（试行）YBH02642004[S].2004.

[7]国家食品药品监督管理局.国家食品药品监督管理局标准（试行）YBH04382005[S].2005.

[8]国家食品药品监督管理局.国家食品药品监督管理局标准（试行）YBH16532005[S].2005.

[9]金少鸿，胡昌勤.β-内酰胺类抗生素过敏反应研究进展[J].中国新药杂志，1994，3（4）：38.

[10]胡昌勤.抗菌药中高分子杂质的特性和抗菌药过敏反应（上）[J].中国药师，2006，9（3）：238.