李东玉，相丛超，封志明，张淑青，樊建英，贾明飞，胡金雪

（石家庄市农林科学院，河北 石家庄 050025）

在组培室中开展马铃薯试管苗培育是马铃薯育种的主要手段之一，通常采用马铃薯茎尖脱毒、组培快繁进行马铃薯种质资源保存及组培苗批量生产[1-9]。组培工作包括培养基的制备，无菌苗、脱毒苗的获得、培养、保存与扩繁，接种室、培养室的管理消毒及污染瓶苗处理等流程，为达到预期的培养效果均需执行严格的操作程序，其目的：一方面是保证组培材料无病毒、细菌、真菌及虫害的污染；另一方面是保证所培育种薯种性纯正。为避免病毒病，开展了大量有关试管苗病毒、细菌、真菌污染和防治研究，并形成了较为成熟的技术[10-14]。近年来，组培室受虫害污染逐渐频繁，但试管苗虫害情况及对策的相关研究仍较缺乏，对试管苗相关的科研生产造成了较大的影响[15-20]。

蓟马（ThripstabaciLindeman）是副新翅类缨翅目昆虫的统称，是试管苗最为常见的一种典型虫害，其个体小、易隐藏、繁殖快、飞行能力强、寄主植物广且对农药抗性强，对蔬菜、花卉、水果等作物的危害很大。组培室一旦发生蓟马虫害且没有得到及时、有效控制，会快速在组培瓶苗内传播[21-23]，严重为害试管苗的生长。其成虫、若虫以锉吸式口器锉破植物表皮吸取汁液，取食植物组织，为害植物[24-25]。蓟马可侵染组培苗叶片及茎秆，主要对叶片造成损坏，它常沿着叶脉锉食组织、吸取汁液。试管苗受到侵染后，叶片上出现透明、银白色的斑点或条带，并伴随大量蓟马粪便黑点。侵染严重时斑点连接成片，进而导致叶片失绿、变黄，植株停止生长，直至干枯死亡。由于试管苗在封闭的培养瓶内培育，蓟马往往会在瓶中不断地继代扩繁，最终形成较大的虫口密度。在同一组培室内，虫体可在瓶苗间迅速扩散，在短期内危及整个组培室[26-28]。试管苗受蓟马侵染后极易出现真菌、细菌污染或在继代培养中产生二次污染。综上所述，为保证马铃薯组培苗规模化生产的有效开展，蓟马虫害防治工作十分重要。

吡虫啉和噻虫嗪属新烟碱类杀虫剂，源于天然烟碱杀虫剂，通过破坏昆虫神经中枢系统使其麻痹进而死亡，具有高效、广谱、哺乳动物毒性低和环境安全的特点[26,29]。该类杀虫剂可有效防治鞘翅目、鳞翅目、缨翅目等昆虫，适用于种子处理、茎叶处理和土壤处理等多场合，是蓟马虫害防治的首选手段。本文通过以石薯1号组培苗为试验材料，探究不同新烟碱杀虫剂的虫害防治效果，并评估其对试管苗生长的负作用，旨在探索一种针对马铃薯试管苗典型虫害——蓟马的防治方法，从而促进马铃薯产业健康、可持续发展。

1 材料和方法

1.1 供试材料及地点

试验在石家庄市农林科学研究院马铃薯无菌组培室中开展，以石薯1号马铃薯组培苗为试材。石薯1号是石家庄市农林科学研究院最新培育的早熟马铃薯新品种，2014年通过河北省农作物品种审定，是河北省首个审定本省中南部二季作区春播早熟品种。

采用了2种典型新烟碱类杀虫剂：70%吡虫啉水分散粒剂，由上海沪联生物药业（夏邑）股份有限公司生产；25%噻虫嗪水分散粒剂，由山东惠民中联生物科技有限公司生产。MS培养基由MS干粉（北京易生组培有限公司生产）配制。

1.2 试验方法

1.2.1 蓟马防治试验方法

本试验采用随机区组设计，设6个处理，1个对照处理。在MS培养基中加入不同浓度、不同种类杀虫剂，以未加入药剂的试管苗为对照，每个组培瓶中接入5棵试管苗，3次重复，其他培养条件均保持一致（表1）。

