张 越,杨 超

(北华大学附属医院,吉林 吉林 132011)

口腔鳞状细胞癌(OSCC)是全球最常见的恶性肿瘤之一。在2020年全球报告了超过10 000例OSCC新发病例,导致5 000人死亡[1]。当前用于治疗OSCC的疗法包括手术、化学疗法和放射疗法[2]。虽然在诊断和临床治疗的OSCC已经取得进展,但由于疾病的进展和复发,OSCC患者的5 a生存率仍然相对较低[3-4]。因此,确定潜在的生物标志物对改善OSCC的预后和制定治疗策略至关重要。

微小RNA(miRNA/miR)是一类非编码RNA,转录后通过识别靶向mRNA的3′非翻译区(3′-UTR)的互补序列调节基因表达[5-6]。miRNA在多种生物学过程中发挥重要功能,包括发育、细胞增殖和凋亡[7-8]。研究[7,9-14]发现,几乎在多种癌症中均观察到miRNA的表达失调,包括肾癌、结直肠癌、肝癌、膀胱癌、胰腺癌、胃癌和乳腺癌等,miR-758-3p可以抑制肿瘤的发生发展。研究[15-16]发现,miR-758-3p通过靶向MDM2和MTER抑制肝细胞癌的进展。miR-758-3p通过靶向MEPE调节子宫颈浸润癌的发展。然而,目前尚未有研究报道miR-758-3p在OSCC中的生物学功能。因此,本研究通过检测miR-758-3p在OSCC中的表达,探究miR-758-3p对CAL27细胞增殖、迁移及侵袭的影响,旨在为OSCC的治疗提供新的靶标。

1 材料和方法

1.1 主要试剂

正常牙龈上皮细胞及OSCC细胞系(CAL27、SCC9和SCC25,上海斯信生物科技有限公司);miR-758-3p和miR-NC(上海吉玛制药技术有限公司);Lipofectamine 2000转染试剂、BCA蛋白检测试剂盒(北京索莱宝科技有限公司);反转录试剂盒(深圳晶美生物工程有限公司);MMP2、MMP9抗体(北京中杉金桥生物试剂公司)。

1.2 细胞培养与转染

在含有10%FBS的DMEM(Gibco; Thermo Fisher Scientific,Inc.)中培养HGE细胞和CAL27细胞;将HGE细胞和CAL27细胞接种于6孔板中,采用Lipofectamine 2000(Invitrogen)按照说明书转染至相应细胞内。……