碳酸氢钠浸提－钼锑抗比色法测定土壤有效磷的注意事项

2009-04-01程乐明陈良刘建雷刘松峰柳听海

现代农业科技 2009年3期

程乐明　陈　良　刘建雷　刘松峰　柳听海

摘要介绍了碳酸氢钠浸提-钼锑抗比色法测定石灰性和中性土壤有效磷的注意事项，以供参考。

关键词Olsen法；测定；土壤有效磷；注意事项

中图分类号S153.61文献标识码B文章编号 1007-5739（2009）03-0205-01

国家农业标准中，采用碳酸氢钠浸提－钼锑抗比色法（Olsen法）测定石灰性土壤中（中性及酸性土可参照使用）的有效磷含量（其中操作规程以下简称规程），其中校准曲线或回归方程较易做出或求出，因此也较容易测定。但是，要提高其测定准确性，减轻劳动量还需要注意以下几点。

（1）所用的试剂要按规程要求准确配制。一是选用质量合格的仪器、药品、试剂、纯水，要求测定者首先对要使用的仪器进行校准，在试剂的配制中注意观察药品、试剂、纯水的颜色，发现异常要查找原因；二是精确称取或量取；三是按规程要求的步骤顺序配制，调节酸碱度。但需要说明的是：①该规程要求的钼锑抗显色剂，称取的抗坏血酸（C6H8O6左旋，旋光度+21°－22°）0.5g溶于100mL钼锑贮备液中测定的结果，土壤有效磷含量要低于称取1.5g抗坏血酸溶于100mL钼锑贮备液中测定的结果。②配制磷标准贮备液的KH2PO4 要选用优级纯的，而且要经过105℃烘干2h，并冷却后再称取配制。

（2）所需试剂要按规程要求保存与使用。钼锑贮备液要盛放于棕色瓶中，避光存放；钼锑抗显色剂要现用现配。

（3）所用的器械要反复冲洗干净，有的还要干燥。测定中所用的（刻度、胖肚）吸管、塑料瓶、瓶盖、漏斗、三角瓶、容量瓶、瓶塞、比色皿要反复冲洗干净，塑料瓶、瓶盖、漏斗、三角瓶需烘干后再用。

（4）要严格土液比、温度、振荡频率及振荡时间。由于这4个方面对浸提出的磷含量有至关重要影响，因此一定要严格控制。①要严格土液比。即风干土样准确称取2.50g（电子天平先预热30min，再校准后使用），加入的碳酸氢钠浸提剂准确量取50.00mL。②要严格浸提温度。可把浸提剂先放在恒温（25±1）℃的环境中，调温至（25±1）℃，再加入到称取的待测土样塑料瓶中；振荡要使用恒温水浴振荡机，先使水温调至（25±1）℃，并保持该水温振荡。③严格振荡频率及时间。使用恒温水浴振荡机振荡，振荡频率应调为（180±20）rpm，振荡时间为（30±1）min后，立即过滤。

（5）盛有风干土样的塑料瓶，在加入浸提剂后，要盖紧瓶盖，摇匀后再振荡。

（6）过滤要使用无磷定量滤纸，若发现滤液混浊，要重新过滤。

（7）在吸取（量取）、称取所需试剂、溶液、药品时，不仅质量（体积）要准，而且不能污染和相互污染。

（8）在吸取5.00mL钼锑抗显色剂加入盛有系列溶液或浸提液的容量瓶中时，要缓慢加入，并慢慢摇动，排出CO2气体，再用纯水定容摇匀。要避免试液溢出。

（9）定容摇匀后的待测系列溶液或试样溶液，显色温度要保持在20℃以上，若室内温度过低，可放置于30～40℃的恒温箱中保温30min（温度要一致），使其充分显色，取出冷却后再比色测定。

（10）测定吸光度的1cm光径比色皿，可用稀盐酸浸泡一夜，再依次用自来水、纯水冲洗干净，泡于纯水中待用，若长期不用应放置于干燥盒内。

（11）测定吸光度的比色皿，在出厂时应经过配对。未配对的，测定人员可将其刷洗干净后，自行配对，从中选用经调零后吸光度相差±0.001A的比色皿，最好选择吸光度一致的比色皿。使用时要使光滑面对准光路，操作人员操作时要手持毛面，擦拭干净外面的液体后，再放入比色槽内。

（12）测定前应确保紫外－可见分光光度计能够正常使用。①要配备合适的稳压器，并接地线，使电压稳定，周围无振动干扰。②光路要对正。可先在比色槽内不放比色皿，检查其吸光度是否一致，不一致的要进行调整。③要先遇热30min，再测定吸光度。

（13）测定时刷洗干净的比色皿，要先用待测试液冲刷几遍，再倒入待测试液测定吸光度（若此时仍有小的CO2气泡，要用手指轻弹出后再测定）；测定后倒出试液，用纯水冲刷几遍，再倒入下一个待测试液（要先用该试液冲刷后）进行测定。

（14）据资料介绍，可采用紫外－可见分光光度计，在波长880nm处比色，测定吸光度，而不必使用活性炭进行脱色，以减少劳动量。但在实际测定中，若不加入1g无磷活性炭，在波长700nm处比色，测定结果偏低。

（15）如果土壤有效磷含量较高，可吸取5.00mL浸提溶液，另外再吸取5.00mL碳酸氢钠浸提剂，以保持显色时溶液的酸度。计算结果按所取浸提液的分取倍数计算。

（16）每批样品进行测定，要做空白试验、平行试验，并带一个参比样（参比样可自制）。以检测测定结果的准确性，不准确的要查找原因，重做。