李艳萌 徐德龙 夏向峰 吴西彩★ 李园园 律洁

结肠癌是临床常见的消化道肿瘤，在近些年来的流行病学统计中发现，其发病率与死亡率居高不下，给患者自身身心健康及家庭和社会带来极大负担。在结肠癌的发生与进展过程中，癌细胞的转移严重影响了患者的预后［1］。上皮间质化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）指的是在机体中由于生理与病理状态改变，使得上皮细胞通过多种复杂的特殊事件向间质样细胞转化，在这个过程中丧失极性并使得上皮细胞粘附，同时获得转移能力，引起癌细胞的迁移与侵袭［2］。近年来，国内外大量研究表明EMT 在多种恶性肿瘤慢性炎症引起的侵袭、迁移过程中发生，包括乳腺癌、胃癌、肝癌及非小细胞肺癌等［3］。肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）是肿瘤微环境中的主要炎症介质，通过诱导多种趋化因子建立复杂的网络来诱导肿瘤的生长与转移［4］。最近的报道显示CXC 趋化因子配体10/CXC 趋化因子受体3（CXC chemokine ligand-10，CXCL10/CXCchemokine receptor3，CXCR3）信号通路与癌细胞的侵袭和转移相关［5］。但目前关于TNF-α 否能通过调控趋化因子表达而影响EMT 介导的结肠癌细胞转移作用尚不清楚。因此本研究将探讨TNF-α 是否能够通过调控SW480 细胞中CXCL10/CXCR3信号通路的表达从而影响EMT 的发生，最终引起细胞的迁移发生。

1 材料与方法

1.1 实验试剂

SW480 细胞购自中科院上海细胞库；PCR 引物由上海生工公司合成；TRIzol Reagent 总RNA提取试剂盒、CXCL10、CXCR3、Vimentin、Fibronectin及E-cad抗体及二抗购自美国Abcam 公司；β-actin抗体购自北京中杉金桥公司；重组人TNF-α 购自北京义翘神州公司；siRNA-CXCR3 购自赛默飞世尔科技有限公司。

1.2 实验仪器

细胞培养箱购自德国赛默飞有限公司（Thermoforma 3111）；……