徐 栋 王兆钧 王春维 张 怡

核苷酸（nucleotide，NT）是组成细胞的重要成分，它广泛参与细胞构成、供能、代谢等生命过程，是体内不可缺少的成分。外源核苷酸对初生动物，尤其是处于免疫应激及肝损伤的动物尤为重要，而一般日粮中的核苷酸不能满足其需要，在以玉米、豆粕为主的日粮中核苷酸更加缺乏。张永青等（2007）研究表明，在日粮中添加0.2%核苷酸能显著提高断奶仔猪的饲料利用率，并有改善日增重和采食量的趋势。此外，周兴华等（2009）研究发现，饲料中添加酵母核苷酸能显著提高锦鲤幼鱼增重率、特定生长率，降低饵料系数。但目前的研究主要集中在生长性能方面，关于核苷酸对动物免疫指标的影响缺乏系统的研究。本试验采用自制高核苷酸饲料原料替代部分血浆蛋白粉，旨在探讨高核苷酸饲料原料对断奶仔猪生长性能和免疫指标的影响。通过对仔猪血清生化指标和免疫指标的分析，进一步研究高核苷酸饲料原料对断奶仔猪生长性能和免疫指标产生影响的原因。

1 材料与方法

1.1 试验动物及分组

平均体重（9.68±0.73）kg的（30±3）日龄杜长大三元杂交断奶仔猪12头，按初始体重随机分成2组，分别为对照组和试验组。每组内设6个重复，每个重复1头猪，共12栏。每个处理分别饲喂对应日粮。

1.2 试验设计

各组日粮营养水平相同，对照组不添加高核苷酸，试验组添加1.5%自制高核酸饲料添加剂。试验分为两个阶段，第一阶段试验0～14 d（断奶后2～3周），第二阶段试验15～28 d（断奶后4～5周），试验期总共28 d。

1.3 试验日粮

对照组采用玉米-豆粕-鱼粉型基础日粮，试验组在基础日粮中添加1.5%的自制高核酸饲料原料以替代部分血浆蛋白粉。两组日粮配方保持消化能、蛋白、钙、磷和赖氨酸等含量接近。日粮组成及主要营养水平见表1。高核苷酸饲料原料由武汉工业学院畜禽饲料工程技术研究中心生产。

表1 日粮组成及营养水平(风干基础)

1.4 饲养管理

试验猪饲养在同一间猪舍内，单笼饲喂，自由采食饮水，室温保持在（25±3）℃。预饲5 d后，早晨空腹逐头称重，作为起始体重，进入正式试验。每天喂料4次，投料时间为早上 7：00、11：00、16：00 和 20：00。给食以吃饱而食槽无剩余为原则，保证充足清洁饮水，每天打扫猪舍1次（中午12：00）。每天记录各组投料量与剩余量，并观察猪的生长发育、采食等健康情况。试验结束时，早晨空腹，前腔静脉采血10 ml。在未加抗凝的离心管中分别注入4 ml血液，倾斜放置，凝固后立即离心（3000 r/min，10 min），取上清液，分装后保存于-20℃冰箱中，待测血清生化指标。

1.5 检测指标与方法

1.5.1 生长性能指标

试验期间每日记录饲料消耗，试验的第1、14、28 d仔猪空腹称重。计算日增重（ADG）、日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。

1.5.2 血液生化指标

测定血清中尿素氮（Blood urea nitrogen，BUN）、乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase，LDH）和碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，AKP）水平。

样品由武汉市第七医院采用日立7020全自动生化分析仪检测。

1.5.3 血清免疫指标

测定血清中白介素－2（IL－2）、干扰素－γ（IFN－γ）、G 型免疫球蛋白（IgG）、M 型免疫球蛋白（IgM）、A 型免疫球蛋白（IgA）。IL－2采用放免法测定，IFN－γ采用ELISA法测定，免疫球蛋白采用免疫比浊法测定。以上指标由北京华英生物技术研究所检测。