表1 防治试验处理

1.2.2 药剂解除试验方法

本试验采取随机区组设计，将生长在不同杀虫剂培养基中的组培苗扩繁3次后，移栽至未加入药剂的MS培养基，再进行扩繁0～2次，共设7个处理，见表2。

表2 药剂解除试验处理

1.3 测定项目及方法

1.3.1 药剂防治试验

试管苗生长15 d后，随机选取幼苗并测量其根长、株高、单株叶片数、鲜质量。记录病叶数，并计算发病率（发病率＝病叶数/单株叶片数×100%）。

1.3.2 药剂解除试验

组培苗生长15 d后，随机选取瓶中组培苗，测量幼苗根长、茎粗、株高、单株叶片数、节间距。

1.4 数据统计

采用DPS 9.50和WPS Office（10.1.07468）软件进行数据分析。

2 结果与分析

2.1 不同药剂处理对试管苗生长情况的影响

2.1.1 不同药剂处理的试管苗根长及株高生长情况

由表3可知，试验处理15 d后，A处理组（70%吡虫啉水分散粒剂）和B处理组（25%噻虫嗪水分散粒剂）均可降低试管苗根长，其中B1处理（25%噻虫嗪水分散粒剂2 000倍液）对试管苗生长抑制最明显，根长为40.73 mm，显著低于CK1处理的根长（62.30 mm）。除A3处理（70%吡虫啉水分散粒剂20 000倍液）的株高较CK1处理高外，其余处理均低于CK1，其中B1处理（25%噻虫嗪水分散粒剂2 000倍液）抑制植株株高最明显，为66.50 mm，显著低于CK1处理的株高（97.87 mm），A2株高（70%吡虫啉水分散粒剂15 000倍液）与CK1差异不显著，A1（25%噻虫嗪水分散粒剂10 000倍液）、B2株高（25%噻虫嗪水分散粒剂3 000倍液）、B3（25%噻虫嗪水分散粒剂4 000倍液）之间株高差异不显著，且均显著低于CK1。

表3 不同药剂处理对试管苗生长情况的影响

2.1.2 不同药剂处理的试管苗单株叶片数情况

由表3可知，整体来看，7个处理间无显著差异，且以B3（25%噻虫嗪水分散粒剂4 000倍液）最高，其次为A2（70%吡虫啉水分散粒剂15 000倍液）。随着70%吡虫啉水分散粒剂药剂浓度的升高，试管苗单株叶片数呈现先升高后降低的趋势；随着25%噻虫嗪水分散粒剂浓度的升高，试管苗单株叶片数也随之升高，且B3最高，经线性分析，25%噻虫嗪水分散粒剂浓度与单株叶片数之间回归方程式为：Y＝0.3X＋5.2，R2＝1，说明25%噻虫嗪水分散粒剂浓度与单株叶片数存在线性正相关关系。

2.1.3 不同药剂处理的试管苗鲜质量情况

由表3可知，整体来看，A处理组（70%吡虫啉水分散粒剂）的鲜质量高于B处理组（25%噻虫嗪水分散粒剂）和CK1，且以A3（70%吡虫啉水分散粒剂20 000倍液）处理最高，为2.32 g，A2（70%吡虫啉水分散粒剂15 000倍液）次之，且A2、A3（70%吡虫啉水分散粒剂20 000倍液）与CK1均达到了显著差异水平；随着70%吡虫啉水分散粒剂浓度的升高，试管苗鲜质量呈现升高的趋势，经线性分析，70%吡虫啉水分散粒剂浓度与试管苗鲜质量呈现正相关关系，回归方程式为：Y＝0.14X＋1.92，R2为0.959。随着25%噻虫嗪水分散粒剂浓度的升高，试管苗鲜质量呈现先降低后升高的趋势，其中B3处理（25%噻虫嗪水分散粒剂4 000倍液）的鲜质量高于CK1处理，但差异不显著；B1（25%噻虫嗪水分散粒剂2 000倍液）、B2（25%噻虫嗪水分散粒剂3 000倍液）均显著低于CK1。

2.1.4 不同药剂处理的试管苗发病情况

由表3可知，A处理组和B处理组试管苗发病率均显著低于CK1，其中A1（70%吡虫啉水分散粒剂10 000倍液）、B1（25%噻虫嗪水分散粒剂2 000倍液）、B2（25%噻虫嗪水分散粒剂3 000倍液）处理发病率均为0.00%，其他3个处理的试管苗发病率表现A3（70%吡虫啉水分散粒剂20 000倍液）＞B3（25%噻虫嗪水分散粒剂4 000倍液）＞A2（70%吡虫啉水分散粒剂15 000倍液）。

