胡安青

羚贝止咳糖浆由紫菀(蜜)、茯苓、麻黄、知母、金银花、陈皮、半夏(姜)、前胡、远志(制)、平贝母、罂粟壳、山楂、羚羊角等13种中药组方，能宣肺化痰、止咳平喘，用于治疗小儿肺热咳嗽及痰湿咳嗽。方中陈皮为芸香科植物橘 Citrusreticulata Blanco及其栽培变种的干燥成熟果皮，能理气健脾、燥湿化痰，用于胸脘胀满、食少吐泻、咳嗽痰多。橙皮苷为陈皮的主要有效成分。笔者用反相高效液相色谱(RP－HPLC)法测定羚贝止咳糖浆中橙皮苷含量，方法简便、快速、重现性好，可用于产品的质量控制。

1 仪器与试药

AG135型电子天平(瑞士梅特勒);紫分光光度计(日本岛津);2695型高效液相色谱仪(美国Waters)。橙皮苷(C28H34O15)对照品(中国药品生物制品检定所，批号为110721－200613);甲醇(色谱纯)，水(纯化水);羚贝止咳糖浆(吉林某制药股分有限公司，批号分别为 20100302，20080902，20090405)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:Zorbax－C18柱(250 mm×4.6 mm，5μm);流动相[1]:甲醇 －醋酸 －水 (35∶4∶61);流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;进样量:10μL;检测波长:283 nm。理论塔板数按橙皮苷计为4 285。

2.2 溶液制备

精密称取橙皮苷对照品16.80 mg，置20 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成对照品贮备液(每1 mL含橙皮苷840.0μg);再精密量取对照品贮备液5 mL置10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，得橙皮苷对照品溶液(每1 mL含橙皮苷420.0μg)。取样品5支，精密量取20 mL，置水浴上蒸至近干，用适量硅藻土拌成松散状，加甲醇50 mL，超声处理20 min，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液即得供试品溶液。取不含陈皮的阴性样品，同法制备阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

空白干扰试验:按处方比例称取除陈皮外的其他药味，按制备工艺制成阴性样品，依法进样分析。结果主成分出峰处无干扰。色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图

标准曲线绘制:分别精密量取橙皮苷对照品贮备液(840.0μg/mL)1，3，5，7，10 mL，置 10 mL 容量瓶中，定容，摇匀，进样分析。以峰面积(Y)为纵坐标、相应质量浓度(X)为横坐标绘制标准曲线，得回归方程 Y=694.204 X+0.156，r=0.999 9(n=5)。结果表明，橙皮苷质量浓度在84.0～840.0μg/mL范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验:取同一橙皮苷对照品溶液，重复进样5次，记录峰面积。结果的 RSD为1.0%(n=5)。

重复性试验:取样品1批，依法测定其橙皮苷含量。结果平均含量为 0.37 mg/支，RSD 为 0.6%(n=5)。

稳定性试验:取同一供试品溶液，室温放置10 h，每隔一段时间进样1次，记录峰面积。结果橙皮苷峰面积平均值为3 471，RSD为 0.3%(n=5)。

加样回收试验:取6份已知含量的样品(批号为0810013)10 mL，依法制备供试品溶液，精密加入橙皮苷对照品适量，测定含量，计算回收率。结果见表1。

表1 橙皮苷加样回收试验结果(n=6)

2.4 样品含量测定

取供试品溶液和对照品溶液，各进样5μL，读取峰面积值，按外标法计算含量。结果批号为0810013，070516，070518的样品中橙皮苷含量分别为 0.37，0.36，0.38 mg/支(n=3)。

3 讨论

试验表明，橙皮苷在283 nm波长处有较大吸收，其他成分在该波长处无干扰，因此可选择此波长作为检测波长。

通过试验，确定了羚贝止咳糖浆中橙皮苷的含量测定方法。该法简便、可靠，为羚贝止咳糖浆的质量控制提供了依据。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:化学工业出版社，2005:132.