范 燚,张春玲,赵 伟,陈 露,邸铁涛,周世勇,魏良纲,张 艳,董源源

糖尿病溃疡(diabetic ulcers,DUs)作为一种慢性、难愈性疾病,是糖尿病的常见并发症之一。DUs的发病机制复杂,传统治疗方法伤口愈合缓慢、治疗时间长、治疗成本高,给患者带来痛苦[1]。寻找有效可行的干预靶标,成为相关领域的研究热点和难点。血管内皮细胞长期暴露与于高糖环境下,易出现炎症损伤,从而导致血管病变[2]。线粒体自噬通过自噬方式靶向选择性清除功能受损的线粒体,从而维持线粒体功能网络动态平衡。研究[3]表明,线粒体自噬水平降低,且与其它机制的交互作用是DUs难愈合的关键原因之一。磷酸酯酶与张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog,PTEN)诱导假定激酶(PTEN induced putative kinase,PINK)1/帕金森病蛋白(Parkin)通路通过调控自噬可识别并清除受损的线粒体,是目前较公认的自噬途径,被广泛用来评估自噬水平[4]。丹黄散是由丹参、大黄、当归、没药、沉香、松香几味药物组成的复方散剂,具有活血化瘀、祛腐生肌、利湿解毒之功效。前期研究[5]显示,丹黄散具有促进糖尿病大鼠溃疡愈合的效果,可促进创面肉芽组织生长,然而其作用机制尚未明确。该研究以PINK 1/Parkin通路介导的线粒体自噬为靶向,探究丹黄散对高糖诱导的血管内皮细胞损伤的影响,并探讨其是否能通过Pink1/Parkin信号通路介导的线粒体自噬,维持创面细胞线粒体正常结构与功能,促进DUs创面愈合。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1实验细胞 人脐静脉血管内皮细胞(货号:DFSC-EC-01)购自上海中乔新舟生物科技有限公司。

1.1.2实验药物 丹黄散为贵州中医药大学第二附属医院院内制剂(黔药制字Z 03 100 240)。……