1.6 数据处理

采用SPSS 11.5统计软件对数据进行方差分析并作Duncan's法多重比较，结果以平均值±标准差表示，以P＜0.05作为差异显著性判断标准。

2 结果与分析

2.1 高核苷酸饲料原料对生产性能的影响（见表2）

表2 各试验组断奶仔猪的生产性能（平均值±标准差）

由表2可知，两组的日增重、日采食量和料重比差异不显著（P＞0.05）。试验期第一阶段试验组日增重较对照组提高了7.38%（P＞0.05）；第二阶段试验组日增重低于对照组（P＞0.05）；全期组间无显著差异。试验说明，在断奶2～3周（试验0～14 d）内高核苷酸饲料原料能提高仔猪日增重。试验期第一阶段试验组较对照组平均日采食量增加了2.90%（P＞0.05）；试验第二阶段组间日采食量无明显变化（P＞0.05）；试验全期组间日采食量无显著差异。试验期第一阶段试验组料重比有所降低（P＞0.05）；第二阶段试验组料重比高于对照组（P＞0.05）；试验全期试验组料重比低于对照组，组间无显著差异。

2.2 高核苷酸饲料原料对血液生化指标的影响（见表3）

表3 各试验组仔猪的血液生化指标（平均值±标准差）

由表3可知，试验组血清尿素氮含量高于对照组（P＞0.05）；组间乳酸脱氢酶活性无显著差异（P＞0.05）；试验组中碱性磷酸酶含量较对照组有显著提高（P＜0.05）。

2.3 高核苷酸饲料原料对血清免疫指标的影响（见表4）

表4 高核苷酸饲料原料对仔猪血清免疫指标的影响

由表4可知，试验组血清IL－2和INF－γ水平比对照组分别提高了33.65%和44.45%（P＜0.05）；试验组IgG、IgM与IgA水平高于对照组，差异不显著（P＞0.05）。试验说明，断奶仔猪日粮中添加高核苷酸饲料原料能提高仔猪的免疫功能。

3 讨论

3.1 高核苷酸饲料原料对仔猪生长性能的影响

试验结果表明，在断奶早期用高核苷酸饲料原料替代血浆蛋白粉能提高生长性能，并在一定程度上提高采食量和饲料利用率。这与乔建国等（2008）的研究结果基本一致，乔建国等在断奶仔猪日粮中添加0.25%核苷酸能提高饲料利用率，并有改善日增重和采食量的趋势。冯尚连等（2000）的研究表明，饲料中添加核苷酸对仔猪和肥育猪有促生长、降低料重比的作用。这可能与动物在受到免疫应激、快速生长和应激时，对核苷酸的需求量增加有关（邬小兵,2008）。本试验中，试验组与对照组相比，高核苷酸饲料能提高仔猪生长性能，但差异均不显著，这可能是因为本试验中试验组采用高核苷酸饲料原料替代部分血浆蛋白粉，血浆蛋白粉从营养角度来讲是一种良好的饲料原料，但其生产成本高，更重要的是血浆蛋白粉存在动物性饲料原料同源性污染问题，英国爆发的疯牛病就是由于饲喂同源性饲料原料而大规模蔓延，采用生物技术制备的高核酸饲料不会产生同源性污染问题。

在试验第二阶段，对照组各项指标均优于试验组。这可能是随着试验的进行，仔猪的断奶应激和环境应激逐渐减小。同时，仔猪机体各项功能趋于完善，自身合成的核苷酸量已能满足需求。从仔猪的日粮来看，血浆蛋白的氨基酸组成对于仔猪来说更接近于理想状态，利于仔猪利用。

