杨运昕 赵映蕾 朱冰滢 郑欢珂 朱雪滢

浙江省宁波市效实中学白杨校区(315012)

高中生物必修1进行了光合色素的提取和分离实验,通过实验观察光合色素的种类和颜色。出于对光合色素的兴趣,在查阅资料时了解到,柱层析法也可以将光合色素分离,因此进行了用柱层析法分离光合色素的实验,将柱层析与纸层析进行比较;并对光合色素提取液进行吸光度的测量,验证光合色素的功能,深化对光合色素种类、颜色和功能的理解。

1 实验原理

绿叶中的光合色素能够溶于有机溶剂而不溶于水,因此可用无水乙醇等有机溶剂提取光合色素。在色素分离的环节,因为各种色素在层析柱填充物硅胶上的吸附力不同,极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附,当采用溶剂洗脱时,发生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的过程,吸附力较强的组分,在层析柱中移动的速度慢;吸附力较弱的组分,移动的速度快,从而形成若干色带,使各种色素相互分离。

2 材料用具

2.1 实验材料

新鲜的菠菜叶。

2.2 实验药品、试剂

无水乙醇、碳酸钙粉末、二氧化硅晶体、正己烷、氯化钠晶体、硅胶、展开剂[石油醚∶乙酸乙酯=6∶4(体积比)]、无水硫酸镁。

2.3 实验仪器

研钵、布氏漏斗、抽滤瓶、烧杯、具塞试管、圆底烧瓶、容量瓶、比色皿、循环水泵、梨形分液漏斗、洗身球、层析柱、分光光度计等。

3 探究过程

3.1 研磨

称取15 g新鲜菠菜叶,剪碎,放入研钵中,加入少量二氧化硅晶体、碳酸钙粉末和20 mL无水乙醇,充分研磨,研磨物成绿色糊状。……