2.2 生长抑制作用解除试验

由表4可知，在使用70%吡虫啉水分散粒剂10 000倍液和25%噻虫嗪水分散粒剂2 000倍液培养基进行扩繁3次后，试管苗生长出现了显著抑制作用，通过使用无药物培养基扩繁可以显著解除抑制作用。在采用无药剂培养基扩繁后，C2、C3处理根长较C1处理分别显著提高了51.43%、123.96%，株高较C1处理分别显著提高了85.41%、198.97%，最长节间距较C1处理分别显著增加280.00%、746.60%，最短节间距较C1处理分别显著增加42.92%、128.76%，但单株叶片数较C1处理分别显著减少28.51%、21.44%，茎粗较C1处理分别显著减少11.92%、35.10%，C2处理茎粗和最短节间距均与C1处理差异不显著。D2处理根长、茎粗、株高、最长节间距、最短节间距均与D1处理差异不显著，叶片数较D1处理显著减少18.56%；D3处理根长、株高、最长节间距较D1处理分别显著提高161.27%、228.52%、960.96%，茎粗较D1处理显著减少28.40%，叶片数、最短节间距均与D1处理差异不显著。而C3处理的根长、株高、茎粗、叶片数、节间距均与CK2处理差异不显著；C3、D3处理的根长、株高、茎粗、叶片数、节间距均与CK2处理差异不显著。综上所述，在使用70%吡虫啉水分散粒剂10 000倍液和25%噻虫嗪水分散粒剂2 000倍液培养基扩繁3次后，再采用无药剂培养基扩繁2次均可以更有效解除杀虫剂生长抑制作用。

3 结论

3.1 蓟马防治试验

在培养基中添加70%吡虫啉水分散粒剂和25%噻虫嗪水分散粒剂的药剂，可以有效抑制试管苗生长，且B1处理（25%噻虫嗪水分散粒剂2 000倍液）对试管苗生长抑制最显著，根长为40.73 mm，株高为66.50 mm，均显著低于其他处理及对照。在培养基中添加70%吡虫啉水分散粒剂10 000倍液和25%噻虫嗪水分散粒剂2 000倍液、3 000倍液有效防治了蓟马，组培苗发病率均为0.00%。

3.2 药剂解除试验

C3处理（药剂培养基扩繁3次后，无药剂培养基扩繁2次）根长较C1处理（药剂培养基扩繁3次）显著提高了123.96%，株高较C1处理显著提高了198.97%，C3处理之后的根长、株高均高于CK2处理，但与CK2处理差异均不显著；D3处理的根长、茎粗、单株叶片数、株高、节间距均与CK2差异不显著，且D3处理的根长、株高均显著高于D1处理；说明在药剂培养基扩繁3次后，再采用无药剂培养基扩繁2次可以快速解除杀虫剂生长抑制作用，达到与正常植株同等的生长状况。

因此，70%吡虫啉水分散粒剂10 000倍液和25%噻虫嗪水分散粒剂2 000倍液药剂均可以防治试管苗中的蓟马，且在采用无药剂培养基扩繁2次可以快速解除杀虫剂生长抑制作用。

4 讨论

蓟马物种丰富多样，严重为害农作物的健康、可持续发展。防治方法包括化学防治、物理防治、生物防治和农业防治。目前，化学防治是防治蓟马的主要手段，方法多样、见效块、使用便捷。

本试验通过利用不同浓度的吡虫啉、噻虫嗪药剂对马铃薯试管苗蓟马进行防治，70%吡虫啉水分散粒剂10 000倍液和25%噻虫嗪水分散粒剂2 000倍液药剂加入MS培养基中均可以有效防治马铃薯试管苗蓟马，且可以通过降低试管苗株高、根长等生理指标，进而降低试管苗生长速度。同时，在进行药剂培养基扩繁3次后，使用无药剂培养基培养试管苗可以较快恢复试管苗的生长，对试管苗生长并未产生影响。本试验同罗智敏等[29]的研究结果一致。

在使用化学药剂防治蓟马时，应该注意科学用药，防止蓟马对化学药剂产生抗性。本试验采用单一农药对马铃薯试管苗蓟马进行防治研究，后续可以采用机制不同的几种农药轮换使用，以降低马铃薯蓟马对化学药剂的抗性。