宋　辉

摘要介绍了蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒的检测原理，分析了在快速检测过程中易出现的问题，并提出相应的对策，以加快蔬菜农药残留快速检测方法的推广应用。

关键词蔬菜农药残毒；快速检测；存在问题；对策

中图分类号S481+.9文献标识码A文章编号 1007-5739（2009）03-0155-01

蔬菜农药残毒快速检测技术是一种生化方法，以丁酰胆碱脂酶被抑制程度（抑制率）来检测蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类的农药残毒。该方法可对含农药残留的蔬菜进行粗筛，将一部分含药量较高的蔬菜控制在市场之外，避免农药中毒事故发生，让人们吃上相对放心的蔬菜。该方法适用于叶菜类、果菜类、豆菜类、瓜菜类、根菜类（除胡萝卜、茭白等）中甲胺磷、氧化乐果、对硫磷、甲拌磷、久效磷、倍硫磷、杀扑磷、敌敌畏、克百威、涕灭威、灭多威、抗蚜威、丁硫克百威、甲萘威、丙硫克百威、速灭威、残杀威、异丙威等的农药残毒快速检测。

1农药残毒快速检测原理

有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酶的活性，造成神经传导介质乙酰胆碱的积累，影响正常传导，使昆虫中毒致死，根据这一昆虫毒理学原理，进行农药残留检测。检测过程为蔬菜样本提取液加入反应试剂乙酰胆碱酯酶后，用分光光度计测定吸光值随时间的变化，计算出抑制率，判断蔬菜中有机磷或氨基甲酸酯类农药的残毒情况。操作流程见图1。在分光光度计410nm处有最大吸收峰。根据3min前后吸光值之差可测得酶活性被抑制程度（用抑制率表示）。抑制率≥70%时，蔬菜中含有某种有机磷或氨基甲酸酯类农药残毒，抑制率＜70%时，算合格。

2检测过程中出现的问题与对策

2.1同批次蔬菜检测结果重现性不同

因为此方法为快速检测，所以每次检测过程中使用的定量加液器的量及取样量各有差异。另外，操作方法和仪器系统存在误差等，致使同批次检测结果重现性不同。

对策：①对同批次蔬菜抽样要有公正性和代表性。要保证抽样工具和容器洁净、干燥、无异味，不会对样品造成污染。并及时封存，保护样品的待检性状。②取样检测时，样品量要保证，叶菜类2g，非叶菜类4g；取样部位均匀合理，多点混取，要有代表性，尽量取可食用部分。③定量加液器的量要均匀一致。④振荡后要充分静置，避免细小菜未被管嘴吸到比色皿中，影响吸光值。⑤定期对仪器进行自检，严格按照操作规程操作，可减少误差，有效避免结果重现性不同。

2.2抑制率偏小

试验通过酶被抑制的程度（即抑制率）来反应农残是否超标。抑制率的正常范围是-10%~110%，对照组/样本的吸光值在3min后与3min前的差值（ΔAc/ΔAs）范围是0.3~0.8，当抑制率值偏小，即小于-10%时，原因：一是酶在参加反应之前就已部分失活，导致ΔAc<0.3。二是底物与酶未反应完全。

对策：①酶是生物催化剂，较其他催化剂更加脆弱，易失去活性，因此酶作用一般要求比较温和的条件，如常温、常压、接近中性的酸碱度。在培养箱中酶的最适温度是37.5~38.5℃，提取液的pH值控制在8.0。在试验过程中，酶液可暂时置于室内的冰盒上，做完试验后，酶液应储存在0~5℃的冷藏室内。②取底物时，用移液枪直接加到比色杯内，尽量不要溅到壁上，加完底物后快速摇晃比色皿，再将比色皿放入仪器内立即进行比色。

2.3抑制率偏大

当抑制率出现不正常偏大时，主要原因是在上机比色前酶就已与底物发生反应或底物已经分解失活，致使ΔAs<0.4。

对策：从样本培养结束到上机比色速度要快，尽量在1min内完成，而且培养时间要准确把握，不能超过15min，或换底物重新做空白。

3其他注意事项

①仪器应置于干燥、通风的环境中，仪器工作以前，应预热5~10min，使仪器状态稳定。在测量的过程中不要打开仪器样品室盖，以免影响测量结果。②在制备待测液过程中，加入提取液后需震荡1~2min，并保证上清液静置3~5min，使残留物浸提完全。且酶液、显色剂不能漏加或多加。③注意手不要摸比色皿的光面，要拿毛面，光面对准光路，里面的液体要超过2/3，且不得溢出，以保持光面外侧的洁净。④对葱、大蒜等辛辣味较浓的蔬菜，采用酶抑制法速测，出现假阳性的可能性极大，如果要验证结果是否正确，必须重新取样重新做试验。⑤生菜、小白菜、豆角、芹菜等为必检项目，因为这几类蔬菜或容易残留农药，或使用农药次数多、密度大。⑥检测结果仅起监督作用，且仅是对含有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的粗筛，对其他农药的检测无作用。

4参考文献

[1] 杜宗绪，孙竹生，杨连学.农产品农药残留分析技术进展[J].潍坊高等职业教育，2006（1）：43-45.

[2] 王伟，方婷，邵晖，等.蔬菜中农残快速检测方法的研究[J].中国食品工业，2008（4）：44-45.