3.2 高核苷酸饲料原料对仔猪血液生化指标的影响

3.2.1 高核苷酸饲料原料对血清尿素氮的影响

很多研究均把血清尿素氮水平的高低作为评价仔猪生长表现、体内蛋白质合成、日粮粗蛋白利用效率的指标(D.Torrallardona,2002)。一般认为，血清中尿素氮含量下降意味着蛋白质分解速度的降低，蛋白质沉淀加强，血清尿素氮含量升高表明体内蛋白质分解代谢增强，氮沉积减少（Coma 等，1995；Tagari，1964）。本试验结果显示，对照组血清尿素氮含量要低于试验组，差异不显著。这可能是由于血浆蛋白粉的氨基酸组成要优于高核苷酸饲料原料中氨基酸组成，血浆蛋白粉中氨基酸更利于被仔猪肠道完整吸收，并进入仔猪血液循环从而使血清尿素氮含量降低；但外源核苷酸能促进胃肠道的发育，这导致了试验组仔猪生长性能要优于对照组。

3.2.2 高核苷酸饲料原料对血清酶活性的影响

碱性磷酸酶是营养物质代谢的关键酶，在骨骼形成以及脂肪代谢过程中起到重要作用。血清碱性磷酸酶活性高低可以反映动物生长速度和生产性能，活性提高有利于提高日增重（伍革民等，1999；杨华等，2001）。据研究，碱性磷酸酶活性与猪的日增重成正比（易国华，1999）。本试验中试验组的血清碱性磷酸酶活性比对照组高了13.93%，差异显著（P＜0.05）。结果与生长性能结果的趋势一致。乳酸脱氢酶是糖代谢中重要的酶，催化乳酸脱氢成为丙酮酸或丙酮酸还原为乳酸，即参与了能量物质的有氧氧化与无氧酵解。武艳萍等（1995）报道，具有应激敏感性猪的乳酸脱氢酶活性高于正常猪，所以乳酸脱氢酶活性常作为选择应激抵抗猪的指标之一。

3.3 高核苷酸饲料原料对仔猪血清免疫指标的影响

3.3.1 高核苷酸饲料原料对血清IL－2和IFN－γ的影响

IL－2、IFN和NK细胞组成一个免疫调节网络参与机体免疫调节。本试验结果表明，高核苷酸饲料原料能提高血清IFN－γ和IL－2水平，两种细胞因子均可通过增强细胞毒性T淋巴细胞（CTL）、自然杀死细胞（NK）杀伤活性以及单核巨噬细胞的抗病毒能力，增强机体的免疫功能，这与Kulkarni等（1994）和Yamauchi（1996）等的研究结果一致。Navarro等（1996）试验结果证明，外源核苷酸能促进T淋巴细胞的增殖反应以及IL－2或IFN的分泌，提高NK细胞和巨噬细胞活性，促进迟发性超敏反应。

3.3.2 高核苷酸饲料原料对血清免疫球蛋白水平的影响

IgA具有粘膜免疫，激活补体旁路。IgM在体内最早产生，但是持续的时间短，它是机体初次接触抗原物质最早产生的抗体，也有抗菌、抗病毒和中和毒素的功能。在机体受到病原感染后与补体结合，溶解病原体的作用很强，在抗感染中起着“先锋”作用。IgG是血清中浓度最大、半衰期最长的一类免疫球蛋白，占球蛋白总量的75%～80%，IgG是动物受到抗原刺激后体内产生的能与抗原特异性相互作用的一类球蛋白，是主动免疫后机体产生的主要抗体，动物机体抗感染的主力，在体内发挥抗菌、抗病毒、抗毒素等免疫学活性，在体液免疫中最为重要。因此，断奶仔猪血清中IgG、IgM和IgA提高，在一定程度上可以减少仔猪腹泻的发生。

本试验中试验组血清免疫球蛋白水平均有高于对照组的趋势，这说明在断奶仔猪日粮中添加高核苷酸饲料原料可以在一定程度上提高断奶仔猪机体的体液免疫功能。

4 结论

①仔猪日粮中添加高核苷酸饲料原料能在仔猪断奶后14～21 d内提高仔猪生长性能，但断奶21 d后效果不明显；②高核苷酸饲料原料能提高仔猪免疫功能。